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241.
Chonghua He Shicheng Su Fei Chen Di Huang Fang Zheng Wei Huang Jianing Chen Xiuying Cui Qiang Liu Erwei Song Herui Yao Yujie Liu 《科学通报(英文版)》2014,59(12):1326-1333
A previous study indicated that C–C chemokine(C–C motif)ligand 18(CCL18)is capable of inducing tumor cell invasion and metastasis by interacting with receptor membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3(PITPNM3)in breast cancer cells.The present study aims to investigate the correlation between the PITPNM3 expression and metastasis in hepatocellular carcinoma(HCC).Real-time quantitative polymerase chain reaction and Western blot were performed to detect the expression pattern of PITPNM3 in patient samples and HCC cell lines.Wound-healing and transwell chamber assays were performed to assess the migration and invasiveness of HCC cells,and the activation of the signaling protein downstream of PITPNM3 was also detected by Western blot and immunofluorescence.The results revealed that PITPNM3 was upregulated in HCC tissue compared to matched normal liver tissue.Silencing the expression of PITPNM3 by specific siRNAs markedly attenuated the invasive and metastatic abilities of HCC cells,whereas the upregulation of PITPNM3 significantly increased HCC cell mobility.Furthermore,inhibiting the expression of PITPNM3 suppressed the activation of Pyk2,FAK,and Src,while overexpression of PITPNM3enhanced the phosphorylation of FAK and Src in HCC cells.Besides,suppression of Pyk2 can also impair the clustering of integrin.These results imply that PITPNM3 is a vital determinant of HCC migration and invasion. 相似文献
242.
用数学模型对甲型流感病毒聚合酶酸性蛋白家族的进化进行拟合:(1)用氨基酸对的可预测性量化1918年至2008年分离的2433个聚合酶酸性蛋白以表示其演变,(2)确定上升半寿期和下降半衰期是否相似作为拟合的前提条件,(3)用微分方程组的解析解拟合进化,(4)用所获得的拟合参数模拟2009年至2018年可能的进化过程。结果呈现了对聚合酶酸性蛋白家族及其不同亚型的良好拟合,这标志着蛋白质进化的研究已经从经验性的实验分析向动力学的数学建模迈进。 相似文献
243.
为深入探讨酵母的热响应机制,测定了热胁迫条件下耐热酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中海藻糖含量的变化,并通过实时定量聚合酶链式反应,分析了热胁迫下参与海藻糖代谢的相关基因的表达.结果表明:在42℃热胁迫下,酿酒酵母细胞内的海藻糖含量显著提高,在处理240min时达到0.20g/g(以细胞干重计),约为热胁迫前的4倍;随着胁迫时间的增加,胞内海藻糖的含量开始下降。参与海藻糖代谢的基因表达变化与海藻糖含量变化高度一致,说明海藻糖在酵母适应高温的过程中起重要作用. 相似文献
244.
探讨MSP58基因在人类肝癌肿瘤组织及肝癌细胞系中的表达情况,应用半定量RT-PCR和Western blot方法分别检测MSP58在肝癌细胞系及肝癌肿瘤组织中的mRNA水平及蛋白水平的表达.两种肝癌细胞系HHCC、HepG2,22例肝癌癌区组织,13例正常肝组织作为对照.结果在两种肝癌细胞系中MSP58 mRNA水平和蛋白水平都有明显表达;在22例肝癌肿瘤组织中,不同级别的人肝癌肿瘤标本中mRNA及蛋白均有MSP58表达,并且MSP58的表达量随着人肝癌肿瘤恶性病理级别的增高而增高;13例正常肝组织无表达.MSP58在肝癌肿瘤组织和肝癌细胞系中均有表达,说明其可能对肝癌肿瘤的发生或发展有重要作用. 相似文献
245.
通过载体表达siRNAs抑制禽流感病毒复制的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
禽流感病毒是养禽业危害最严重的病原微生物之一。为探讨小干涉RNA(siRNA)对A型禽流感病毒复制的干扰作用,以H5亚型AIV PB2基因为靶序列,设计合成了4对编码siRNAs的DNA序列,将其克隆到psiRNA-hH1neo载体中,构建siRNAs表达载体,鉴定正确后将重组质粒转染MDCK细胞,采用G418筛选建立抗性细胞系,用血凝(HA)试验和real time RT-PCR试验检测抑制效果, 在细胞水平筛选出具有高效抑制AIV复制的2个靶位点PB2-1154、PB2-342、为AIV的基因功能研究,抗病毒药物的开发和转基因动物的研究奠定了基础。 相似文献
246.
