脑心肌炎病毒pCMV-HA-VP2表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的:构建脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2,并在HEK293细胞中表达.方法:提取EMCV的总RNA,RT-PCR扩增VP2基因,酶切后构建带HA标签的真核表达质粒pCMV-HA-VP2,运用脂质体介导法将其转染至HEK293细胞中,分别进行过表达检测、Westernblotting分析及IFA检测来验证VP2基因的转录及表达情况.结果:重组表达载体pCMV-HA-VP2构建成功,转染至HEK293细胞中,VP2蛋白和HA标签融合表达成功.结论:EMCV衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2在HEK293细胞中的成功表达,为EMCV衣壳蛋白的功能研究提供理想的实验材料,同时也为EMCV感染机制及其受体研究奠定基础.     

类风湿性关节炎患者血清Th17/Treg细胞变化特征

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清中Th17/Treg细胞变化特征,并对其与DAS28评分的相关性进行研究,为RA的靶向治疗提供新的科学依据.方法选取RA患者40例作为观察组,30例健康者作为对照组.应用流式细胞术检测两组血清中Th17/Treg细胞水平,两组间比较采用t检验;采用DAS28评分评估患者的病情,各变量间的相关性采用Pearson相关性分析.结果观察组血清中的Th17水平明显高于对照组,Treg水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.01);观察组Th17水平与DAS28评分呈明显正相关,Treg水平与DAS28评分呈明显负相关.结论 Th17在RA的发病过程中起着重要作用,Th17水平与疾病的严重性密切相关,临床上可指导疾病的预测和靶向治疗.     

医用可降解Mg-3Zn-0.5Sr合金耐蚀性及细胞毒性

采用仿生法在Mg-3Zn-0.5Sr合金表面制备涂层,通过SEM,EDS和XRD分析表征涂层形貌和结构;采用电化学实验和浸泡腐蚀实验来研究涂层对合金降解速率的影响;采用生物毒性实验验证有无涂层Mg-3Zn-0.5Sr合金的毒性等级.实验结果表明:在Mg-3Zn-0.5Sr合金表面可以沉积致密的羟基磷灰石(HA)涂层,厚度约为30~40μm,HA涂层可以有效地降低Mg合金的降解速率;在体积分数为25%的有无涂层合金浸提液中培养细胞4d,细胞相对增值率均超过100%,有无涂层合金的细胞毒性均为0级.     

细胞色素P450酶生物转化及新催化反应的最新进展

细胞色素P450酶(P450s或CYPs)是一类广泛存在于生命体中,依赖于亚铁血红素催化多种底物的单加氧酶。一方面,它涉及许多高活性天然产物生物合成的关键步骤,对其生物转化研究有助于提高活性分子的产率和活性;另一方面,其催化涉及金属元素以及辅助因子,其蛋白质改造和新催化反应的研发也不断取得新突破。本文就细胞色素P450酶这两方面的最近研究进展进行了总结与论述。     

LC3真核表达载体构建及其在293T细胞中自噬诱导研究

【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle's盐平衡液(Balanced salt solution,EBSS)饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因,并将其插入pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒。将重组质粒转染至人胚肾细胞293T,显微镜观察、Western blot检测GFP-LC3融合蛋白表达情况。对转染细胞进行Earle's盐平衡液饥饿诱导,通过Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成。【结果】成功构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并在293T细胞中成功表达目的蛋白,在进行Earle's盐平衡液饥饿诱导后观察到自噬泡的形成,Western blot检测到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化。【结论】本实验为研究自噬在癌细胞病理进程中的机制提供了实验素材。     

肺癌小鼠肿瘤组织IL-10的来源及其功能验证

为了解肺癌肿瘤组织白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的表达和来源，并探究IL-10对肿瘤的作用，采用MSD超敏电化学发光技术检测Lewis肺癌小鼠模型血清中IL-10的水平，使用流式细胞术分析肿瘤组织IL-10的主要来源，再通过CCK-8实验、膜联蛋白V-碘化丙啶(annexin V-PI)凋亡实验、划痕实验，检测IL-10重组蛋白对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响。结果表明：Lewis肺癌小鼠血清中IL-10水平较正常小鼠显著升高，肿瘤组织中的IL-10主要由免疫细胞产生。其中，B细胞和髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)是IL-10的主要来源，IL-10重组蛋白可以显著抑制LLC(小鼠Lewis肺癌细胞：Lewis lung carcinoma line)的增殖和迁移并促进其凋亡。综上可见，IL-10水平与肺癌密切相关，B细胞和MDSCs是产生IL-10的主要来源，IL-10可能通过激活CD8 T细胞或者直接作用于肿瘤细胞而发挥抗肿瘤作用。     

为什么有些绿叶树新长的叶子是红色的?

<正>A:在植物的叶片细胞中含有叶绿体,叶绿体中的色素能够吸收光能。绿叶中的色素主要有叶绿素、类胡萝卜素等,其中叶绿素主要吸收蓝紫光和红光,类胡萝卜索主要吸收蓝紫光。因为叶绿素对绿光吸收量最少,绿光被反射出来,所以叶片一般呈现绿色。在植物的液泡中,还含有多种色索(常见的如花青素)会影     

葆婴盛典 保罗发表未来财富说

正"接下来的十年内,中国经济势必会在保健产业和个人创业这两方面有极速发展。"——保罗·皮尔泽11月14日,期待已久的"绽放"2014葆婴年会盛典在南京奥体中心完美落幕,近万名葆婴葆芯康经销商相聚在一起,庆祝市场业绩再创历史新高。葆婴创始人伊荣基、美国前总统经济顾问保罗·皮尔泽、世界级细胞免疫学家华斯博士、奥运冠军吊环王陈一冰等作为重量级嘉宾出席本次年会。保罗·皮尔泽在会上以"未来十年葆婴和中国的     

不确定细胞神经网络鲁棒稳定新的时滞划分法

研究了一类具有时变时滞和参数不确定项的细胞神经网络的鲁棒稳定性。引用凸组合方法,实现了对时滞区间的不均等划分,且参数的引入降低了对时滞导数小于1的限制;新变量的引入实现了对不确定项的处理,并将Jensen不等式与凸组合方法相结合,得到了积分区间新的处理方法;最后数值举例验证了结论的有效性。     

医用细菌纤维素的制备及其细胞相容性

以椰汁作为基本的碳源和生长因子来源,通过添加成分明确的乙醇及酵母膏作为补充碳源和氮源,并补加相应的微量元素,获得了成分简单、明确的医用细菌纤维素培养基;该培养基各成分含量相对稳定,提高了细菌纤维素的发酵速率和产量,所获得的产物厚度可满足不同的医用需求.将碱液分别与十二烷基硫酸钠(SDS)、超声波及乙醇联用对发酵产物进行纯化处理.结果表明:碱液与SDS联用时纯化效果最好;纯化所得样品的杂质N含量低于检测限,透光率高,在可见光范围内与活体角膜透光率相近,L929细胞相容性良好.