hIL-10在大肠杆菌中的表达及其生物学活性鉴定

构建了含有人白细胞介素-hIL-10（Human Interleukin10,hIL-10）基因的重组质粒,在大肠杆菌中的高效表达,并对其生物学活性进行了鉴定．用RT-PCR扩增hIL-10 cDNA,并插入原核表达载体PET-32b．将重组质粒转入BL21（DE3）感受态细胞,在37℃用IPTG诱导hIL-10表达．表达的重组蛋白经复性纯化后,用夹心ELISA法检测其对外周血单核细胞（PBMC）合成IFN-γ的抑制作用．重组质粒PET-32b／hIL-10的DNA序列分析显示,克隆的DNA序列和文献报道的hIL-10 cDNA序列一致．SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为18000．活性测定结果显示,重组蛋白能显著抑制PBMC合成IFN-γ．这表明构建的PET-32b／hIL-10可以在大肠杆菌中高效表达,经复性和纯化后,获得了具有高纯度和活性的hIL-10     

餐厨垃圾酸碱度对黑水虻灭活致病菌效率影响

黑水虻处理是近年发展起来的一种有机垃圾资源化方法，然而不同底物和处理方式下，致病菌的灭活规律存在较大差异，亟待研究和阐释.以沙门氏菌和大肠杆菌O157为模式致病菌，以不同初始pH条件下餐厨垃圾中致病菌的灭活规律为研究对象，分析致病菌灭活的主要因素和强化方法.结果发现，沙门氏菌在1～4 d被灭活，大肠杆菌O157在2～6 d被灭活，环境微生物以及物料酸性条件是致病菌灭活的主要因素.黑水虻是垃圾减量化的主要动力，但并不是致病菌灭活的主要因素.pH 6.0、8.0的条件比pH 5.3、10.0、12.0更具有优势，表现为较快的致病菌灭活速度、较高的黑水虻抗菌肽抑菌活性以及较快的幼虫生长速率.综上，黑水虻能够在减量化餐厨垃圾的同时灭活致病菌，初始pH 6.0～8.0的条件值得应用和推广.     

连续静置培养促进大肠杆菌生长和运动

大肠杆菌繁殖速度快、基因结构简单，已构建出黏性鞭毛的突变体，是一种研究鞭毛运动的模式生物。大肠杆菌能对外界环境的变化做出响应，是其赖以生存的基础，其中很重要的就是其生长和运动行为的变化。为了研究连续营养作用下的大肠杆菌生长和运动的情况，文章采用连续5 d静置液体培养大肠杆菌，通过定期检测菌液OD值的方法获得大肠杆菌的生长曲线，发现大肠杆菌生长到达稳定期的时间随培养天数增加而缩短；观察连续5 d静置液体培养的大肠杆菌在稳定期的形态变化，发现大肠杆菌的形态并不受生长和运动的影响。利用倒置显微镜结合乳胶小球标记鞭毛技术观察大肠杆菌在稳定期的鞭毛马达的转动过程，发现随着培养天数的增加，大肠杆菌鞭毛马达的转速加快，说明连续营养培养会促进大肠杆菌鞭毛马达的运动性；后续的群体运动实验进一步验证了该结论。在该基础上，研究发现大肠杆菌运动能力的实现需要相关的基因，包括motB和fliC。该文为发现营养在大肠杆菌生长运动中的作用提供了相关的科学依据，为深入研究大肠杆菌的鞭毛运动与肠道营养之间的关系提供了潜在的途径。     

二甲双胍抑制大肠杆菌生长和鞭毛马达转速

文章运用光学显微成像技术和生物学统计模型等多种生物物理手段研究二甲双胍对大肠杆菌的生长、运动和趋化行为改变过程的影响。研究表明：二甲双胍能够抑制大肠杆菌的生长，并且大肠杆菌的形态受到生长的影响；利用倒置显微镜结合乳胶小球标记鞭毛法和微流控技术探究二甲双胍对大肠杆菌鞭毛马达转速的影响，结果发现，二甲双胍对鞭毛马达的转速具有抑制效果，且不同浓度的二甲双胍影响大肠杆菌对天冬氨酸趋化反应的恢复时间。