毕赤酵母表达重组植酸酶酶学性质的比较研究

通过酶学性质比较毕赤酵母GS115表达的E.coli K12植酸酶(appA)及其突变体植酸酶(appA NR)和黑曲霉植酸酶(phyA)的最适pH、温度、热稳定性及对胃蛋白酶和胰蛋白酶的耐受性.结果表明,在95℃,加热10 min,appA NR可残余90％左右的活力,而其他两种只残余20％～50％的活力;appAN...     

真菌诱导物对丹参毛状根氧化酶活性的影响

从一种广谱病原真菌－大丽轮枝菌的菌丝体中制备激发子,用该激发子和商品生物制剂－酵母提取物分别诱导对数生长期的丹参毛状根,发现丹参毛状根过氧化物酶（POD）,过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）活性在诱导后均显著增加,三种酶的活性并随诱导时间和诱导剂的浓度的增加而改变,大丽轮枝菌激发子的作用强于酵母提取物,表现为诱导酶活性峰值较高和峰值时间提前。     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性.采用正交实验方法, 以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16(45)正 交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGCS0-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对 肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bel-2表达的影响.结果表明:当料液比为1:4、pH为8.5、加酶 量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1:4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温 度为40℃、酶解时间为2h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bc1-2的表达.紫贻贝酶解多肽具有 抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的.     

胆碱酯酶抑制法检测辛硫磷农药残留

利用胆碱酯酶水解碘化酰胆碱后形成的硫代胆碱，与二硫双对硝基苯甲酸发生化学反应生成黄色产物，在412nm比色测定。利用此法测定酶、底物的添加量以及保温温度和保温时间对酶活力的影响，还研究了不同浓度与保温时间的辛硫磷对胆碱酯酶活力的抑制情况。获得了胆碱酯酶优化的反应条件，结果还表明胆碱酯酶对辛硫磷比较敏感，其抑制中浓度为I50为3．9049μg/L。     

Trxs基因对铝胁迫下转基因大麦幼苗叶片抗氧化酶的影响

以过量表达硫氧还蛋白S基因(Trxs)的转基因大麦为材料,采用水培法研究0.05 mmol/L AlCl3胁迫条件下转基因大麦株系(LSY-11-1-1 )幼苗叶片的蛋白质氧化损伤、膜脂氧化损伤以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),过氧化氢 酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等抗氧化酶活性的变化.结果显示:(1)在0.05 mmol/L AlCl3胁迫处理下大麦叶片蛋白质羰基含量和丙二醛含量显著高于非处理样品,表明铝胁迫 已造成大麦幼苗的氧化损伤;转基因大麦幼苗叶片的蛋白质羰基含量和丙二醛含量显著低于非转基因对照:在胁迫处理6 h、72 h与96 h时其蛋白羰基含量分别为对照的94.4%、87.0% 与71.9%;MDA含量为对照的66.32%、75.74%和74.25%.(2)处理样品叶片中GSH-PX、CAT和A PX等抗氧化酶活性有不同程度的增加;与非转基因对照相比,转基因大麦幼苗叶片的抗氧化酶系活性普遍高于对照:GSH-PX活性在处理12 h、24 h、48 h、72 h与96 h时分别是对照的 1.19倍、1.21倍、1.12倍、1.24倍与1.35倍;APX活性在处理6 h达到高峰时是对照的106.7% .这些结果表明,过量表达Trxs可以有效提高转基因大麦幼苗叶片中上述抗氧化酶类的 活性,缓解铝毒对大麦幼苗叶片蛋白质和膜脂的氧化损伤,从而提高转基因大麦幼苗对铝胁迫的抗性.     

小鼠脊髓颈段一氧化氮合酶阳性神经元的分布研究

用NADPH-黄递酶组织化学方法观察小鼠脊髓颈段一氧化氮合酶阳性神经元(Nitric oxide synthase,NOS)的分布,结果显示在颈髓胶状质和中央管周围灰质内有较多一氧化氮合酶神经元分布,在前角基部内侧有较大的NOS神经元.后角浅层和中间带分别含有密集和中度密集的一氧化氮阳性纤维;在颈髓的前索白质和后索白质中也有一氧化氮合酶阳性神经元的分布,NOS阳性神经元的纤维较细,有串珠状膨大,相互交织成疏密不等的网络.这些神经元大多显示Golgi染色外观,它们尚不能与任何已知的神经递质类型神经元单一对应.     

金钗石斛查尔酮合酶基因的生物信息学分析

利用生物信息学工具及方法对金钗石斛查尔酮合成酶基因进行分析。结果显示,金钗石斛查尔酮合酶基因(DnCHS)完整的CDS为1 188 bp,共编码395个氨基酸,蛋白分子量为43.10 kD,理论等电点为6.22,且该蛋白为亲水性蛋白,不存在信号肽,很可能定位在细胞质中。同时,蛋白质二级和三级结构的分析表明,DnCHS蛋白由33.92%的α螺旋,8.35%的延伸链以及57.72%的无规则卷曲组成。系统进化分析显示,DnCHS与红掌的亲缘关系最近。     

含铁酶催化脂肪酸脱羧制备脂肪烃的微观机理研究进展

能源消耗的增加、化石资源的减少和环境问题对再生能源的研发提出了严峻挑战.近年来,烷/烯烃的生物合成是该领域的研究热点之一.因为脂肪烃类不仅是高值化学品,而且是理想的可再生燃料.人们已相继发现了一些能催化烃类合成的蛋白酶,它们可以催化脂肪酸及其衍生物脱羧生成相应的烷/烯烃,为探索化石燃料的可再生替代品提供了思路.这些蛋白...     

水解蛋白酶ZL-1在饲料鱼溶浆中的酶解应用

鱼溶浆是鱼粉加工副产物,富含蛋白,浆液粘度大．酶解加工鱼溶浆有利于将大分子蛋白质水解成肽和氨基酸等,降低浆液粘度,从而提高鱼溶浆的营养性及加工运输性．采用单因素实验和正交实验分析法系统研究并优化了利用ZL-1酶解鱼溶浆的工艺条件．得到的最佳酶解条件为：浆料浓度为10%,温度为55℃,不调节p H,ZL-1的加酶量为0.75%干物质浓度,酶解时间为2 h．最佳的工艺实验条件的验证结果表明,水解液中的氨基氮含量比优化前提升了129.47%,粘度降低了84.83%,用酶处理鱼溶浆显著增加了其流动性．     

红麻脱胶菌的筛选及其产酶条件

从红麻产地的土壤中分离出一株产果胶酶活性较高的菌株。采用初筛、复筛后获得在果胶平板上透明圈大、酶活最高的菌株c721作为生物脱胶的目的菌,探讨该菌株最适生长条件和最佳产酶条件,最佳生长条件为:氮源为1.5%的酵母浸出液,碳源为0.5%的果胶,pH 7.0,温度30℃,培养时间24h。最佳产酶的氮源、碳源分别为酵母浸出液、果胶,培养温度30℃,pH 7.0以及产酶高峰期为18~32 h。c721菌株对红麻脱胶时间为5d,与天然水沤麻相比时间缩短了55%。