Fluorescence detection and imaging of cytosolic calcium oscillations: A comparison of four equipment setups

The increase in cytosolic calcium concentration has been shown to play an important role in vital cellular functions such as muscle contraction, cell secretion, oocyte fertilization, nerve conduction, embryo development and apoptosis in animals, plants and microbes, and in the invasion of mammalian cells by parasites, bacteria, and viruses. Therefore, live cell imaging of increases in cytosolic calcium concentration in cellular compartments has been investigated intensively. Multiple calcium imaging systems are now available commercially, but when it comes to deciding which model to purchase, it is often hard to obtain enough information for an optimal setup. In this paper, a comparison was made among four fluorescent detection/imaging devices for the detection of cytosolic calcium oscillations induced in rat pancreatic acinar cells by cholecystokinin and in hepatocytes by phenylephrine. Detailed equipment setup, differences in data acquisition and analysis, and side effects of the excitation light on live cells were analyzed. A list of important factors that should be considered in choosing the optimal equipment are recommended, which will be useful for users of such devices in the future.     

神经细胞树突中mRNA的运输

将mRNA靶定到神经细胞树突中, 对区域化蛋白质合成和神经功能的发挥起重要作用。神经细胞mRNA存在于包含不同种类调控mRNA 定位、稳定和翻译组分的颗粒中。该颗粒由驱动蛋白1(kinesin 1) 沿微管运输。定向运输产生的mRNA不对称分布是突触可塑性、学习和记忆所必需的。     

大黄酸对IL-2诱发T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的作用

研究大黄酸对IL-2引起大鼠T淋巴细胞增殖和细胞内[Ca2+]i变化的影响.采用MTT法检测细胞增殖,用单细胞钙成像系统记录胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i).结果表明,大黄酸对IL-2引起的细胞增殖有显著抑制作用,且抑制效果与剂量有关;IL-2引起[Ca2+]i升高,并持续维持高[Ca2+]i水平,[Ca2+]i升高的机制包括胞内Ca2+释放和胞外Ca2+内流;大黄酸显著抑制IL-2引起的[Ca2+]i升高.结果提示大黄酸可抑制T淋巴细胞增殖,作用机制可能与抑制细胞内[Ca2+]i升高相关.     

衰老标记蛋白-30及其研究进展

衰老标记蛋白-30(SMP30)也称为regucalcin是1992年发现的一种新型钙结合蛋白质,在细胞内信号转导途径中起调节作用,其含量随年龄增加而减少。就其蛋白质生物学特性及其功能进行了综述。     

皮层体感I区躯体伤害感受神经元与非伤害感受神经元的形态学特征

应用细胞内记录及标记技术,从神经元水平探讨大脑皮层在伤害感受及其调制中的作用．强电脉冲刺激隐神经模拟躯体痛,观察了猫皮层体感Ｉ区 ６５４个伤害感受神经元对刺激隐神经的诱发反应后,对３０个（伤害及非伤害）神经元电泳Ｎｅｕｒｏｂｉｏｔｉｎ进行胞内标记,以显示神经元在皮层内的分布及形态特点．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｔｉｎ标记细胞图象三维重建表明,电生理机能不同的伤害感受神经元与非伤害感受神经元在形态特征方面也存在差异（Ｐ＜０．０１）．此结果在细胞水平为阐明皮层体感区在伤害感受性反应中的作用提供了实验资料,进一步从形态学方面为痛觉特异性学说提供了新的补充依据．     

科罗索酸诱导细胞内ROS及Ca2+超载抗人结肠癌的研究

为了研究科罗索酸对人结肠癌SW480细胞的抗增殖、促凋亡作用及其机制,分别采用不同浓度的科罗索酸干预SW480细胞24和48 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(IC_(50));使用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色以及Annexin V-FITC/PI双染检测科罗索酸诱导细胞凋亡的作用;通过单克隆实验考察科罗索酸对SW480细胞增殖能力的影响;采用2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法和二氢乙啶(DHE)超氧化合物阴离子荧光探针法检测科罗索酸对SW480细胞内的活性氧(ROS)浓度的影响;荧光探针(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Ca~(2+)荧光探针Fluo-4AM检测细胞内Ca~(2+)浓度;蛋白质免疫印迹法检测科罗索酸对线粒体凋亡通路相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2和Cleaved PARP表达的影响。结果表明:科罗索酸干预细胞24和48 h的半数抑制浓度分别为12.13和7.79μmol/L;低于半数抑制浓度的科罗索酸可以显著抑制SW480细胞的增殖;与空白对照组相比,科罗索酸(3.75、7.5和15μmol/L)干预SW480细胞后,其细胞凋亡率分别为20.05%、20.95%和31.60%,线粒体膜电位显著下降;同时,Cleaved Caspase-3、Bax和Cleaved PARP蛋白表达水平显著上升,Bcl-2表达水平显著降低,科罗索酸激活线粒体凋亡通路诱导SW480细胞凋亡。科罗索酸可以明显抑制SW480细胞的增殖并激活线粒体凋亡通路发挥抗肿瘤作用,其机制与上调细胞内活性氧浓度和Ca~(2+)超载有关。     

光合蝾螈

<正>首次在脊椎动物蝾螈细胞内发现存在促光合作用的藻类:蝾螈和这种海藻之间存在着共生关系,将挑战脊椎动物细胞自适应免疫系统的现有理论——     

传递细胞信号的第五种衔接蛋白现身 有望改变细胞生物学的研究面貌

[科技日报]据美国物理学家组织网10月12日(北京时间)报道,学界长期认为,4个衔接蛋白(adaptin)参与了细胞内外以及周围信息的整合与传递。但现在,科学家们找到了第5个衔接蛋白。这一发现将修改教科书并改变细胞生物学研究的面貌。研究发表在10月11日出版的《科学公共图书馆.生物》上。     

揭开细胞“货运”之谜

生物体内每一个细胞都是一个生产和输出分子的工厂。比如,胰岛素在这里被制造出来并释放进入血液当中,神经传递素从一个神经细胞传导至另一个细胞。这些分子在细胞内都是以“小包”的形式传递的,这就是“细胞囊泡”。来自美德的三位获奖科学家发现了这些“小包”如何被在正确的时间输运至正确地点的分子机制。