温泉来源地芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质研究

以Geobacillus sp.WQJ-1基因组DNA为模板,利用PCR扩增获得成熟α-淀粉酶基因amy WQJ,构建重组质粒p ET-28a(+)-amy WQJ,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达.用镍柱亲和层析对粗酶液进行分离纯化,获得相对分子质量约为59 ku的重组酶r Amy WQJ.研究表明,该酶最适pH值为6.0,具有较好pH稳定性,最适温度为70℃;Ca~(2+)能提高该酶的热稳定性;Hg~(2+)、EDTA、SDS、Cr3+、Mn~(2+)、Cu~(2+)和Pb~(2+)对该酶活力具有不同程度的抑制作用,而Co~(2+)、Na+和β-Mercaptoethanol则具有促进作用.以可溶性淀粉为底物,该酶动力学参数Km为6.62 mg·m L-1,vmax为2 197.80μmol·(mg·min)-1;降解最适作用底物木薯淀粉的终产物为寡聚糖.     

响应面优化贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株YH-18产芽孢培养基和培养条件

【目的】贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株YH-18是优良的抗病促生微生物,其制成的微生物菌剂具有无害、高效、环保等特点。通过优化菌株YH-18的培养基组分和培养条件,提高发酵液中的有效活菌数,以期增加发酵液中的芽孢数,延长储存时间,降低发酵成本,提高其在工业化生产发酵中的质量效益。【方法】以贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)菌株YH-18发酵液芽孢数为质量指标,采用单因素分析法对发酵液培养基(碳源、氮源、无机盐及其浓度)和培养条件(温度、转速、初始pH、装液量、接菌量)进行初步筛选。将初筛结果结合响应面试验设计[plackett-burman(PB)、最陡爬坡试验、box-behnken design(BBD)],筛选出对贝莱斯芽孢杆菌菌株YH-18产芽孢影响最为显著的因素进一步验证,建立各显著性因素的二次回归方程模型,完成对菌株YH-18培养基组分和培养条件的系统优化。对比优化前后发酵液产品的去菌体滤液对根癌农杆病菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株C58生长的抑制效果。每隔4个月测定优化后发酵液中的活菌数和芽孢数,考察优化...     

胞映射及其绘图方法

简要地说明了胞映射法分析了非线性系统全局性态的理论和方法；提出了一种绘图数据的压缩存储算法。这种算法可以节省大量存储空间和传送数据所需的时间，为胞映射法解决工程实际问题提供了条件，根据图形情况可节省存空间１０－１０００倍，文中附有两个数值实例。     

地衣芽孢杆菌A.4041耐高温α-淀粉酶的纯化及性质

地衣芽孢杆菌A.4041（Bacillus，licheniformisA．4041）耐高温α-淀粉酶，经硫铁沉淀和垂直板制备凝胶电泳纯化，得到三种电泳均一的组分，α－Ⅰ，α－Ⅱ和α－Ⅲ．其相对质量分数分别为14.7％，32.2％和52.9％；等电点为5．2，5．4和5．5；相对分子质量为48000，55000和60000．酶作用于可溶性淀粉的米氏常数分别为4.5mg／mL，3．4mg／mL和2．6mg／mL．最适作用温度皆为90℃；最适pH为6.0～6.5；稳定pH范围皆为4～11．5在温度高于70℃，保温30min条件下，三组分的活力开始下降，但α－Ⅱ和α－Ⅲ在100℃，保温30min时仍分别保持15％和20％的残余活力，表明该酶的热稳定性良好．Ca2+，Mg2+，K+对酶明显激活；Cu2+，Fe3+，Zn2+，Al3+，EDTA、甲醛、戊二醛对酶强烈抑制．     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究Ⅲ.诱变株的选育及其产酶条件的研究

以地衣芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３号菌为出发菌株，在原生质形成和再生的最佳条件下制备原生质体，并对原生质体进行了多次诱变处理，从大量突变株进行筛选最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌株５３－Ｇ３８－６，产酶活力由１１０４Ｕ／ｍｌ提高到２２０８０Ｕ／ｍｌ．该诱变株最适产酶条件为：培养基由质量分数（ｗ／％）为胰蛋白胨１，酵母膏０．５，玉米粉５，Ｎａ２ＨＰＯ４１２Ｈ２Ｏ０．４，ＫＨ２ＰＯ４０．０３，Ｎａ２ＣＯ３０．１组成，ｐＨ自然，培养温度４２℃，培养时间４４～４８ｈ，ｗ／％为０．２的ＣａＣＯ３可提高酶的产量．酶作用的最适条件：６２℃，ｐＨ１０．０，ｐＨ在９～１０之间稳定     

转座子诱变甘蓝黑腐病菌所获胞外多糖突变体的类型

根据对转座子Ｔｎ５ｇｕｓＡ５诱变甘蓝黑腐病菌所获得３９株胞外多糖突变体的３种胞外酶活性和在含２％葡萄糖的ＮＹＧＡ培养基上的菌落形态的检测结果，将突变株分成５种类型。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明它们的突变位于基因组中的８个不同的位置，其中１个位于已鉴定的ｒｐｆ调控基因簇     

玉米芽尖培养和丛生芽发生

不同基因型的玉米芽尖分生组织在添加适宜浓度６－ＢＡ（６－苄基嘌呤）的改良ＭＳ培养基上，经过四周诱导培养和四周芽发育培养，获得高频率的丛生芽和再生植株，芽尖倍增数可达３～８芽／芽尖．通过比较试验，建立了利用玉米自交系芽尖分生组织的快速成苗培养体系，确立了诱导丛生芽发生的适宜培养条件和程序，其适宜６－ＢＡ浓度为９．０～１３．５μｍｏｌ／ｌ．芽尖倍增数因基因型的不同而有明显的差异     

玉米根细胞质膜硝酸还原酶和铁氰化物还原酶活性的关系

以玉米离体根和根细胞质膜(PM)为材料，研究了加铁培养和铁胁迫条件下铁氰化物还原酶(FCR)和硝酸还原酶(NR)活性，以及两种活性河的关系．实验结果显示铁胁迫条件下FC．R活性随培养天效变化较加铁培养下有较快增加，一定时间后又下降．在加入K，Fe(CN)。后，铁胁迫的离体根NR活性的下降明显快于加铁培养的离体根．根细胞PM在加入K3Fe(cN)。后，NR活性与对照比降低了5倍，甚至为零；当从介质中除去Fe抖后，NR活性成倍恢复．上述结果表明在铁胁迫条件下铁氰化物的还原与硝酸根的还原间存在着强烈的电子竞争．     

球孢白僵菌的孢子萌发及其细胞内异染质的研究

通过研究球孢白僵菌分生孢子及芽生孢子的萌发过程及其细胞内含物异染质小体的变化,发现芽生孢子的萌发率及生长速率高于分生孢子,生长不同阶段芽生孢子的大小百分率的变化有一定规律性,并发现细胞内异染质小体在不同萌发细孢中分布的不均一性.通过扫描电镜观察发现分生孢子形态构成的稳定性及其产生的微循环产孢现象和萌发孢子的连接现象.