仔猪下痢的病因及综合防治措施

仔猪下痢是由致病性大肠杆菌引起的急性传染病,在仔猪生产中广泛存在,它不仅给养猪业带来直接经济损失,还间接地影响到病愈猪的生长发育,成为影响养猪业经济效益的重要制约因素。虽然有多种防治仔猪下痢的生物菌苗,如母猪产前接种的k88、k99、987p、混合菌苗,以及仔猪服用的NYIO菌苗等,但由于病因的多样性,加上各养殖户、猪场的防治体系不完善,该病经常发生。现结合临床诊疗经验,就该病的发病原因与综合防治总结如下。     

产丁醇大肠杆菌工程菌的构建

【目的】为了在大肠杆菌(Escherichia coli)中导入改良的丁醇合成途径,使非生产菌株大肠杆菌具备产丁醇的能力。【方法】克隆大肠杆菌乙酰转移酶基因atoB和丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)丁醇合成途径关键酶基因(crt、hbd、adhE),构建多顺反子表达质粒pSE380-atoB-adhE-crt-hbd;克隆齿垢密螺旋体(Treponema denticola)反式烯酰辅酶A还原酶基因ter,构建表达质粒pSTV29-ter,并将双质粒导入到大肠杆菌。【结果】构建的工程菌能半厌氧发酵产微量丁醇,产量为0.08g/L。【结论】大肠杆菌中的丁醇合成途径导入成功,构建了产丁醇的大肠杆菌工程菌。     

大蒜汁抑菌作用的研究

采用平板菌落计数法,比较不同浓度的生蒜汁、熟蒜汁、醋酸汁、糖蒜汁对常见的3种菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)的抑菌作用.结果表明:生蒜、醋蒜汁对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌均具有一定的抑制作用,且生蒜汁和醋蒜汁的抑菌作用显著高于熟蒜和糖蒜,且随大蒜汁浓度的增加,抑菌作用逐渐增强.     

BCR/ABL和SEA双基因重组载体的构建和表达

目的:构建和表达含BCR/ABL融合基因和葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核双表达质粒.方法:利用RT-PCR技术从K562细胞中扩增出含BCR/ABL融合位点基因片段,提取金黄色葡萄球菌基因组DNA扩增出SEA基因,分别将两基因片段连在pIRES载体的多克隆位点A和B上,构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA- pIRES-BCR/ABL重组质粒.将重组质粒转染K293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒在真核细胞的转录情况, SDS-PAGE电泳鉴定目的蛋白在真核细胞的表达.结果:成功扩增出BCR/ABL和 SEA基因片段;双酶切鉴定BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL重组质粒中含有BCR/ABL和SEA基因,测序证实完全正确;将重组质粒转染K293细胞后,经 RT-PCR扩增鉴定,插入到重组质粒的BCR/ABL和SEA基因能在真核细胞正常转录,经SDS-PAGE电泳鉴定重组质粒能够在真核细胞中表达BCR/ABL和SEA蛋白.结论:成功构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL真核双表达质粒,可在真核细胞中正常转录并表达BCR/ABL和SEA蛋白.     

不同病因引起的精囊炎的治疗

精囊炎是男性常见的感染性疾病之一,不同的患者表现也各不相同。是由大肠杆菌、克雷白氏产气杆菌、变形杆菌及假单胞菌等引起。发病者多为20～40岁的壮年男子,以血精为主要临床表现,但有急性和慢性之分。当精囊邻近器官,如前列腺、后尿道、结肠等有感染或任何情况下导致前列腺、精囊充血时。为非作歹的细菌就会乘机捣乱,侵及精囊,诱发精囊炎。     

病原体逃避宿主免疫反应的新机制

[本刊讯]上海交通大学医学院健康科学研究所与同济大学医学院的科研人员发现．肠致病性大肠杆菌EPEC通过其分泌蛋白Tir的免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）来抑制宿主的免疫反应,从而达到免疫逃避的目的。2012年9月23日．NatureImmunology在线发表了这项研究成果。     

