链霉菌的氨基糖苷类抗生素3′—磷酸化酶APH(3′)抑制剂性质初探

分别采用丙酮沉淀、硫酸铵分步沉淀和柱层析技术从链霉菌85—39发酵液中分离、纯化出APH(3′)抑制剂85—39,并对其部分理化性质进行了测定。结果表明:抑制剂85—39为相对分子质量大于3000的水溶性多肽物质,对APH(3′)表现出强的抑制作用。该抑制剂经丙酮沉淀后的水抽提液对热、碱较稳定,对酸较不稳定,但经离子交换柱初步层析纯化后,其稳定性较差。     

玉米根细胞正面向外和内翻外质膜囊泡的分离

利用水双相分配分离法从玉米根细胞提取原生质膜囊泡。其质膜成分特异的K~+,Mg~(2+)—ATP酶活性比膜粗提液高1.67倍。其他细胞器标记酶活性在质膜组分中很低或没有。特异染色电镜形态学定量统计表明质膜组分中90％以上是质膜囊泡。去污剂刺激ATP酶活性实验证明,约92％囊泡是正面向外的。应用此法也证明NAD(P)H—氧化酶可能是跨膜存在的,其催化Fe~(3+)还原的位点可能在膜的内侧。应用高盐冻—融法并结合水双相分配分离法处理正面向外囊泡,可获得内翻外质膜囊泡,实验证明它不仅纯度高而且封闭。     

含固定化酶颗粒反应器的动力学特性研究

在连续流动带搅拌的反应器中,突然导入固定化的酶粒子,随着流入反应器的流速不同,存在着两类响应:最小型和衰减型响应.这些响应可由临界Thiele模数决定,当Thiele模数大于临界值时,流出反应器的底物浓度呈衰减性响应;否则,呈最小型响应。决定不同响应的临界速度可由简单的实验方法求出,从而可决定反应速度常数。本文除扼要叙述这种方法的理论推导外,通过对固定化α-葡萄糖淀粉酶的动力学实验,证明随流入反应器流体流速的变化,的确存在两种不同的响应,并可确定临界流速及反应速度常数和Michaelis常数。     

高等植物中的谷胱甘肽过氧化物酶及其功能

硒是人类、动物和某些微生物的必需微量元素,人类和动物谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase,GSH-Px)的组成成分,其主要生理功能是催化过氧化物分解,阻断脂质过氧化链锁反应和清除某些有机氢过氧化物,如核酸氢过氧化物,胸腺嘧啶氢过氧化物等,保护膜结构和功能的完整性.Rosenfeld和Beath根据植物对硒累积的倾向性,将植物分为三大类,推测硒可能为黄芪属(Astragalous)所必需外,还没有确切证据表明为其它植物所必需.据世界各国的报道和20余年我们单位对各种农作物等硒含量及其与环境关系的研究结果表明,所     

黄瓜花叶病毒复制酶基因的克隆及其植物表达载体的构建

黄瓜花叶病毒(CMV)是一种正链RNA病毒,在全世界分布很广,至少可侵染85科365属中的757种植物.将经过改造的CMV复制酶基因导入植物,可获得比导入外壳蛋白基因等抗性水平高、时间长的工程植株.本文首次报道了中国株系CMV复制酶基因的克隆及其核苷酸序列,构建了3’末端不同长度缺失的植物表达载体.     

液膜法提取发酵液中的苯丙氨酸 Ⅰ.膜的配方及其稳定性

采用乳化液膜法，对从发酵中分离和浓缩苯丙氨酸（Ｐｈｅ）的液膜配方和稳定性进行研究。得出了既能保持较好的膜稳定性又能保持较高分离效率的膜组成：载体二（２－乙基己基）磷酸５％，表面活性剂（ＥＭ－３０１）５％，膜溶剂（工业煤油）９０％。内相试剂选用１．６ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ溶液。采用高强度（＞３２００ｒ／ｍｉｎ）制乳，能够有效地控制溶胀和破损率。对Ｐｈｅ的萃取结果表明：８０％以上的Ｐｈｅ能够从外相浓缩到内     

