帕金森病的研究现状

帕金森病（PD）是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，病理特征主要是黑质多巴胺能神经元的变性死亡。本文对PD的历史发展、基底节神经传导通路、病理生理机制、病因学说和治疗进展进行系统的阐述。     

牛磺酸抗运动疲劳机制研究—牛磺酸对力竭游泳大鼠心肌线粒体脂质过氧化水平及GSH含量的影响

为探讨牛磺酸对运动机体的作用，本研究以力竭游泳大鼠为运动疲劳模型，观察了牛磺酸对心肌线粒体中MDA及GSH含量的影响。结果表明，牛磺酸有显著抑制疲劳运动条件下心肌线粒体脂质过氧化水平及提高GSH含量的作用。这可能是其线粒体膜保护机制之一。     

细胞程序性死亡研究方兴未艾

回首上世纪90年代后期,在生物学热点论文榜中,关于细胞凋亡(apoptosis)的论文随处可见。与无序的被称为坏死(necrosis)的细胞死亡相对,细胞凋亡是一种受调控的有序的细胞自杀机制。细胞凋亡不仅在发育中起着关键作用,例如杀死手指和脚趾间的细胞形成指/趾头,而且在人类的日常生活中同样至关重要,每人每天约有500亿～700亿个细胞发生调亡,一年调亡的细胞量几乎相当于一个人的体重。当这个过程出现异常时会导致癌症和其他疾病     

大熊猫线粒体DNA酶切片段长度多态性研究

用１２种限制性内切酶（ＢａｍＨⅠ，ＥｃｏＲⅠ，ＥｃｏＲⅤ，ＸｈｏⅠ，ＰｓｔⅠ，ＭｓｐⅠ，ＸｂａⅠ，ＰｖｕⅡ，ＨｉｎｄⅢ，ＨａｅⅢ，ＳａｃⅠ，ＨｐａⅡ）对秦岭大熊猫线粒体ＤＮＡ进行了酶切。测定和分析了每种酶所产生片段的数量和大小，并与四川大熊猫的限制性片段进行了比较，发现在相同的６种酶的１６个酶切位点中有一个不同，表明这两地群体间存在着线粒体ＤＮＡ的多态性。其研究结果为进一步研究和保护大熊猫提供了重要依据。     

线粒体间隙蛋白质转运方式的研究进展

所有的线粒体间隙蛋白质都是在胞质中合成的.这些蛋白质合成以后,通过三种方式被转运至线粒体间隙.第一种需要ATP水解供能,利用膜上的电化学势能进行转运;第二种需要利用蛋白质折叠时获得的能量完成转运;第三种需要利用线粒体间隙内的高亲合力的结合位点协助转运.本文将对这三种转运方式做一综述.     

鸡肝脏和心脏线粒体的热化学研究

利用ＬＫＢ２２７７生物活性检测系统，测定了家鸡两个品种的心脏和肝脏线粒体的活性及其代谢热。结果表明：这两个品种鸡的心脏和肝脏线粒体热谱图各异，ＡＶＩＡＮ心脏和肝脏线粒体的总体谢时间和总代谢热量大于ＳＴＡＲ－ＣＲＯＳＳ２８８。讨论了热谱图与不同品种鸡的线粒体代谢的关系。     

Vanadyl ions binding to GroEL （HSP60） and inducing its depolymerization

Several vanadium compounds have been known for the hypoglycemic and anticancer effects. However, the mechanisms of the pharmacological and toxicological effects were not clear. In this work, we in- vestigated the potential targets of vanadium in mitochondria. Vanadyl ions were found to bind to mi- tochondria from rat liver with a stoichiometry of 244±58 nmol/mg protein and an apparent dissocia- tion constant (Kd) of (2.0±0.8)×10·16 mol/L. Using size exclusion chromatography, a vanadium-binding protein was isolated and identified to be the 60-kDa heat shock protein (HSP60) by mass spectrometry analysis and immunoassays. Additionally, binding of vanadyl ions was found to result in depolymeri- zation of homo-oligomeric HSP60 (GroEL). HSP60 is an indispensable molecular chaperone and in- volved in many kinds of pathogenesis of inflammatory and autoimmune diseases, e.g. type 1 diabetes. Our results suggested that HSP60 could be a novel important target involved in the biological and/or toxicological effects of vanadium compounds.     

