高粱胞质雄性不育及保持系的RAPD技术优化

以高梁细胞质雄性不育系和保持系A1T623A/B,A2V2A/B为材料，考察了Mg^2 ，Taq酶，dNTP，引物，模板等的用量、循环参数及不同的PCR仪对随机扩增多态性DNA（RAPD）反应的影响。结果发现：在25μL体系中，MgCl22．0mmol/L，Taq酶0．75U（1U＝1μmol/min），dNTP0．15mmol／L，引物16．5ng，模板30ng，明0．001％，KCl50mmol。L，Tris10mmol/L（pH8．3）为最佳反应混合物组合。对PeltierThermalCycler200而言，94℃预变性5min，94℃预变性5in，94℃变性1min，35℃退火1min，72℃延伸2min，最后72℃保温5min，共计40个循环为最佳扩增条件；对PerkinElmerCetusDNAtThermalCycler-480而言,采用94℃预变性3min后，前3个循环，94℃变性1min，35℃退火1min，72℃延伸2min，后37个循环，94℃变性30s，36℃退火45s，72℃延伸45s，72℃延伸1min，最后72℃保温5min的循环程序可获得理想扩增。并阐述了优化RAPD实验体系的设计原则。     

棉花杂交种制种问题研究的进展

本文系作者结合自己的研究工作,搜集和阅读了国内、外有关文献,经过研究、归纳而成。文中扼要的论述了目前世界上对这一问题研究的现状及其发展.1、论述了杂种棉对大幅度提高产量和改进品质蕴藏着巨大的潜力。2、论述了当前在细胞质雄性不育系的研究和选育上,特别是对恢复系的研究中所取得的重大进展。3、作者结合自己的体会,绘制了不育系和恢复的转育图;并从棉花遗传的原理出发,提出了在转育过程中,应该考虑的事项。可以认为是作者今后的研究计划。同时就正于棉花遗传育种同行们。     

高粱细胞质雄性不育与HSC70mRNA的关系

使用注射方法把ＨＳＰ７０反义ｃＤＮＡ导入到高粱不育系（３Ａ）和可育系（３Ｂ）幼穗中,并分别进行热激或常温处理,发现常温时３Ａ花药细胞中最缺乏ＨＳＣ７０ｍＤＮＡ的。此时３Ａ为不育;当热激处理时,３Ａ中出现ＨＳＣ７０ｍＤＮＡ,此时３Ａ由不育变为可育。在３Ｂ花药细胞中,不论是常温不是热激条件下都出现ＨＳＣ７０ｍＤＮＡ。对花药细胞线粒体总蛋白量测定表明,３Ａ幼穗经热激处理后,它的线粒体总蛋白量是热激前的２     

苜蓿雄性不育系花柱与柱头形态结构观察研究

对草原1号杂花苜蓿雄性不育系与可育系的花柱与柱头形态结构进行了对比观察研究，结果表明。苜蓿雄性不育系的花柱与柱头的形态结构与可育系有很大差别，不育系花柱细，柱头小且下陷，柱头的毛状体细胞相对少并紧包乳突状细胞，分泌物少．这些形态特征影响着苜蓿雄性不育系受粉和受精，是导致杂交制种结实率低的原因之一。     

K型和冈型水稻线粒体DNA的AFLP分析

用264个随机引物(E11,M24)对K型和冈型水稻(Oryza sativa L.)的不育系、保持系和F1代线粒体DNA进行AFLP分析,共筛选到了37对扩增效果较好的引物,显示出9条可能与K型水稻雄性不育相关的差异带,3条可能与冈型水稻雄性不育相关的差异带.其中引物组合E10M8(EcoR Ⅰ-ATA×Mse Ⅰ-AGC)扩增后,K型和冈型水稻不育系、F1代几乎在750 bp左右的位置都同时表现出了差异条带而在保持系相应位置表现为缺失,它与"缺陷型不育"假设一致.由此证明了K型和冈型水稻不育系线粒体DNA的特异性及其与雄性不育的相关性,为回收克隆等后续工作奠定了基础.     

抗菌肽抑菌机制的质膜相关研究方法

天然抗菌肽主要由无脊椎动物、脊椎动物和植物的组织或者细胞表达分泌而来,其种类繁多,结构复杂.各类抗菌肽由于其结构和组成的不同导致其作用机制也各不相同.但由于抗菌肽主要作用于靶细胞的质膜,因此关于抗菌肽作用机制的研究也主要集中在对靶细胞质膜结构影响的研究.文中综述了近年来抗菌肽抑菌机制研究中质膜相关研究方法,旨在为开展新型抗菌肽作用机制研究提供参考.     

转录因子TDF1对拟南芥雄性不育突变体atms1的温敏调控机制研究

TDF1作为MYB家族的转录因子,参与了胼胝质的降解过程,并控制绒毡层的分化从而影响着花粉粒的正常发育.以一株通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变Col-0野生型拟南芥获得的温敏雄性不育突变体atms1(ambient temperature-sensory male sterility1)对温度敏感机制进行了研究.通过构建TDF1反义RNA表达载体,在atms1突变体背景下抑制TDF1的表达来观察突变体花粉育性的变化,发现在27℃时的atms1突变体花粉的育性得以恢复.这一结果表明在花粉发育的过程中TDF1对ATMS1m具有一定的调控作用.     

白菜hau CMS不育系特异分子标记的开发与应用

以不同胞质的白菜和芥菜为材料,将hau CMS胞质的线粒体基因组与芸薹属植物中其他的细胞质雄性不育系的线粒体基因组进行比较,再经生物信息学分析,筛选得到hau CMS线粒体基因组上特异的序列,并根据该序列信息开发出用于鉴定白菜hau CMS类型的分子标记hau CMS-Specific.同时,通过序列对比分析发现hau CMS线粒体基因组缺失但其他胞质共有的线粒体基因组序列.根据该序列信息,开发了互补检测的分子标记hau CMS-Deletion.最后利用hau CMS、ogu CMS、pol CMS、oxa CMS、orf220CMS等不同胞质类型材料的DNA成功验证了这两对标记.     

NADPH氧化酶NtrbohD参与烟草悬浮细胞ABA诱导的H2O2快速产生过程

研究了烟草BY-2悬浮细胞在脱落酸（ABA）诱导下产生过氧化氢（H2O2）的机制,发现ABA能够显著诱导H2O2快速产生,且H2O2主要是由超氧化物歧化酶催化超氧阴离子产生的．ABA处理可导致烟草悬浮细胞质膜NADPH氧化酶活性以时间依赖的方式快速增加,其增加的幅度和时间与ABA诱导H2O2积累一致,而且,这些增加的效应能够被NADPH氧化酶抑制剂碘二苯和咪唑显著抑制,说明质膜NADPH氧化酶参与烟草悬浮细胞H2O2快速积累过程．另外,用RT-PCR和蛋白印迹技术分析了烟草质膜NADPH氧化酶基因NtrbohD的表达水平,发现该基因在mRNA和蛋白水平的表达受ABA上调,表明NtrbohD参与烟草悬浮细胞ABA诱导H2O2快速产生过程．结果说明,ABA能够诱导悬浮细胞通过NADPH氧化酶快速产生活性氧,提示NAD-PH氧化酶和H2O2可能是植物细胞中ABA信号转导途径的重要成分。     

植物细胞细胞质运动实验材料的改进及其操作方法

通过总结观察植物细胞质运动的原有材料的局限性和对洋葱、葱、小葱等实验材料进行的实验,提出了观察植物细胞质运动的几种新的实验材料及实验操作方法。