甘蓝型油菜异胡豆苷合成酶（Strictosidine synthase）cDNA的克隆与分析

以无花瓣与正常甘蓝型油菜幼嫩花蕾(长度小于0.2 mm)建立的差异表达文库中发现的异胡豆苷合成酶基因(STR)的一个cDNA片段为基础,利用RACE方法获得了甘蓝型油菜的STR基因cDNA全序列BnSTR.序列分析表明BnSTR全长1408 bp,开放阅读框从第20个碱基到第1291个碱基,推导的蛋白序列与Arabidopsis thaliana, Lycopersicon esculentum, Oryza sativa, Rauvolfia manni, Catharanthus roseus和Ophiorrhiza pumila中STR的同源性分别是91, 41.8, 36.2, 31.2, 29.2和28.4%.表达结果显示,与野生型相比,油菜BnSTR在无花瓣突变型幼嫩花蕾中表达量明显下降, BnSTR可能与花瓣的发育有关.     

利用谷氨酸棒状杆菌高效表达枯草芽孢杆菌的谷氨酰胺合成酶发酵生产L-谷氨酰胺

谷氨酰胺合成酶(GS)是用于合成L-谷氨酰胺(L-Gln)过程中的关键酶,然而GS的酶活受到多种因素的影响,导致其酶活不强,产物L-Gln偏低.本研究以GS的基因为研究对象,构建谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)的高效表达系统.利用C.glutamicum中的两种强启动子:tac启动子(Ptac)和麦芽糖启动子(Pmal),比较不同启动子的作用下GS的酶活力;其次,为了避免腺苷酰化对C.glutamicum的GS的抑制作用,将GS的腺苷酰化位点突变成苯丙氨酸(Tyr405Phe);同时由于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的GS不受腺苷酰化作用的影响,故将Bacillus subtilis的GS基因导入到C.glutamicum的表达系统中,比较两种基因来源不同GS的酶活高低,以期达到高产L-Gln的目的.本研究第一次应用Bacillus subtilis来源的GS在C.glutamicum的系统中表达.最终的结果表明,在C.glutamicum的表达系统中,Ptac比Pmal的效果更好,来自Bacillus subtilis的GS比来自C.glutamicum的GS酶活力更高.重组菌BJ2有最高的酶活力和产量,L-Gln的最终产量达到32.5 g/L.     

注射酮色林对脊神经结扎大鼠脊髓背角和背根神经节nNOS表达的影响

通过结扎大鼠L5脊神经建立神经病理性痛模型.手术后第3日开始皮下注射酮色林(0.3 mg·kg-1)或其溶剂DMSO(体积分数为0.8%),每d1次,2周后灌流、取材,免疫组织化学实验显示神经结扎后L4背根神经节(DRG)和脊髓背角Ⅰ-Ⅱ层nNOS的表达均上调.然而皮下注射酮色林阻断5-HT2A受体,使L4 DRG和脊...     

固氮鱼腥藻HB686固氮_放氢与谷氨酰胺合成酶的关系

固氮鱼腥藻HB686(Anabaena azotica HB686)的固氮和放氢被氨抑制与蛋氨酸砜亚胺(MSX)解除氨抑制的作用呈平行关系.谷氨酰胺能抑制固氮和放氢,而对谷氨酰胺合成酶(GS)和吸氢酶却有激活作用.固氮血腥藻在Mg~(2+)介质中的乙炔还原活性和放氢量皆比在Mn~(2+)介质中的高,而GS的活性则相反.不同波长的光照射对固氮、放氢和GS活性有不同的影响.     

色氨酸,丝氨酸的细菌内毒素检查法

通过对色氨酸、丝氨酸原料进行了干扰试验、对照试验，结果证明用细菌内毒素检查法代替热原检查法是可行的，而且具有灵敏、快速的优点。     

β—环糊精及其衍生物与色氨酸包结物形成常数的测定

在水溶液中，用荧光光谱法测定了β－环糊精及６，６＇－Ｏ，Ｏ、－（４，４、－二苯基杂氧二磺基）－β－ＣＤ与色氨酸形成包结物的形成常数，结果表明，后者的稳定性大于前者。     

产谷氨酰胺合成酶发酵条件的研究

谷氨酰胺合成酶是应用广泛的生物酶类,以LNU 0165，LNU 0066和LNU 0254为实验出发菌株，对不同pH、温度条件下产谷氨酰胺合成酶的最佳发酵条件进行了研究，通过测定谷氨酰胺合成酶，并进行比较选择高产菌株，LNU 0165产酶活最高，其GS酶的最适温度为60℃，最适pH为7．5左右。     

一条新的人类组织氨酰tRNA合成酶类似物全长cDNA的克隆及表达谱分析

从人胎脑文库中克隆到一条长为1219bp的cDNA，它编码23．4ku的肽链，该肽链与葡萄球菌组氨酰tRNA合成酶N端同源58％，利用human genomic blast可将其定位于20p11.Northern杂交显示胎脑中有一约1．5kb的单一条带，基因芯片杂交分析表明，其在肺癌和前列腺癌组织中表达较高，绿荧光蛋白亚细胞定位技术显示该蛋白存在于COS7细胞的细胞质中。     

水稻淀粉合成酶基因来源与稻米蒸煮和食味品质的相关性分析

为研究水稻淀粉合成酶基因对稻米蒸煮和食味品质性状的影响,利用根据籼粳基因组序列差异设计的Wx、SssⅠ、SssⅡa基因的分子标记检测来自“南京11”和“Balilla”的DH群体共130个株系,结果表明,Wx基因位点决定AAC的变异,并在控制GC变异时起主要作用;SssⅡa基因位点是决定GT变异的主要因素。3个基因位点的分子标记可为稻米蒸煮和食味品质的筛选和改良提供便捷的工具。     

荧光法测定蒜头果蛋白中Trp的含量

蒜头果蛋白(malanin)是从蒜头果种仁中分离、纯化出的一种新的植物蛋白质.以Na OH为水解液水解malanin,在激发波长225 nm,发射波长350 nm处测定色氨酸(Trp)的相对荧光强度.结果表明,malanin中Trp的含量为5.116 mg·g-1,即每分子malanin中含Trp约为4个.此结果将为酸水解测定malanin氨基酸的组成作为补充,同时也为malanin全序列的测定提供较好的参考数据.