大鼠肝癌细胞系5-羟色胺及其受体的免疫细胞化学定位

近年已发现除神经内分泌细胞肿瘤外,其它肿瘤也能分泌神经肽和经典的神经递质,某些结肠癌的癌细胞已被检出-羟色胺(5-HT).而且有人证明,5-HT能刺激结肠癌细胞的分裂增殖,5-HT1受体介导了这种作用.然而,5-HT及其受体在肝癌细胞的定位尚未见报道.我们以大鼠肝癌细胞系FSK 7902作为研究对象,采用免疫细胞化学方法观察了5-HT及其受体的分布,为进一步研究5-HT在肝癌细胞中的意义提供形态学依据.     

外源性p53基因对人胃癌细胞恶性增殖的影响

p53基因在细胞增殖调控过程中起重要作用,正常p53基因可使DNA受损的细胞增殖周期阻断在G1期以进行DNA修复,或启动细胞凋亡程序清除受损细胞,若p53基因缺失或突变,损伤后的细胞便会发生恶性增殖而形成肿瘤.约50%的人类肿瘤均有p53基因的异常改变.其中结直肠癌、肺癌、乳腺癌等常见肿瘤中p53基因的突变频率达50%～70%以上.基于这一原理,将野生型p53基因导入肿瘤细胞成为肿瘤基因治疗的策略之一.我国是胃癌高发区,胃癌发病率、死亡率在各类恶性肿瘤中均位居前列.因此,阐明胃癌发生发展过程中基因变异规律,探索胃癌治疗的有效方法,成为肿瘤研究的当务之急.研究表明胃癌中有较高频率p53基因缺失及突变,认为p53基因异常与胃癌发生、发展有重要关系.本项研究即是采用p53基因体外转染有缺陷的人胃癌细胞系,得到生长及致瘤性均有部分抑制的细胞,以探索采用p53基因治疗胃癌的可行性.1 材料与方法1.1 细胞培养及p53基因鉴定细胞:人胃癌BGC823细胞为北京医科大学附属人民医院建立,培养在含10%小牛血清的DMEM培养基中.染色体G带分析及荧光染色体原位杂交(FISH)显示有17号染色体部分缺失,Northern杂交分析也表明该细胞有p53基因表达水平下调.1.2 DNA转染通过脂质体介导将构建有野生型p53基因、突变型p53基因及无p5     

山奈酚抑制人胆囊癌细胞增殖及其对mTORC1通路的影响

目的:探讨山奈酚对人胆囊癌细胞(SGC-996细胞)增殖的影响及其机制.方法:采用浓度为0、25、50、75、100、125、150、175μmol/L的山奈酚干预SGC-996细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测SGC-996细胞的体外增殖能力;干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测P-S6K1及P-S6等哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)途径相关蛋白的表达.结果:干预24 h时,浓度为0～175μmol/L的山奈酚对SGC-996细胞增殖的抑制作用不明显;干预48 h时,浓度为75μmol/L及以上的山奈酚可明显抑制SGC-996细胞的增殖(P0.05);干预72 h时,浓度为50μmol/L的山奈酚也可显著抑制SGC-996细胞的增殖(P0.05).浓度为100μmol/L山奈酚干预48 h,可显著诱导细胞凋亡(P0.05),显著降低P-S6K1和P-S6蛋白的表达水平(P0.05).结论:在一定浓度范围内,山奈酚随浓度的增加和时间的延长而明显抑制SGC-996细胞的增殖,并诱导其凋亡,而对细胞增殖的抑制作用可能是通过影响mTORC1信号通路实现的.     