塑化剂之毒猛于虎——中国食品安全问题任重道远

近日,有两件涉及食品安全的重大事件在全世界闹得沸沸扬扬。一件是在德国汉堡发现变异的大肠杆菌病毒,导致近20人死亡,至今找不到病毒来源;另一件是台湾数百家食品饮料生产厂家在添加剂中违规使用塑化剂,以此替代棕榈油,致使多不胜数的消费者在浑然不觉中蒙受伤害。因多家涉案企业在大陆或设厂或有密切贸易关系,所以,大陆卫生、防疫、质检等部门迅即在全国开展了塑化剂与食品安全的专项大检查,避免台湾企业的劣迹在大陆重演,扭转中国食品安全长久以来的被动局面。     

冻融循环下大肠杆菌O157:H7在长春市南湖岸边水中的存活行为研究

北方地区的初春、晚秋,水体表层的夜冻昼融过程是典型特征。冻融循环过程影响水体自身理化性质,理化性质的变化对水中微生物,尤其是潜在的致病微生物的存活也会产生一定的影响。实验在室内模拟了大肠杆菌O157:H7在冻融循环条件下,在长春南湖水中的动态存活特征;并通过线性模型和Weibull模型,计算大肠杆菌O157:H7在污染水体后衰减达到最低检测限的时间(ttd);并运用多元线性回归进行相关性分析,找出影响实验菌种存活的关键因素。研究表明,南湖水的p H和氨氮与大肠杆菌O157:H7的存活相关。研究结果可为调查大肠杆菌O157:H7在湖水中的存活趋势,评估其可能带来的环境健康风险,为制定相应的环境管控措施提供科学依据。     

远程氧等离子体对大肠杆菌的灭菌效果与机理研究

采用Langmuir双电子探针和电子自旋共振诊断技术分别定量测定了远程氧等离子体场中各活性物种的分布.考察了远程氧等离子体对医用聚四氟乙烯表面大肠杆菌的灭活作用,并通过对灭菌后菌悬液蛋白质泄漏量、脂质过氧化物生成量及细菌DNA电泳图的测定分析了其灭菌机理.结果表明:远程氧等离子体中的电子、离子浓度随远程距离的增大迅速降低,30 cm后接近于0,而自由基浓度则相对降低缓慢,40 cm处仍为初始浓度的70%;远程氧等离子体60 s内的灭菌效果值在放电区可高达3.42,在远程距离40 cm以内也均在3.32以上,符合消毒灭菌的要求;电子、离子对细菌细胞膜的快速刻蚀及自由基对胞膜中多价不饱和脂肪酸的攻击分别是放电区及远程30cm后灭菌的主要原因.氧等离子体中紫外光的灭菌效果微弱.     

Sensing Escherichia coli O157：H7 via frequency shift through a self-assembled monolayer based QCM immunosensor

By means of the specific immuno-recognition and ultra-sensitive mass detection, a quartz crystal microbalance （QCM） biosensor for Escherichia coli O157：H7 detection was developed in this work. As a suitable surfactant, 16-mercaptohexadecanoic acid （MHDA） was introduced onto the Au surface of QCM, and then self-assembled with N-hydroxysuccinimide （NHS） raster as a reactive intermediate to provide an active interface for the specific antibody immobilization. The binding of target bacteria with the immobilized antibodies decreased the sensor＇s resonant frequency, and the frequency shift was correlated to the bacterial concentration. The stepwise assembly of the immunosensor was characterized by means of the electrochemical techniques. Using the immersion-dry-immersion procedure, this QCM biosensor could detect 2.0×10^2 colony forming units （CFU）/ml E. coli O157：H7. In order to reduce the fabrication time, a polyelectrolyte layer-by-layer self-assembly （LBL-SA） method was adopted for fast construction. Finally, the reproducibility of this biosensor was discussed.