揭开真核细胞转录的奥秘

2006年度诺贝尔化学奖授予美国科学家罗杰·科恩伯格（Roger D．Kornberg）教授，以表彰他在研究真核细胞转录分子机制中做出的卓越贡献。存储在基因中的遗传信息如何被“阅读”转录，又如何被“翻译”生产为蛋白质，是研究生命活动的中心问题。科恩伯格在分子水平向人们展示了真核细胞从DNA（脱氧核糖核酸）到RNA（核糖核酸）转录过程的详实图片。     

PARP1调节肝癌细胞的生长和迁移

为了探究聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP1)在肝细胞癌发生发展中的功能,通过免疫组化检测PARP1在肝癌组织中的表达水平;通过CRISPR/CAS9技术构建PARP1缺陷的肝癌细胞株,并采用CCK8实验、克隆形成法和细胞迁移实验来探究PARP1缺陷对肝癌细胞的影响.免疫组化结果显示PARP1在肝癌细胞中高表达,PARP1缺陷抑制肝癌细胞生长和迁移.     

低成本PCR微反应器阵列的温度测量与控制技术

设计了一种用于聚合酶链式反应的低成本微反应器,其内部无微加热器、微传感器。针对这种低成本的微反应器,提出了一种温度测量与控制方案,其特点是将各反应器温度的集中控制与分散控制有机结合,能够同时完成上百只微反应器快速、准确的温度循环。重点阐述了温度传感器负荷效应的提取与补偿、动态误差补偿、微反应器温度间接测量误差评定、微反应器温度串级控制策略。     

基于Smith预估器的PCR仪时滞温控系统

为了解决聚合酶链式反应(PCR)仪温度控制中的纯滞后问题,在试验数据的基础上,基于Matlab搭建仿真模型.仿真结果表明,加入Smith预估补偿环节可以较好地解决纯滞后效应带来的积分累积问题.将仿真得到的方法移植到实际的控制中,可获得良好的控制效果.最后提出添加一个比例-积分-微分(PID)控制器的改进算法,用以解决Smith预估控制算法中鲁棒性不强的问题.     

Overexpression of PITPNM3 promotes hepatocellular carcinoma cell metastasis

A previous study indicated that C–C chemokine(C–C motif)ligand 18(CCL18)is capable of inducing tumor cell invasion and metastasis by interacting with receptor membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3(PITPNM3)in breast cancer cells.The present study aims to investigate the correlation between the PITPNM3 expression and metastasis in hepatocellular carcinoma(HCC).Real-time quantitative polymerase chain reaction and Western blot were performed to detect the expression pattern of PITPNM3 in patient samples and HCC cell lines.Wound-healing and transwell chamber assays were performed to assess the migration and invasiveness of HCC cells,and the activation of the signaling protein downstream of PITPNM3 was also detected by Western blot and immunofluorescence.The results revealed that PITPNM3 was upregulated in HCC tissue compared to matched normal liver tissue.Silencing the expression of PITPNM3 by specific siRNAs markedly attenuated the invasive and metastatic abilities of HCC cells,whereas the upregulation of PITPNM3 significantly increased HCC cell mobility.Furthermore,inhibiting the expression of PITPNM3 suppressed the activation of Pyk2,FAK,and Src,while overexpression of PITPNM3enhanced the phosphorylation of FAK and Src in HCC cells.Besides,suppression of Pyk2 can also impair the clustering of integrin.These results imply that PITPNM3 is a vital determinant of HCC migration and invasion.     

人胰岛素原类似物（B-Arg-Arg-A）基因的构建和表达

用聚合酶链反应（PCR）法将C肽为6个氨基酸残基的胰岛素原类似物基因删除突变成C肽仅为2个精氨酸残基的胰岛素原类似物（BArg-Arg-A）基因,即把pUC18BC'A改建为pUC18BR₂A。再将pUC18BR₂A与pJG105重组为表达质粒pJG107,使B-Arg-Arg-A与pJG105编码的一种多肽构成融合蛋白在大肠杆菌体系中表达。融合蛋白占细菌蛋白总量的58%。表达产物具有人胰岛素放射免疫活性。     

T7 DNA 聚合酶基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

用聚合酶链式反应技术,从Ｔ７噬菌体中选择扩增编码Ｔ７ＤＮＡ滞酶５’→３’聚合酶的基因序列,扩增片段利用引入的酶切位点克隆至载体ＰＳＫ上,从而得到了不含有３’→５’外切酶基因的Ｔ７ＤＮＡ聚合酶基因,并将该重组基因克隆至原核表达质粒ｐＥＴ２８ａ上,在大肠杆菌中进行了表达。     

荧光引物扩增AMG基因鉴定古代人骨遗骸的性别

建立一种用荧光标记引物扩增AMG基因的性染色体同源片段方法, 对古代人骨遗骸进行性别鉴定. 用其测定5个古代遗骸的性别, 其结果与形态学结果一致.     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA的质量控制

根据结核杆菌（ＴＢ）ＤＮＡ的提取,耐热性多聚酶（Ｔａｑ）活性、结核Ｌ－型细菌的形成、变异、污染等,阐述了ＴＢ－ＤＮＡ多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃ－ｔｉｏｎ,ＰＣＲ）检测中假阴性、假阳性出现的原因及内在规律,并提出了相应的改进措施。     

MSP58基因在肝癌中的表达分析

探讨MSP58基因在人类肝癌肿瘤组织及肝癌细胞系中的表达情况,应用半定量RT-PCR和Western blot方法分别检测MSP58在肝癌细胞系及肝癌肿瘤组织中的mRNA水平及蛋白水平的表达.两种肝癌细胞系HHCC、HepG2,22例肝癌癌区组织,13例正常肝组织作为对照.结果在两种肝癌细胞系中MSP58 mRNA水平和蛋白水平都有明显表达;在22例肝癌肿瘤组织中,不同级别的人肝癌肿瘤标本中mRNA及蛋白均有MSP58表达,并且MSP58的表达量随着人肝癌肿瘤恶性病理级别的增高而增高;13例正常肝组织无表达.MSP58在肝癌肿瘤组织和肝癌细胞系中均有表达,说明其可能对肝癌肿瘤的发生或发展有重要作用.