克隆绵羊遇到的问题及其分析

本研究以体外成熟不同时间的绵羊卵母细胞为胞质受体,对去核、融合、不同激活方法、卵裂率、桑/囊胚率和克隆胚受胎率等作了研究与分析.观察妊娠受体母羊的状态、胎儿体内发育情况,分析影响胎儿发育的原因.结果显示,成熟培养18h、22h、24h卵母细胞的盲吸去核率无显著性差异(84.9%,86.6%,84.3%,p>0.05),但显著高于26h组的去核率(71.7%).离子酶素联合cycloheximide(CHX)对重构胚进行激活,卵裂率显著高于A23187联合6-DMAP的激活方法(84.6%vs 63.2%,p<0.05),但二者处理对桑/囊胚率发育无显著差异(25.5%vs18.7%,p>0.05).作为胞质受体,成熟20h的卵母细胞与成熟24h和26h的卵母细胞相比,不利于重构胚的体外发育,桑/囊胚率差异显著(12.3%vs 25.3%,23.4%,p<0.05).分别以美丽奴、杜泊肉羊的体细胞为供体细胞进行克隆生产,90天以后的妊娠率为10%-17%,发育到期率为10%以上.出生羔羊的体重普遍较大.     

Effect of leptin on oocyte maturation and subsequent pregnancy rate of cloned embryos reconstructed by somatic cell nuclear transfer in pigs

Cloning pigs by somatic cell nuclear transfer （SCNT） has wide applications in basic research, human medicine and agricultural production. To improve cloning efficiency, the effect of two basic maturation media, NCSU-23 and TCM199, was compared, and TCM199 was selected for the following experiments with leptin. We systematically studied the effects of leptin supplementation on oocytes in vitro maturation （IVM）, in vitro development of parthenogenetically activated （PA） and SCNT embryos and in vivo development of SCNT embryos after embryo transfer （ET）. The results showed that supplementation of 100 or 200 ng/ml leptin into the maturation medium did not greatly affect nuclear maturation of oocytes, or cleavage rates of PA and SCNT （P 〉 0.05）. Blastocyst rates of PA and SCNT embryos were significantly improved when 100 or 200 ng/ml leptin was added to maturation medium, and the number of cells in PA blastocysts was also improved （P 〈 0.05）. The number of cells in blastocyst of SCNT was improved, when 100 ng/ml leptin was added （P 〈 0.05）. Furthermore, supplementation of 100 or 200 ng/ml leptin to the IVM medium may improve pregnancy rate and the delivery rate inpig cloning.     

超声心动图对胎儿心脏横纹肌瘤的诊断及评价

目的探讨胎儿横纹肌瘤的超声诊断方法、技巧及病理特征.方法回顾性分析52例胎儿横纹肌瘤的病例资料,分析总结各诊断切面的肿物数目、位置、形态、大小、毗邻、界限、活动度以及形变等特征,分析肿物的病理特征,并总结该病的鉴别诊断.结果 52例病例资料均引产经病理证实为胎儿横纹肌瘤,该病多发常见,可位于各房、室腔,可附着于乳头肌、腱索、室间隔等结构.单发者常位于右心室,部分肿物可对心室及心房的流入道及流出道造成梗阻.肿物大多边界清楚,有包膜,部分边界模糊,与心肌界限不清.肿物大部分无活动度及形变,病理切片中均出现典型的＂蜘蛛＂细胞改变.结论胎儿超声心动图是诊断胎儿心脏横纹肌瘤的重要手段,是敏感发现、准确定位胎儿心脏横纹肌瘤的可靠方法,在诊断胎儿心脏横纹肌瘤中具有重要意义.     

一种用于检测胎儿心率的改进自相关算法

在分析传统自相关算法的基础上，提出了一种改进的自相关算法，该算法通过自适应控制，实时调整控制因子，使自相关函数随时延的衰减程度在不同的胎心率值下不同，始终保证自相关函数最大周期峰值在第一周期处，有效地克服了传统算法在超声多普勒胎儿心率检测时易造成心率加倍或减半的误判现象，对该算法进行了优化，使得计算量减少为原来的18％，速度提高了近6倍，同时由于除去了大量不与心率值对应的点，降低了干扰信号对心率值的影响。     

脐血干/祖细胞分离、冷冻和复苏技术

胎儿脐血作为富含ＣＤ３４＋细胞等造血干／祖细胞一个新来源,具有细胞增殖速度快,来源充足,收集安全等特点;脐血移植同样具有安全性好,效率高,费用低等优点。随着脐血干细胞移植临床应用的成功,欧美许多发达国家已经着手建立大规模脐血库以满足临床需求。建立脐血库技术上要求改善细胞冷冻保护剂组成,控制降温速率和细胞复苏方法,以获得理想的脐血干／祖细胞收率。同时由于脐血库液氮保存设备费用昂贵,需要预先分离脐血单个核细胞以减少样本冻存体积,以满足建库实际需求。