猪肾溶茵酶的纯化和部分性质研究

猪肾溶菌酶提取液经过正丁醇脱脂,(NH4)2SO4沉淀,得到粗酶液,再经过CM-Sepharose FF阳离子层析柱和sephacryl S-100凝胶过滤层析纯化得到电泳纯的溶菌酶.该酶的比活力为162.45,提纯倍数为113.6,回收率为16.89%.该酶对溶壁微球菌作用的最适温度为45℃,最适作用的pH为6.0,在50℃以下和pH 4.5～9.0之间都有较好的稳定性.酶分子量约为15.0 kd,其米氏常数为0.013 5 g/m L.     

几个猪卵母细胞体外培养和受精的影响

比较了卵母细胞采集方法(剖解法,抽吸法,机械破碎法)、卵母细胞体外成熟培养方法以及猪卵泡液(PFF)质量浓度对猪卵母细胞培养和体外受精的影响.结果表明:采取剖解法采集猪卵母细胞、在猪卵母细胞成熟培养液中添加10%的PFF为最佳方法.微滴法与平皿法两种培养方法对猪卵母细胞培养和体外受精的影响无显著差异.     

大肠杆菌中重组猪生长激素提取方法及变复性的比较研究

通过对基因工程菌pgh／E．coli BL21用酶溶解、超声波处理、超声波处理与液氮冻融相结合三种方法进行破菌，用盐酸胍法进行变复性，提取重组猪生长激素(rpGH)．结果表明用超声波处理与液氮冻融相结合的方法裂解细菌，盐酸胍法变复性，rpGH的提取率最高，达72．16％；而用尿素法对rpGH在大肠杆菌内所形成的包涵体变复性，rpGH的提取率仅为49．82％．     

猪末端转脱氧核苷酸酶的分离纯化

末端转脱氧核苷酸酶催化脱氧垓苷三磷酸连接到单链多聚脱氧核苷酸的3′—OH末端。猪胸腺匀浆抽提液,经磷酸纤维素吸附层析,硫酸铵分级沉淀,DEAE—纤维素负吸附,葡聚糖凝胶G100过滤和两次羟基磷灰石柱层析,分离后得到该酶,纯化倍数达2736倍。葡聚糖凝胶G100过滤分离出三个活力峰,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示其分子量分别为60000,53000和32000道尔顿,其中53000组分比活最高,达每毫克蛋白3135活力单位。     

甘蓝型油菜Scu无花瓣突变体可溶性蛋白及过氧化物酶同工酶分析

为了分析甘蓝型油菜(Brassica napus)Scu无花瓣突变体花器官的生理和生化变化,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对其花器官可溶性蛋白表达和过氧化物酶同工酶活性差异进行分析.结果表明:在早期花发育过程中,甘蓝型油菜和无花瓣突变体花器官可溶性蛋白基本相同,而二者的过氧化物酶同工酶存在明显差异;在花蕾成熟阶段,二者的可溶性蛋白谱带差异明显,而过氧化物酶谱带特征基本相同,成熟花瓣器官的消失可能导致了可溶性蛋白表达的改变,而没有影响过氧化物酶的谱带特征.     

Analysis of cDNA sequence, protein structure and expression of parotid secretory protein in pig

Parotid secretory protein (PSP) secreted abundantly in saliva, whose function is related with the anti-bacterial effect. The PSP cDNA has been isolated from pig parotid glands by 3′ and 5′ rapid amplification of cDNA end (RACE), based on the conserved signal peptide region among the known mammalian PSP. The result of homologous comparison shows that pig PSP and human PSP shares the high identity at the level of the primary, secondary and tertiary protein structure. A search for functionally significant protein motifs revealed a unique amino acid sequence pattern consisting of the residues Leu-X(6)-Leu-X(6)-Leu-X(7)-Leu-X(6)-Leu-X(6)-Leu near the amino-terminal portion of the protein, which is important to its function. RT-PCR, Dot blot and Northern blot analysis demonstrated that PSP was strongly expressed in parotid glands, but not in other tissues.     

多花勾儿茶中儿茶素的提取分离与HPLC测定

以多花勾儿茶果实、叶及自制绿茶为原料,采用水浴法提取儿茶素,研究其最佳提取工艺.提取液经石油醚脱脂溶性色素后,采用大孔吸附树脂D941进行吸附分离,静态吸附和解析条件研究得出纯净水洗脱效果较好.多花勾儿茶果实、叶及自制绿茶吸附分离的纯化液,用色谱柱:Boston Green ODS PC18(4.6×250mm,5μm),检测波长279nm,流动相乙腈-0.4%磷酸(w(乙腈)∶w(0.4%磷酸)=13∶87),柱温35℃,流速1 mL/min,一次进样10μL来进行高效液相色谱(HPLC)检测,其结果显示,多花勾儿茶果实中儿茶素含量最低,自制绿茶中的儿茶素含量最高.     

二花脸猪染色体的G－带、C－带研究

以二花脸猪为材料，采用外周血淋巴细胞短期培养及Ｇ—带、Ｃ—带技术对其体细胞染色体进行分带研究．结果表明，不同细胞在Ｇ—带带型上呈现出带纹宽窄和染色深浅的变化，但每一对同源染色体及Ｘ、Ｙ性染色体都有其特殊的Ｇ—带核型；而Ｃ—带带型呈现出异形性；本文同时还分析了Ｃ—带异形性对品种鉴别的意义     

籍疏水花菁染料的荧光突变测定非离子表面活性剂临界胶束浓度

研究了近红外疏水花菁染料I在几种表面活性剂溶液中的荧光行为. 花菁I在水中及含有低浓度(小于临界胶束浓度,CMC)的曲通X-100溶液中表现出很弱的荧光,但当表面活性剂浓度达到CMC时,荧光显著红移并迅速增强到最大.这种荧光突变为曲通X-100的胶束形成提供了直观的指示,可据此建立一种测定其CMC的简单荧光方法.该法还适用于Brij-35的CMC测定,所测的CMC值与文献报道的结果十分吻合.     

猪Smad7和Smad9基因克隆、序列分析与组织表达图谱探究

本研究采用RT-PCR方法,从长白猪脑中克隆了 Smad7和 Smad9的基因 cDNA 全长。序列比对发现 Smad7和 Smad9在不同物种中保守性很高。同时,RT-PCR 检测发现：Smad7和Smad9在家猪各组织中广泛表达。这些结果提示：Smad7和 Smad9可参与家猪众多生理过程的调节。