人类线粒体转录因子B1和B2与裂殖酵母线粒体转录聚合酶Rpo41相互作用的初步研究

由L02型人肝脏细胞cDNA通过PCR技术获取到线粒体转录因子B1和B2的ORF片段(NM_022366和NM_016020);构建表达质粒pGEX-4t-1/GST-mtTFB1及pMAL-c-2X/MBP-mtTFB2,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达,经亲和层析,分子筛和阳离子交换柱得到纯度较高的蛋白.利用体外pull-down实验证实TFB1和TFB2均与来源于裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的线粒体RNA聚合酶(Rpo41)存在分子间相互作用.在裂殖酵母中过表达h-TFB1和h-TFB2,利用实时荧光定量PCR检测,2个蛋白在酵母体内均对线粒体基因转录产生影响.     

濒危植物刺桫椤RAPD反应体系的优化

以高盐SDS法提取濒危植物刺桫椤(Alsophila spinulosa)嫩叶总DNA，进行RAPD分析，分别研究了模板DNA、引物、dNTP、Mg^2 和Taq DNA聚合酶用量以及反应体积对反应结果的影响．筛选并建立了适合于利桫椤RAPD扩增的反应体系：反应体积10μL，内含2ng/μL模板DNA，2．0mmo1/L MgCl2,0．3μmo1／L引物，300μmo1／L dNTP，0．5u Taq DNA聚合酶．     

正链RNA病毒复制蛋白的分子生物学研究进展

综述了复制蛋白的几个关键的结构域（解螺旋酶的功能区，依赖RNA的RNA聚合酶（RdRp)的核心区域，类似糜蛋白酶的蛋白酶区域，转甲基酶结构域）的结构特点、功能和基因表达方式，以及复制酶基因在抗病毒工程中的应用。     

基于BLOCK-iTTM的RNA干扰序列设计与PCR验证

RNA干扰(RNAi)是经典的基因表达下调工具,多数实验室将RNAi的序列设计工作委托公司完成。本研究以BAIAP2L1和DDIAS基因为例,选择ThermoFisher公司的BLOCK-iTTMRNAi Designer设计工具自行设计siRNA序列,并通过实时荧光定量PCR检测基因表达水平,验证干扰效果。结果显示基因表达水平下调能够达到70%以上,实现良好的RNAi效果,表明通过BLOCK-iTTMRNAi Designer自行设计获得的siRNA序列能够满足预期的基因表达下调。     

Balb／C小鼠金属硫蛋白—1cDNA的克隆及序列分析

以RNA一步提取法,采用RT－PCR技术成功地将Balb/C小鼠金属硫蛋白-1cDNA基因片段克隆于质粒pUC－19上,并对克隆片cDNA进行核苷酸序列测定。     

广州地区AIDS患者中人类疱疹病毒8感染的检测

目的:检测广州地区艾滋病AIDS患者中人类疱疹病毒8(HHV-8)的感染状况,探讨本地区AIDS患者发生HHV-8感染相关疾病的可能风险。方法:采用巢式聚合酶链反应(n-PCR)法检测患者唾液中的HHV-8 DNA。结果:在广州地区AIDS患者唾液中HHV-8 DNA阳性率为20.0%,而对照组的阳性率为0,两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:在广州地区的AIDS患者中存在较高的HHV-8感染。     

366例疑似乙型肝炎患者HBV-DNA检测与乙肝5项指标结果分析

目的:探讨HBV-DNA与乙肝5项指标检测之间的相关性.方法:采用荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)测定HBV DNA,并同时运用酶联免疫吸附(ELISA)法测定乙肝5项指标分析二者相关性.结果:小三阳组HBV-DNA阳性检出率及拷贝数均低于大三阳组,有显著性差异(P＜0.01),各组比较结果表明,大三阳组患者血清HBV-DNA检出率最高,达91.92%,平均拷贝数为6.83×106拷贝/ml.结论:乙肝5项指标全部阴性及仅HBsAb阳性者仍有HBV-DNA检出阳性病例,因此在检测中应联合应用两种方法进行检测,以提高检出率,避免漏诊,为临床HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗提供更为可靠的判定依据.     

QC-PCR测定HIV-Ⅰ型DNA含量

为人类免疫缺陷病毒（HIV）含量测定提供一种定量的方法。方法 以HIV－Ⅰ型感染小鼠，用竞争性定量多聚酶链式反应（Quantitative Competitive Polymerase Chain Reaction,QC-PCR)和增强化学发光法测定HIV含量。结果 用QC－PCR方法测定HIV含量简单、快速、准确而且无污染。结论 QC－PCR可作为HIV DNA测定的新方法，是AIDS早期诊断、疗效观察及愈后判断的监控手段。     

孕妇巨细胞病毒感染的检测方法学研究

人巨细胞病毒（HCMV）的感染在人群中存在较为普遍，尤其是孕妇感染后极易招致胎儿畸形甚至死亡。本文就近年来发展起来的对孕妇HOWV感染的检测方法作一简要综述。     

聚合酶链反应在动物系统进化研究中的应用

动物系统进化研究是生命科学中的基础理论研究。以前的研究都是以经典学科为基础而进行的。随着分子生物学技术的发展和完善,特别是聚合酶链反应技术的出现,使系统进化的研究深入到分子水平且结论更可靠,迄今已得到广泛应用,为动物系统进化研究开辟了一个新途径。