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11.
为了研究原核生物和真核生物(细胞质)色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)对线粒体tRNA^Trp识别的种属特异性,构建了7个水稻线粒体tRNA^Trp三位点(G73,U72,A68)的单点或多点突变的突变体.这些突变基因,经体外转录后分别用枯草杆菌(B.subtilis)和人色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)进行氨酰化反应,并测定它们的动力学常数.结果表明,与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比,7个突变体的转录产物被B.subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53.33%-99.79%,被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4~330倍,其中以MPH7(水稻线粒体tRNA^Trp的三碱基(G73,U72和C68)全部突变为人tRNA^Trp的三碱基序列)的氨酰化活力改变最大.实验结果证明,与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似,水稻线粒体tRNA^Trp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对,亦即识别位碱基G73,氨基酸接受茎上的两个碱基对G1/U72和U5/A68.本研究为线粒体tRNA^Trp起源于真细菌的推论提供了实验依据. 相似文献
12.
13.
应用高效液相色谱(HPLC)--荧光检测,在一根带有预柱的LKB Superpac ODSC_(18)钢柱上,使用离子对系统做为洗脱液,对一组正常活动规律的树鼩脑组织液中的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及色氨酸(TRP)进行测定。荧光检测的波长为激发波长280nm,发射波长360nm得到各物质最小检测限量为:40ng NE和80ngDA(信噪比3:1)以及10ng5-HT和15ng TRP(信噪比4:1)。此方法具有实验操作简单、方便、快速、灵敏度较高、样品易于处理等特点。 相似文献
14.
竹红菌乙素对肌质网Ca~(2+)-ATP酶蛋白色氨酸荧光猝灭研究 总被引:1,自引:0,他引:1
肌质网Ca~(2+)-ATP酶是一种重要的膜蛋白酶,它在肌细胞的收缩舒张功能中起重要作用,因而其动力学行为被广泛地研究,但是有关结构与功能之间关系的直接实验数据仍然不足.为了从分子水平上阐明Ca~(2+)-ATP酶催化原理,1993年Ferrira用荧光猝灭方法首先观察了肌质网Ca~(2+)-ATP酶在加入Ca~(2+)前后分子构象的变化.由于作者使用的猝灭剂是分子氧,除了在测定工作中使用不方便之外,灵敏度也不够高.为此本文用竹红菌乙素作为肌质网Ca~(2+)-ATP酶荧光猝灭剂,分别测定了该酶在有钙或无钙的条件下荧光猝灭的情况,结果证明竹红菌乙素可以在稳态和瞬态的条件下观察到体系中有钙或无钙时的荧光猝灭常数变化的情况(即不同的K_q值);进而说明了竹红菌乙素作为肌质网蛋白荧光猝灭剂可以得到比氧更多的信息和许多其他优点. 相似文献
15.
16.
补充谷氨酰胺对运动小鼠谷氨酰胺代谢的观察 总被引:1,自引:0,他引:1
文章研究大强度长时间运动情况下,补充谷氨酰胺(Glutamine ,Gln)对血浆Gln、骨骼肌Gln合成酶和谷氨酰胺酶活性变化的影响,证明大强度运动时,经补充Gln能有效地提高血浆、骨骼肌Gln浓度,维持小鼠在运动中的Gln正常水平。 相似文献
17.
18.
19.
系统考察了pET可溶性表达系统对酵母来源的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的表达情况,结果显示:采用含Nus·Tag融合标签的pET-44a为载体,trx B和gor双突变的Origami为宿主最适合目的蛋白的可溶性表达。进一步考察不同来源的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌的可溶性时,也得到了相似的结论,比较发现酵母来源的SAM合成酶可溶性表达的比活力最高达60.9 U/mg。 相似文献
20.
锌铜色氨酸配合物的伏安特性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
作为一切生命活动的基础———蛋白质,其基本组成单位是氨基酸,因此,氨基酸对人体起着不可估量的作用.人体内微量元素如铜、铅、锌、钴、镍、钼、镁等为亲生物元素,主要通过与氨基酸的配合反应发挥其生物必需营养元素的作用.因此,建立快速、简便、灵敏的分析方法,对氨基酸与微量元素生成的配合物进行研究,对生命科学有十分重要的意义.伏安分析法是一种简便而又灵敏的分析方法[1],利用伏安分析法对氨基酸及其金属配合物的研究不断被报道.Josino[2]研究了组氨酸和铜生成的配合物的伏安行为,认为是溶液中先进行氨基酸… 相似文献