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401.
402.
二甲亚砜在聚合酶链反应扩增载脂蛋白E基因中的作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨二甲亚砜(DMSO)在聚合酶链反应(PCR)中扩增人类载脂蛋白E基因中的作用。方法:在不同质量分数DMSO的存在下,以PCR技术增人类载脂蛋白E基因片段。限制性内切酶酶切检测扩增产物。结果:在质量在分数5%-10%的DMSO下,可以成功地扩增到人类载脂蛋白E基因的第4外显子片段。结论:在DMSO作用下,PCR扩增增强了特异性。扩增的人类载脂蛋白E基因片段可以进行基因限制性片段多态性的分析。 相似文献
403.
DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立. 相似文献
404.
人们在做原位杂交、southem blots或northem blots时,RNA探针比DNA探针稳定且特异性强,产生的讯号比DNA探针强约10倍,因此通常RNA探针成为实验者的首选.本人在用SP6 RNA聚合酶体外转录合成史氏鲟B-actin基因的RNA探针时,转录产物电泳后出现四条带,分别位于模板的上端和下端.为了探究其中的原因,本人选择了可能影响转录产物长度的几个因素(RNA聚合酶、模板具有3’-凸头以及模板的长度)分别设计实验进行分析,结果发现不同的RNA聚合酶以及模板过短可能形成自连等都有可能影响转录产物的结果. 相似文献
405.
406.
目的:了解白血病患者EB病毒感染情况。方法:收集21例急性淋巴细胞白血病、1例慢性淋巴细胞白血病、15例急性粒细胞白血病、8例慢性粒细胞白血病患者及32例正常对照组的外周血,分离单个核细胞,提取DNA,应用PCR方法检测EB病毒DNA。结果:在1例初诊慢性粒细胞白血病病人样本中发现EB病毒阳性,余均为阴性。结论:白血病患者存在EB病毒感染情况,但并不普遍。 相似文献
407.
应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒 总被引:6,自引:0,他引:6
将具有犬细小病毒病典型症状的病犬肠溶物经SDS-酚裂解法提取总DNA,并以此DNA为模板,通过人工合成的两条20mer引物进行PCR扩增,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白VP2基因中间1/3区段,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,试验结果表明:用PCR扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性,应用该方法检测的27份病犬肠溶物样品块获得了预计长度的DNA片段(531bp),而健康犬的肠溶物样品PCR结果为 相似文献
408.
DNA计算(DNA computing)是一种新的计算方法,其高度并行性和巨大的信息存储能力为NP-完全问题的解决提供了一种全新的方法。本文采用了该算法去解决二次分配问题,构造了该问题的表达方法,建立了算法模型,对于我们将DNA计算的方法应用于组合优化问题具有启发性,并为我们进一步深入研究奠定了基础。 相似文献
409.
运用实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)研究了正常以及患有糖尿病大鼠的肌肉组织中胰岛素信号转导通路中重要的信号传导分子基因表达,结果表明:四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠肌肉组织的胰岛素受体、胰岛素受体底物1和葡萄糖转运体4的mRNA表达下调,胰岛素磷脂酰肌醇3激酶的mRNA表达上调;糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4的mRNA含量下降可能会引起糖摄取能力的下降.从而导致四氧嘧啶诱导大鼠肌肉组织胰岛素抵抗. 相似文献
410.
经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-74,其酶活力是亲本重组酶的2.73倍.通过软件对突变体gldA-74酶基因和亲本重组酶基因进行分析对比,发现突变体gldA-74酶基因发生了一处点突变(A964T),该突变使一处氨基酸被取代.将亲本重组酶和进化酶的高效表达产物经Ni柱纯化后,酶学性质的测定结果表明,甘油的Km值由0.58 mmol.L-1升高至0.63 mmol.L-1,而NAD的Km值由0.74 mmol.L-1升高至0.77mmol.L-1,并且酶的最适pH值由原来的11.5升高至12.5,而最适温度由65℃降至55℃. 相似文献