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11.
FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
殷长传!遗传工程国家重点实验室 颜学恒!遗传工程国家重点实验室 郑佐华!遗传工程国家重点实验室 黄啸宇!遗传工程国家重点实验室 毛裕民!遗传工程国家重点实验室 《复旦学报(自然科学版)》1998,37(2):225-228
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了FD-TRT的最适反应条件: 25mmol/L Tris-HCl(pH 8.5,25℃),25 mmol/L(NH4)2SO4,2 mmol/L MnCl2,100 μg/ml明胶.5 unit RNasin,250 mmol/L 4种 dNTP, 1μCi3 H-dCTP, 12ug RNA,25 pmol引物,并在此条件下测得 FD-TRT和 Taq DNA 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为0.056,0.0045. 相似文献
12.
耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据耐热碱磷酸酯酶基因的酶切图谱和DNA序列,分别在基因的起始密友子和终止密码子设计2个突变引物。引物的5‘端分别带有NdeⅠ和BamHⅠ酶切全点。通过PCR从质粒pTAP118B中扩增获得了FD-TAP基因的全序列。经过酶切将基因亚克隆于高达载体pJLA503。 相似文献
13.
芽胞杆菌EV23基本为组成性地合成碱性纤维素酶,以不同碳源生长时酶合成水平差别不显著。葡萄糖(Glu)、果糖等易代谢碳源在ρ=10g·L-1时,不但不抑制酶的合成,还相对地促进酶的合成。以Glu为碳源培养,ρ=40g·L-1时酶合成水平最高,ρ≥50g·L-1时酶合成才有部分被阻遏。ATP、三羧酸循环中间物对酶合成有一定的阻遏作用,表明EV23碱性纤维素酶的抗阻遏合成是有一定限度的。 相似文献
14.
钼(Ⅴ)-硫氰酸盐-碱性三苯甲烷染料体系的二级散射光谱及其分析应用 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了钼(Ⅴ)硫氰酸盐配阴离子与结晶紫、乙基紫、孔雀石绿、亮绿及碘绿等碱性三苯甲烷染料的离子缔合配合物的二级散射和反二级散射光谱.考察了影响因素、适宜条件和分析化学特征.提出了用二级散射光谱法测定钼的新的高灵敏分析方法,可用于钢铁中痕量钼的测定. 相似文献
15.
16.
A primitive orthorhombic crystal form of acylamino acid releasing enzyme‘lipase(APE1547)from hyperthermophilic archaeon Aeropyrum pernix strain K1 has been obtained at 291K.The diffraction pattern of the crystal extends to 0.27nm resolution at 100K using Cu Kαradiation.The crystal belongs to the space group P212121 with unit cell dimensions of b=6.399,b=10.439and c=16.953nm.The presence of two molecules per asymmetric unit gives a crystal volume per protein mass(Vm)of 0.0022nm^3 Da^-1 and a solvent content of 43% by volume.A full set of X-ray diffraction data were collected to 0.3nm from the native crystal. 相似文献
17.
用SNIFTIRS和循环伏安法研究0.1mol/L Na0H溶液中次亚磷酸根离子在铂和镍两种电极上的电氧化行为.结果表明次亚磷酸根离子在两种金属上的氧化明显不同,在Ni上氧化产物是HP03^-,在Pt上电位较负时氧化产物是P03^2-,而电位较正时产物是P04^3-.讨论了在两种金属上次亚磷酸根离子氧化反应的差别和相应的可能机理。 相似文献
18.
双液相反应体系中脂肪酶催化拆分缩水甘油酯 总被引:3,自引:2,他引:3
利用脂肪酶作为催化剂在双液相反应体系中对外消旋缩水甘油酯进行立体选择性的酯水解反应. 考察了影响该拆分反应的因素, 确定了最适酶源为猪胰脂肪酶; 最适底物为缩水甘油丁酯; 其它最适反应条件: pH为7.6; 温度为27 ℃; 反应时间为4 h. 在最适 条件下, 当酶促拆分反应的转化率为60.6%时, 缩水甘油丁酯的光学纯度可以达到93.3%以 上. 相似文献
19.
聚乙烯甲酰胺碱性水解反应动力学研究 总被引:3,自引:0,他引:3
研究了聚乙烯甲酰胺 ( PNVF)碱性水解反应动力学 ,碱的消耗量与氨基生成量的关系 .实验结果表明 :氨基生成量与 Na OH消耗量物质量的比是 2∶ 1 .聚乙烯甲酰胺碱性水解反应速率与聚乙烯甲酰胺、氢氧化钠浓度分别呈一级关系 ,该反应的表观活化能是 65 .1 6k J· mol- 1 . 相似文献
20.
Na2SiO3对碱性硫脲溶液选择性溶金的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
采用电化学方法研究Na2SiO3浓度对碱性硫脲浸金的影响和金及其常见伴生元素银、铜、镍、铁在含有Na2SiO3的碱性硫脲溶液中的电化学行为.研究结果表明:加入Na2SiO3在很大程度上提高了金的溶解电流,Na2SiO3的最佳浓度为0.15mol/L.分析不同电势时lgJ与lgc(Na2SiO3)之间的关系可得:在电势为0.42V时,Na2SiO3对碱性硫脲溶液电化学溶金的促进作用最显著,含Na2SiO3的碱性硫脲溶液对金的溶解具有一定的选择性;在电势为0.58V时溶金效果最佳,金、银、镍和铁的阳极电流密度分别为2.49,1.22,1.03和0.09mA/cm2;而同时加入Na2SiO3和Na2SO3时碱性硫脲溶液选择性溶金的最佳电势负移至0.42V,对金的选择性溶解更为明显,金、银、铜、镍和铁的溶解电流密度依次为3.83,1.13,0.73,0.14和0.09mA/cm2,金的溶解电流密度分别是银、铜、镍和铁的3.4,5.2,27.3和42.6倍. 相似文献