放射性纳米粒子可定向附着杀灭癌细胞

无论哪种癌症,当其开始转移和扩散到整个人体时,患者就会面临死亡的危险,医师已很难定位和治疗存在于多处的肿瘤。这种情况也许不久后就会发生改变,美国密苏里大学研究人员5月21日表示,他们找到了获取放射性纳米粒子的方法,该放射性纳米粒子能将癌症患者身体任何地方的淋巴癌细胞作为攻击的靶子。     

紫草素对人结肠癌细胞Lovo增殖与凋亡的影响

紫草素是从传统中药紫草中提取分离得到的一种醌甲基三萜,具有抗氧化、抗炎及抗肿瘤等药理活性.本实验研究紫草素对人结肠癌细胞的增殖和凋亡的影响.MTT法测定不同浓度紫草素对人结肠癌Lovo细胞增殖的影响;流式细胞仪检测紫草素对人结肠癌Lovo细胞凋亡率的影响.结果表明:紫草素以时间和剂量依赖性抑制Lovo细胞的增殖,并且早期凋亡和晚期凋亡细胞增多,凋亡率逐渐增加.从而可以推测紫草素具有治疗结肠癌的潜在作用.     

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.     

雷公藤红素对人肺癌细胞增殖与凋亡的影响

雷公藤红素是从传统中药雷公藤中提取分离得到的一种醌甲基三萜,具有抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等药理活性.本实验研究雷公藤红素对肺癌细胞的增殖和凋亡的影响.用MTT法测定不同浓度雷公藤红素对肺癌细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测肺癌细胞的凋亡率;用DAPI染色测定雷公藤红素对肺癌细胞的细胞核的影响.实验显示,雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制肺癌细胞的增殖,并且晚期凋亡细胞和死亡细胞增多,细胞核逐渐破裂.实验结果表明,雷公藤红素具有抗肺癌的作用.     

北五味子多糖对人膀胱癌细胞体外增殖和凋亡作用的研究

目的 探讨北五味子多糖(Schisandra chinensis polysaccharide, SCP)对体外培养的人膀胱癌细胞T24的作用.方法 采用SCP 50、100、200μg/mL 3个剂量处理体外培养的人膀胱癌细胞T24,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测SCP对T24细胞增殖的抑制效应,显微镜下观察细胞的形态学改变;流式细胞仪(FCM)检测SCP对细胞周期百分率的影响;Hoechst33258荧光染色法检测SCP对T24细胞凋亡的影响;Western blot(WB)法检测SCP对T24细胞中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果 与对照组比较,SCP可显著抑制T24细胞增殖(P<0.05),促进T24细胞凋亡;FCM结果显示：与对照组比较,SCP能明显促进凋亡,增加凋亡率(P<0.05);SCP能明显降低T24细胞中Bcl-2蛋白表达,提高Bax蛋白表达,增加cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的蛋白表达,与对照组比较差异显著(P<0.05).结论 S...     

MG-132诱导宫颈癌细胞表达HPV病毒蛋白E6和E7

使用不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG-132处理官颈癌细胞系CaSki和HeLa S3细胞,WesternBlot检测发现2-5 mg/L MG-132 37℃处理3 h明显增强CaSki细胞中人类乳头瘤病毒HPV E6和E7蛋白的表达量,增加MG-132浓度或延长处理时间并未见E6和E7蛋白量的增加.用相同的方法处理HeLa s3细胞,也观察到HPV E7蛋白的增加.XTT活细胞分析和台盼蓝死细胞检测显示2 mg/L MG-132处理癌细胞3 h,其细胞死亡率10%.这一发现将有可能协助提高以E6、E7蛋白作靶位点的生物导弹疗法的效果.     

艾氏卡试剂消化硫酸钡比浊法测定膨胀石墨中的硫含量

为了简便、准确、快速地测定膨胀石墨中的硫含量,建立了用艾氏卡试剂消化样品、硫酸钡比浊法测定硫含量的方法.实验确定艾氏卡试剂与膨胀石墨最佳物质的量比为1:15,焙烧温度为850℃;比浊法中测试液的pH=1.0,质量分数为5%的聚乙烯醇分散剂和无水乙醇助稳定荆的用量分别为2.0 mL和3.0 mL;稳定10 min后,在460 nm下和0.1～5.0 mg内,硫酸钡的吸光度符合朗伯-比尔定律;方法平均回收率分别为101.2%(ZnS)和99.5%(Na2SO4),相对标准偏差均不超过3.0%.方法操作简便、准确,能快速测定膨胀石墨中的硫含量.