星点设计-效应面优化广西莪术挥发油的提取工艺

采用星点设计-效应面优化方法研究广西莪术（Curcuma kwangsiensis S．G．LeeetC．F．Liang）挥发油的提取工艺,星点设计中的考察因素为加水倍量和提取时间,用水蒸气蒸馏法提取挥发油,以总挥发油的体积作为评价指标,对各因素的各水平进行二项式拟合,按二项式描绘三维效应面,从三维效应面上选取对总挥发油的体积较佳的实验条件。结果二项式拟合复相关系数较好,r=0．98157,最佳提取工艺为：加水8倍,提取时间6．5h。依最佳条件提取的挥发油体积为0．742ml,与理论预测值的偏差为-1．45％。星点设计-效应面优化法对提取广西莪术挥发油的实验指标具有较好的优选性和预测性。     

莪术多糖的分离纯化

研究莪术多糖分离纯化的最佳条件,优化莪术多糖的提取纯化工艺,为进一步探讨莪术多糖的生物活性奠定基础.莪术经热水提取,酒精沉淀,脱色,脱蛋白得粗多糖.粗多糖用50%、75%乙醇分级沉淀得2个级分CZ1、CZ2,进行DEAE-纤维素柱层析.调节DEAE-纤维素的pH值,比较洗脱曲线的不同.CZ1经DEAE-纤维素柱层析得到1个组分,CZ2在酸性、中性条件下层析得2个组分,在碱性条件下得1个组分,随pH升高,回收率降低,纯度增高.各纯化得到的多糖组分经纸层析、琼脂糖凝胶电泳鉴定为单一成分.实验证明,pH是影响层析的一个重要因素,因此莪术多糖的最佳纯化pH值为7.0.     

莪术醇通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路介导的自噬抑制乳腺癌细胞的增殖活性

目的 探讨莪术醇对乳腺癌细胞增殖的影响及可能作用机制。方法 MTT法检测不同浓度莪术醇对MCF-7细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC₅₀);细胞分为对照组、莪术醇组、740Y-P组和莪术醇+740Y-P组,检测细胞克隆形成能力、细胞凋亡情况、细胞自噬情况及相关蛋白表达。结果 莪术醇可抑制MCF-7细胞增殖,IC50为50.63μmol/L。与对照组比较,740Y-P组细胞克隆形成数、p62、脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达升高,凋亡率、Beclin1蛋白、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LCⅠ降低,莪术醇组上述指标与740Y-P组趋势相反;而莪术醇+740Y-P能逆转莪术醇对细胞的抑制作用。结论 莪术醇可抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活自噬有关。     

0．2％莪术醇饵剂防治森林害鼠试验研究

试验研究了0．2％莪术醇饵剂对云南大理古城区以中华姬鼠为优势种,大绒鼠为常见种的森林害鼠的抗生育效果,结果表明平均取食率为95％,雌成鼠的怀胎下降率达到67．1％,成鼠胎仔数呈下降趋势,未发生天敌动物2次中毒及人、畜、禽误食中毒现象。表明该药剂具有较好的抗生育效果,适口性好,不污染环境,使用安全,具有环保型生物农药的特点。     

莪术油中莪术烯的分离及结构鉴定

采用硅胶柱、TLC等色谱技术对莪术油中倍半烯萜类成分莪术烯进行了分离提纯,经IR、NMR、MS等谱学方法确证其结构.利用13C NMR、DEPT谱及COSY、HSQC等二维谱核磁技术对莪术烯的化学位移进行了准确归属,对文献中报道的数据归属进行了修正.莪术烯的分离纯化及结构确证的研究为莪术油制剂的质量控制提供了有效数据.     

中药莪术的研究概况

近年来有关中药莪术的研究得出,莪术中主要含有莪术油、姜黄素及多糖类成分.莪术油常采用水蒸气蒸馏法和超临界流体萃取法提取,姜黄素采用乙醇回流法、多糖类采用热水浸提法提取.莪术油含量测定方法有可见分光光度法和气相色谱法等,姜黄素的含量测定方法有高效液相色谱法、薄层扫描法等,微量元素可应用等离子体发射光谱法进行测定.莪术具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗菌、抗病毒、抗化疗、抗白血病、抗癫痫、抗前列腺增生,促进机体免疫力,改善胃动力等作用.莪术的临床应用为莪术油相关制剂,一般包括注射液、滴眼液、软膏剂、乳剂、栓剂、霜剂、β-环糊精包合物和微球等.莪术在抗肿瘤和抗血栓方面具有广阔的开拓空间,发展前景十分诱人.     

基于网络药理学和分子对接探究三棱-莪术抗乳腺癌的作用机制

运用网络药理学和分子对接探究三棱-莪术药对抗乳腺癌的有效活性成分及分子机制。通过中药系统药理学数据库与分析平台检索并筛选出三棱、莪术的有效活性成分和对应作用靶点,运用OMIM数据库、GeneCards数据库检索乳腺癌的疾病靶点。运用Cytoscape 3.7.2软件绘制药物-成分-疾病-靶点网络图。利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein- protein interaction,PPI)网络,使用Cytoscape中MCODE插件进行分析并筛选出前10个核心靶点。借助DAVID数据库对作用靶点进行基因本体及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)通路富集分析,并绘制成分-靶点-通路网络图。最后通过AutoDock Vina等软件进行分子对接,验证核心成分与核心靶点的相互作用。结果表明,通过筛选得出7种活性成分、73个作用靶点,三棱-莪术与乳腺癌共同靶点43个。核心成分为常春藤皂苷元、β-谷甾醇、芒柄花黄素、豆甾醇、反式软骨酸,PPI网络显示其核心靶点为JUN、CASP3、PTGS2、ESR1、MPK14、PPARG、SIRT1、NOS3、TGFB1、NOS2。KEGG富集分析得到72条通路,根据P值筛选出与乳腺癌相关的前20条,主要涉及PI3K-Akt通路、VEGF通路、p53通路、MAPK通路等。分子对接显示活性成分与核心靶点之间有较好的结合力。研究表明三棱-莪术药对抗乳腺癌具有多成分、多靶点、多通路的特点,为该药对在临床中的应用提供了理论依据。     

醋莪术配方颗粒HPLC指纹图谱研究

采用HPLC法,色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈—水为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,色谱柱柱温30℃,流速1.0 mL/min.建立了醋莪术饮片HPLC指纹图谱共有模式,标定了8个主要共有峰,并利用计算机辅助相似性评价系统对指纹图谱进行相似度分析,表明相似度较大.实验结果表明:该指纹图谱研究方法简便可靠,重复性好,可作为目前醋莪术配方颗粒内在质量控制有效方法之一.