MCUR1蛋白的表达纯化以及晶体初筛

Mitochondrial Ca~(2+)Uniporter(MCU)是线粒体钙离子通道的一个主要成分.近期研究发现Mitochondrial calcium uniporter regulator 1(MCUR1)是MCU的一个调节蛋白.研究通过合成人源的MCUR1基因,利用PCR得到目的DNA片段,克隆到表达载体PET.32a,构建Trx-MCUR1融合蛋白表达质粒PET.32aMCUR1.克隆质粒转化表达菌E.coli BL21(DE3)Condon Plus,经IPTG诱导表达.将得到的融合蛋白经过镍亲和层析柱进行初步纯化,然后加入PreScission酶分离目的蛋白与标签,再用离子柱和分子筛层析进行进一步的纯化以去除标签以及杂蛋白.浓缩纯化后的目的蛋白,进行晶体初筛以及后期的晶体优化.最后将生长的晶体进行初步的X射线衍射分析.     

DBP对大鼠睾丸支持细胞内Ca2+、线粒体膜电位及Caspase活性的影响

目的通过测定DBP对大鼠睾丸支持细胞内Ca2+、线粒体膜电位及Caspase活性的影响,探讨DBP是否通过影响线粒体膜电位而引起支持细胞凋亡.方法建立支持细胞原代培养体系,将细胞分为0.1%DMSO(对照组)、1 mg/L(低剂量组)、10 mg/L(中剂量组)、100 mg/L(高剂量组),分别处理细胞24 h;荧光分光光度计测定支持细胞内Ca2+的浓度,流式细胞仪检测线粒体膜电位,酶标仪测定Caspase-9和Caspase-3的活性.结果与对照组相比,高剂量组中Ca2+浓度明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),而低、中剂量组与对照组比较无统计学意义(P0.05).DBP导致的线粒体膜电位升高在中、高剂量组中具有统计学意义(P0.05),随着DBP浓度的增加,Caspase-9与Caspase-3的活性升高,差异均具有统计学意义(P0.05).结论 DBP能显著降低支持细胞线粒体膜电位,改变线粒体膜的通透性,进一步升高Caspase-9及Caspase-3的活性,并最终导致睾丸支持细胞凋亡.     

CRISPR-Cas9系统定向编辑TCR基因的sgRNA筛选

为构建靶向T细胞抗原受体(T Cell Receptor,TCR)基因的CRISPR-Cas9基因组编辑系统,基于p X458质粒构建靶向TCR基因β链C区的CRISPR-Cas-sgRNA质粒,将其转染Hep G2细胞系,用流式细胞术检测转染效率;转染48 h后提取Hep G2细胞基因组DNA,扩增含有编辑位点的片段,测序分析该片段的峰图改变;对出现双峰的扩增片段做T-A克隆后测序分析,确定基因编辑发生的位置,并结合转染效率计算基因编辑效率.结果表明,成功构建含有3种sgRNA序列(N1、N2、S1)的p X458-sgRNA质粒,其转染效率分别为38.5%(N1)、39.7%(N2)和24.2%(S1);基因组PCR产物测序分析发现,S1组扩增片段在打靶位置出现杂峰;T-A克隆测序发现,20克隆有4个发生了基因编辑(20%),结合转染效率(24.2%)可知,编辑效率约为83%.可见,本文成功构建靶向TCR基因的CRISPR-CassgRNA质粒,并鉴定出基因编辑效率较高的一种sgRNA序列.