美国斯坦福大学医学院教授RogerD.Kornberg被授予2006年度诺贝尔化学奖,以表彰他在“真核转录的分子基础”研究领域所作出的杰出贡献。Kornberg的贡献在于,其花费10年时间构建了体外酵母细胞转录体系,并将结晶学与生化知识相结合,描述了RNA聚合酶II及包括通用转录因子、调节器、DNA和RNA在内的复合物结构图。此外,他还首先在分子水平上阐明了真核细胞中转录机制的全过程。现有的证据表明转录分子机制的研究对于各种疾病的治疗以及干细胞的分化调节均具有重大的实际意义。 相似文献
247.
通过免疫荧光共定位实验,研究了RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1,Rpb6,Rpb8与BAF复合物和转录因子NF1/CTF在基因转录活动中的联系.实验证实,RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1与BAF复合物有联系,Rpb6与BAF复合物联系不紧密,Rpb6与NF1/CTF联系密切,Rpb8与BAF复合物和NF1/CTF有部分联系.免疫沉淀实验也证实RNA聚合酶Ⅱ与BAF复合物和NF1/CTF一同参加了转录起始复合物的形成. 相似文献
248.
高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)给我国养猪业带来了巨大的损失.为快速、便捷诊断该病,建立重组酶聚合酶扩增结合侧流层析技术(RPA-LFD)的HP-PRRS诊断方法.针对HP-PRRSV Nsp2基因特异序列,设计生物素(Biotin)标记的特异性引物和FAM荧光素标记的探针,对RPA-LFD的反应体系和条件进行优化,结果显示,HP-PRRSV RPA-LFD最佳反应体系为:上下游引物(0.42 pmol/μL)各2.1μL,探针(0.3 pmol/μL)0.6μL,Rehydration buffer 29.5μL,cDNA模板1μL,ddH2O 12.2μL,MgOAc 2.5μL,共50μL;最佳反应条件为:37℃,20 min.该方法同时检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒VR2332株(PRRSV VR2332)和NADC30-like株等10种常见感染猪的病原,结果显示,该方法除对HP-PRRSV检测呈阳性外,对PRRSV VR2332株、NADC30-like和其它9种感染猪的病原检测均为阴性,特异... 相似文献
249.
杨晓宽 《河北科技师范学院学报》2009,23(4):45-49
应用RT-PCR技术,从黄孢原毛平革菌5.766(Phanerochaete chrysosporium)总RNA中成功扩增出预期大小约为1.3 kb的特异性条带,将扩增产物提纯后克隆入PUC19载体,经转化、筛选及酶切鉴定后,获得锰过氧化物酶(MnP2)基因的克隆。序列分析表明,扩增的MnP2基因片段其cDNA长度为1 149 bp,编码358个氨基酸,与其它已发表文献报道的MnP2序列一致,与其同工酶MnP1和MnP3的核苷酸同一性分别为81%和66%。 相似文献
250.
抑癌基因ING1在鼻咽癌中的表达及突变分析 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究运用免疫组化技术、逆转录 - PCR( RT- PCR) ,PCR- SS-CP技术对鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中 ING1的表达和突变进行检测 .结果发现 3 0例鼻咽癌标本中 ING1蛋白表达下调率为 70 % ( 2 1/ 3 0 ) ;ING1m RNA表达明显下调率为 4 6% ( 12 / 2 6) ,6例鼻咽癌细胞系中有 2例鼻咽癌细胞系表达明显下调 ,而 11例 ( 4 2 .5 % ) NPC组织及其它 4例细胞系表达与正常水平相当 ,另有 3例 ( 11.5 % )鼻咽癌组织过表达 ;单链构像多态性分析 ( SSCP)在鼻咽癌及鼻咽癌细胞系中均未发现突变 .结果表明ING1基因的转录及翻译表达水平与鼻咽癌的发生 /发展呈负相关 ,该基因的异常表达是鼻咽癌发生中的频发事件而与基因突变无关 相似文献