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31.
研究了添加不同含量Ag@SiO2 纳米材料的环氧树脂涂层在大肠杆菌溶液中浸泡前和浸泡110h后的电化学阻抗谱特征,分别提出了其等效电路模型,并比较了浸泡前和浸泡850h后的涂层形貌变化。结果表明,浸泡后未添加Ag@SiO2 的涂层的阻抗降低了96%,添加0.3%的Ag@SiO2 涂层的阻抗也下降了73%,且两者都出现了明显的锈斑;而添加0.1%的Ag@SiO2 涂层的阻抗和形貌在浸泡前后基本保持不变。可见,添加适量的Ag@SiO2 可以显著提高涂层的耐微生物腐蚀性能。 相似文献
32.
IMPACTTM—CN蛋白质纯化系统的pTYB11载体的应用,有利于快速分离靶蛋白。因靶蛋白位于胞内,需采取有效破碎手段获取。采用超声波破碎,试验找出重组大肠杆菌的最佳破碎条件为:超声时间占空比为3:7,输出功率40W,破碎0.5h。western-blotting检验可以得到抗原性正常的靶蛋白。 相似文献
33.
34.
已被公认的两条补体激活途径,即经典途径和替代途径外,还存在着一条不依赖抗有--抗体复合物而激活补体的经典途径。用E.coliB,E.coliK12gat^+的细胞壁加入到补体参与的溶血实验中有明显的溶血抑制作用,从而说明大肠菌的细胞壁对不依赖抗全而激活补体经典途径有密切关系。 相似文献
35.
丝状蓝藻与大肠肝菌之间杂合质粒的构建与克隆 总被引:1,自引:3,他引:1
丝状蓝藻Plectonema boryanum的pPb1经HpaⅡ酶酶切与AccI酶酶切的pUC13构成杂合质粒,杂合质粒克隆到E.coliJM109,频率为3.4%.转化进E.ColiJM109的杂合粒,用EcoRI和HpaI酶切后得到证实。杂合质粒转化到新制备的P。boryanum原生质球或丝状体后,再生的藻体表现高于原来两倍以上的AP抗性。利用AP每感的E.coli平板培养,证实了转化入藻体 相似文献
36.
OPG成熟肽N端D1~D4结构域仅由2个外显子编码.以人基因组DNA作为模板,PCR分别扩增骨保护素基因外显子2和外显子3,再以2种PCR产物的混合物作为模板,采用重组PCR法得到N端D1~D4域编码序列,使该序列与载体pET42a部分序列相连,然后克隆人载体pET42a进行表达,SDS-PAGE表明产物主要以包涵体形式存在,可被抗OPG多克隆抗体识别.Glutathione Sepharose4B亲和层析纯化融合蛋白GST-hOPG(D1-4),Xa切割祛除担体蛋白及进一步分离纯化.采用破骨细胞样细胞诱导分化实验来检测重组蛋白的生物活性,证实该重组蛋白可以抑制OLC的生成. 相似文献
37.
采用膜亚蛋白质组学方法研究小鼠腹水瘤巨噬细胞Raw 264.7对致病性大肠杆菌O157的免疫应答反应,筛选并鉴定到24个差异表达的膜蛋白质.这些膜蛋白质与细胞免疫、细胞周期、细胞发育、细胞骨架、细胞生长等有关.在蛋白质水平上对巨噬细胞与大肠杆菌间的相互作用关系进行了一些探索性研究,为进一步揭示机体对病原反应的作用机制提供理论基础. 相似文献
38.
目的利用基因重组技术在大肠杆菌中获得高效表达人过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从人cDNA文库中获得CAT编码基因,并利用pMAL-c2x构建了融合表达载体并进行了表达。结果融合表达可获得可溶性蛋白,此项研究为后续重组酶性质的研究和开发利用奠定了基础。 相似文献
39.
40.
酵母转录因子GCN4是通过亮氨酸拉链(bZIP)结构结合DNA的蛋白质之一,当GCN4二聚体与DNA结合时,亮氨酸拉链区的2个单体结合为平行的卷曲螺旋结构,而其基区由无规线团结构变为α螺旋.为探讨亮氨酸拉链蛋白与DNA的结合机理,设计了含有GCN4亮氨酸拉链蛋白基区结合DNA的必需氨基酸的折叠片段,并将其克隆到Escherichia coli BL21,讨论了此亮氨酸拉链蛋白的表达条件.在蛋白质的小量表达试验中,重组子Escherichia coli BL21于5mL含有50μg/mL氨节青霉素和34μg/mL氯霉素的LB液体培养基中培养至对数期,加入不同浓度的IPTG,继续培养以诱导蛋白质的表达,在不同的时间(如:诱导前,诱导2,4,6,8h)取样100μL到1.5mL离心管中、离心收集沉淀,将沉淀悬浮于样品缓冲液中,用10%SDS-PAGE检测;在10L含氨苄青霉素和氯霉素的LB液体培养基中进行了大量表达,根据小量表达的试验结果确定了IPTG的浓度和诱导时间.结果表明:含有这种拉链蛋白质的重组子Escherichia coli BL21在37℃下小量培养时,0.1-0.8mmol的IPTG均可在2-10h内诱导该蛋白质表达;而大量培养时,0.2mmol和0.4mmol的IPTG在37℃均不可能诱导表达,只在28℃时才表达;小量培养和大量培养的最佳诱导时间为4-6h,诱导剂IPTG的浓度为0.2mmol,大量表达的温度为28℃而不是37℃. 相似文献