假单胞菌DM11的二氯甲烷脱卤素酶研究──Ⅱ．动力学性质和抑制剂

对来自假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）ＤＭ１１菌株的二氯甲烷脱卤素酶（简称ＤＭ１１脱卤素酶）的动力学性质和抑制剂进行了研究。用１／Ｖ对１／［ｓ］作图法，测出ＤＭ１１脱卤素酶以ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨ２Ｂｒ２、ＣＨ２Ｉ２、ＣｌＣＨ２Ｂｒ和ＣｌＣＨ２Ｉ等５种化合物为底物时的Ｋｍ值分别是６７、２０、５５、７和９μｍｏｌ／Ｌ，比活力分别是７７．８、１２３．３、７８．８、５６．１和６０．３ｍｋａｔ／ｋｇ蛋白。测定了１４种抑制剂对ＤＭ１１脱卤素酶的５０％抑制浓度（Ｉ５０）。甲基谷胱甘肽（ＧＳＣＨ３）是ＤＭ１１脱卤素酶的竞争性抑制剂，四硝基甲烷（ＴＮＭ）是非竞争性抑制剂，当甲基谷胱甘肽和四硝基甲烷与ＤＭ１１脱卤素酶一起保温时，甲基谷胱甘肽对酶有保护作用。     

“脾主肌肉”的生化研究──若干酶指标活性的测定

为了探讨“脾主肌肉”的机理，利用脾气虚的模型动物，测定肌肉、血液中与肌肉能量代谢物质代谢有关酶活性的变化，从这些指标的变化来了解脾与肌肉的关系。脾气虚模型动物制作是依据我所已建立的模型。通过实验发现，脾气虚模型动物肌肉中能量代谢和物质代谢水平明显低于正常组。肌肉抽提液内源性ＡＴＰ（三磷酸腺苷）的含量，磷酸肌酸激酶活性，这些与能量代谢有关的指标，脾气虚组明显低于正常组。而与肌肉物质代谢有关的酶：乳酸脱氧酶、谷丙转氨酶、α－羟丁酸脱氢酶等酶的活性，脾气虚组也明显低于正常组。根据脾气虚模型动物实验表明：脾气虚，机体运化功能不足，肌肉中能量供应不足，物质合成低下，造成肌瘦无力。该实验方法为更深入地探讨“脾主肌肉”机理开创一条新路。     

β－胡萝卜素在盐生杜氏藻（Dunaliella Salina）中积累机理的研究

以不同光照条件下生长的盐生杜氏藻为材料，通过测定叶绿体基质蛋白的含量发现，在低光照下叶绿体基质蛋白的含量为２６．４０ｇ／Ｌ，而在强光照下叶绿体基质蛋白为１１．５０ｇ／Ｌ。对这两种蛋白进行平板电泳皆为一条带，而在ＳＤＳ－凝胶电泳，低光照下为五条带（五个亚基），其Ｒ＿（ｆ１）值分别为０．４０，０．５０，０．６０，０；７０，０．７８；强光照下有四条带（四个亚基），其Ｒ＿（ｆ２）分别为０．５０，０．５８，０．６８，０．８０。通过改变ｐＨ值、提高温度和紫外线照射等，发现该蛋白具有酶活性并与β－胡萝卜素的合成有关。     

斜纹夜蛾NPV多角体基因的克隆和部分测序

本文对ＳＩＮＰＶ基因组作了酶解分析，测得其基因组大小为１４５ｋｂ，并用双酶法确定了ＳＩＮＰＶ基因组的ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔⅠ物理图谱。以含ＡｃＮＰＶ多角体基因的质粒ｐＡＣ－Ⅰ的ＳａｌＩ－Ｃ片段为探针，对ＳＩＮＰＶＤＮＡ酶切片段ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交结果，初步判断多角体基因定位于ＰｓｔＩ－Ｂ／Ｃ／Ｄ片段、ＢｇｌⅡ－Ｃ／Ｄ片段、ＢａｍＨＩ－Ｂ／Ｃ片段和ＥｃｏＲＩ－Ａ／Ｂ片段上，且ＳＩＮＰＶ与ＡｃＮＰＶ多角体蛋白基因有６４％的同源性，而以大肠仟菌质粒ｐＵＣ１９为载体对ＳＩＮＰＶ的多角体基因试克隆，得到带有ＢｇｌⅡ－ＰｓｔⅠ双酶切片段的２个克隆子。对这两个杂交阳性克隆子之一的核苷酸序列测定，表明插入片段与ＢｍＮＰＶ多角体基因上游序列亦有一定同源性。