尘螨肠道微生物蛋白核苷二磷酸激酶的克隆、表达及纯化

根据 GenBank 中 NDP kinase 的基因序列,采用生物信息学方法将其中稀有密码子改造为大肠埃希菌常用密码子并进行二级结构优化,合成 NDP kinase 基因,构建原核表达载体 pET28a-NDP kinase 并酶切鉴定其序列,在大肠埃希菌 BL21（DE3）中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,重组产物采用镍离子金属螯合亲和层析柱纯化.经密码子改造和二级结构优化后 NDP kinase 基因长度为490 bp,其编码蛋白理论分子量为21.5 kDa,重组表达载体经酶切鉴定与理论推测结果相符,在大肠埃希菌 BL21（DE3）中该基因经 IPTG 诱导可高效表达,纯化后的重组蛋白分子量约为21.5 kDa,其单一蛋白纯度达95;以上.本研究成功构建了尘螨肠道微生物蛋白核苷二磷酸酶（NDP kinase）基因的 pET28a 原核重组质粒,为进一步研究 NDP kinase 在尘螨疫苗免疫治疗中的作用机理提供了基础.     

线粒体和溶酶体内源性NO的同时荧光传感

一氧化氮(NO)是一个重要的生物气体信使分子,主要产生于线粒体,参与了线粒体呼吸作用的调节并与溶酶体许多功能密切相关,其不正常的表达将导致线粒体和溶酶体功能丧失,从而引发系列疾病.文章设计合成了一个邻苯二胺功能化的罗丹明脱氧酰胺型NO荧光探针Mito-NO,该探针能特异性靶向线粒体并能高选择性、快速地荧光影像线粒体内源...     

大肠杆菌核苷磷酸化酶的重组表达和活性

将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21（DE3）宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产核苷磷酸化酶的野生菌比较,酶的活性也有显著提高。在特异反应条件下,构建的工程菌可以用来高效催化核苷的转糖基反应。     

5-取代嘧啶核苷及其抗疱疹病毒活性

介绍了一些具有显著抗疱疹病毒活性的5-取代嘧啶类核苷衍生物以及它们的作用机理,指出了不同取代基对相应化合物生物活性的影响,并对部分化合物进行了构效关系总结.     

真空熔炼、氩气保护连续定向凝固技术

阐述了真空熔炼、氩气保护下引法连续定向凝固工艺.该工艺将真空感应熔炼和连续定向凝固技术结合在一起,集熔化、提纯、凝固于一体,控制方便,搅拌、脱氧能力强,生产效率高,能生产纯净度高、性能好的定向凝固材料.对该工艺生产的纯铜棒材的质量进行了分析.     

微镁脱氧时间对钛脱氧钢夹杂物特征的影响

先将C-Mn钢在1600℃下钛脱氧15min,然后再加入MgSi合金脱氧不同时间,最后对脱氧后试样进行淬火冷却.采用ASPEX Explorer夹杂物电镜/能谱自动分析仪研究了微镁脱氧时间对钛脱氧钢夹杂物尺寸分布、成分及形貌的影响.随着微镁脱氧时间的增加,夹杂物粒子数量逐渐减少,尺寸有所增加,夹杂物粒子尺寸分布符合正态分布;富MgAl2O4及TiOx复合夹杂物聚合上浮,夹杂物类型由富MgAl2O4、MgO和TiOx转变为富MgAl2O4和MgO复合夹杂物.另外,减少镁脱氧时间有益于提高单位体积夹杂物粒子数量以及获得细小的富MgAl2O4、MgO及TiOx夹杂物粒子铸态试样.     

虫草中两种核苷类活性成分的毛细管电泳研究

虫草素和腺苷是虫草属药用真菌的主要核苷类活性成分，以往多用薄层扫描和高压液相法进行分离。本文建立了毛细管区带电泳分离测定虫草素和腺苷的分析方法，并测定了四种不同的虫草中虫草素和腺苷的含量及不同提取时间对虫草素和腺苷含量的影响。首次报道了九州虫草中虫草素的存在。采用0.025mol/L的硼砂（pH9.4）作为缓冲液，在电压为20kV和检测波长为258nm的条件下，4种虫草水提液是的虫草素和腺苷获得了基线分离，并具有良好的精密度和重现性。同时发现蒙山九州虫草中虫草素的含量甚高，具有良好的药用前景。     

L-鼠李糖氮杂核苷衍生物的设计、合成及抗癌活性研究

L-鼠李糖及L-鼠李糖结构的化合物具有较好的抗肿瘤活性及选择性,为了降低DNA甲基转移酶抑制剂氮杂胞苷的毒副作用,以氮杂胞苷为先导化合物设计、合成了7个L-鼠李糖氮杂核苷衍生物,其结构经核磁和元素分析确证.对目标化合物对两种细胞系进行了体外增值活性研究,4-氨基-1,3,5-三嗪-1-硫代-α-L-鼠李糖核苷(5D)对MKN-45细胞具有中等强度的抗癌活性,可作为先导化合物进一步研究.     

钢液铝脱氧早期形成的Al2O3夹杂

钢液铝脱氧过程产生的高熔点非金属夹杂物Al_2O_3对钢材性能危害较大,因此对其数量和尺寸控制变得十分重要。本文通过设计高温激光共聚焦显微镜实验对早期形成的Al_2O_3夹杂物进行研究,通过场发射扫描电镜FESEM和能谱EDS对高温激光共聚焦显微镜制备的试样中的夹杂物进行观察与分析,发现大量纳米尺寸Al_2O_3夹杂物,尺寸在100 nm以下。同时,研究了冷却速率对早期形成Al_2O_3夹杂物的影响,结果表明:冷却速率越大,夹杂物的数量越少,尺寸越细小。     

用熔盐萃取法制备低氧稀土金属(Dy、Y)的研究

在氩气保护下,以ReR(Re=Dy、Y)为萃取剂采用熔盐萃取法制备低氧稀土金属的新工艺,可使金属中氧含量大幅度降低,分别制得含氧量为0.034％、0.11％的金属镝和钇。为工业规模化生产低氧高纯稀土金属提供了新的途径。