非伤害性取样在无尾两栖类保护遗传学研究中的应用

为了改变传统的将两栖类动物处死后再从肌肉提取DNA的取样方法,采用非伤害性取样方法分别采集了虎纹蛙的血液和趾提取DNA,并与从其肌肉中提取的DNA进行了比较,结果显示:使用血液和趾提取的DNA产量与肌肉样本的DNA产量相当;随后,分别对3种方法取样的样本进行了线粒体16S rRNA和核DNA的微卫星PCR分析,结果表明:3种取样方法所获得的扩增效果相当,均能满足虎纹蛙的保护遗传学研究.因此认为,用非伤害性取样技术替代传统的肌肉取样的方法在无尾两栖类的保护遗传学研究中是切实可行的.     

DNA体外扩增技术——聚合酶链式反应(PCR)

PcR(PolymeraseChainReaction)译为聚合酶链式反应,是近年来发展起来的一种DNA体外扩增技术．具有快速,简便和特异性强的优点,在分子生物学研究方面的应用具有广阔的前景．本文简要介绍了PCR技术的原理,影响因素及其应用．     

海南汉族高血压人群血管紧张素转换酶基因多态性研究

采用聚合酶链反应(PCR)技术,对海南汉族106例高血压患者和97例汉族正常人的血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性检测,观察DD,DI,II基因型频率及等位基因频率,并对所有普通PCR定为DD型的样本进行插入特异性PCR检测,以减少误分型率.结果显示:高血压组DD,DI,II基因型频率分别为16.0%,28.3%,55.7%;D及I等位基因频率分别为30.2%,69.8%.正常对照组DD,DI,II基因型频率分别为15.5%,44.3%,40.2%;D及I等位基因频率分别为37.1%,62.8%.两组之间的DD,DI,II基因型频率及D,I等位基因频率均有显著性差异(P<0.05).高血压组与正常对照组比较,体重指数(BMI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均有显著性差异(P<0.05);高血压组收缩压、舒张压与正常对照组有显著性差异(P<0.05);高血压组和正常对照组的D等位基因频率都比I等位基因频率低;ACE基因I/D多态性与汉族高血压的发病有相关性,是汉族高血压的主要致病基因.     

基础知识与应用相结合的综合性实验教学实践

为培养医学院学生动手能力和创新能力,训练学生的科研思维以及严谨的科研素养,血管紧张素转化酶基因多态性分析综合性实验被引进课堂.学生通过提取自己口腔粘膜上皮细胞基因组核酸、 经多聚酶链式反应扩增血管紧张素转化酶基因中具有多态性的片段、 凝胶电泳检测分析这一系列实验,得到自己的基因诊断结果的同时,全面、 深入、 系统地学习...     

桑树植原体含量的周年变化及其对寄主激素水平的影响

采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）检测植原体在桑树体内的分布及其相对含量的周年变化．结果显示,茎部植原体含量在生长季节逐渐升高,７月达到最大,冬季检测不到;叶部与茎部相似但植原体含量在８月达到最大;根部全年均含有植原体,含量较低．此外,用酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）对桑树内源激素检测的结果显示,病株中生长素、细胞分裂素（Ｚ＋ＺＲ,ＤＨＺ＋ＤＨＺＲ）及赤霉素（ＧＡ３,ＧＡ４）的含量都明显高于健株．表明桑树体内激素水平的变化与植原体有关     

逆转录聚合酶链式反应快速检测水稻条叶枯病毒

逆转录聚合酶链式反应（Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴ－ＰＣＲ）具有灵敏度高,准确性好的特点,因而被广泛应用于植物病毒检测。在ＲＴ反应中,ＲＮＡ样品的快速制备尤为重要用异丙醇二步沉淀法获得ＲＮＡ,快速检测水地片中ＲＳｔＶ伯ＲＴ－ＰＣＲ方法,可使测定时间缩短至６ｈ,并可从０．０７８ｍｇ感病叶片中检测出ＲＳｔＶ。     

JD病毒基因组片段的克隆和序列分析

扩增并克隆了ＪＤ病毒的ｇａｇ 基因片段（位于３００ｎｔ～５６４ｎｔ,编码基质蛋白ＭＡ）和ｐｏｌ基因片段（位于３４６７ｎｔ～３６９１ｎｔ,编码反转录酶ＲＴ）,测定其序列并同ＢＩＶ、ＢＦＶ 和ＢＬＶ 的相应基因进行比较．所建立的方法能够特异性扩增ＪＤＶ序列,适用于ＪＤＶ的检测     

HCV非结构基因NS5分子生物学研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因5(NSS)区是RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)及一种磷蛋白的编码区,与HCV的复制、致病及抗药性关系密切。就HCV NS5区有关的分子生物学研究进展进行了综述。     

中国汉族群体DXS101、DXS6809基因座的遗传多态性研究

调查了DXS101、DXS6809基因座在中国四川地区汉族群体中的遗传多态性。采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术分析中国四川地区汉族群体中DXSl01、DXS6809基因座的遗传多态性,获得其群体遗传学数据。两个基因座在165名中国四川地区汉族无关个体中各发现10个等位基因,DXSl01观测到27种基因型,DXS6809观测到24种基因型。两个基因座在女性样本中的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。说明DXS101、DXS6809在中国四川地区汉族中具有较高的遗传多态性,在法医学个人识别和女性的父权鉴定应用中有较大价值。     

鼻咽癌细胞凋亡与抑癌基因关系研究

本研究为海南省重点科研课题,受海南省自然科学基金资助（编号：39810）。该研究应用免疫组织化学技术、原位杂交技术、实时荧光定量聚合酶链反应（RTQ-PCR）技术、不对称单链构象多态性聚合酶链反应（PCR—SSCP）技术、多重聚合酶链反应（MPCR）技术、全基因组扫描技术和原位末端标记技术（TUNEL）等多种分子生物学技术,