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171.
Activity and Structure Changes of Arginine Kinase from Shrimp Feneropenaeus chinensis Muscle in Trifluoroethanol Solutions 总被引:2,自引:0,他引:2
Trifluoroethanol has often been used in protein folding studies. The changes in activity and unfolding of arginine kinase from shrimp Feneropenaeus Ghinensis muscle during denaturation in different concentrations of trifuoroethanol were investigated using far-ultraviolet circular dichroism and fluorescence emission spectra. Arginine kinase was inactivated in trifluoroethanol solutions. The tertiary and secondary structures of arginine kinase were also destroyed in the trifluoroethanol solutions. The unfolding and inactivation courses were measured and compared. Inactivation occurred prior to unfolding, which suggests that the arginine kinase active site is more easily damaged by the denaturant than the enzyme as a whole. The result also indicates that the arginine kinase active site is situated in a limited and flexible region of the enzymemolecule. 相似文献
172.
本研究利用RT-PCR结合 RACE 方法扩增出了三角褐指藻甘油激酶(PtrGK)基因全长 cDNA序列,其完整 ORF为2079 bp,编码692个氨基酸。基于上述序列构建了甘油激酶原核表达载体。构建反向互补RNA干扰载体并转化野生型三角褐指藻,得到含有甘油激酶反向互补干扰结构的转基因藻。研究表明:其甘油激酶表达水平、利用某油速率和细胞分裂速度都较野生型藻有了较大程度的下降。说明甘油激酶对三角褐指藻甘油兼养生长的重要作用。 相似文献
173.
证实了促使细胞分裂素活性蛋白质激酶在DNA和RNA合成过程中的作用;但求预料到这种多功能的酶还以另一种方式影响细胞生长。 相似文献
174.
175.
176.
为探讨镍胁迫对桡足类影响的分子机制,以安氏伪镖水蚤(Pseudodiaptomus annandalei)为研究对象,采用cD-NA末端快速扩增技术(RACE)方法获得了安氏伪镖水蚤精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)cDNA全序列,全长1 180bp,开放阅读框1 068bp,编码355个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量为39.43ku.Blast分析结果显示,安氏伪镖水蚤AKcDNA与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、多齿新米虾(Neocaridina denticulata)和光滑双脐螺(Bi-omphalaria glabrata)AK基因具有较高的同源性(77%~82%).荧光定量PCR结果显示:低质量浓度镍(10μg/L)对AK转录水平呈现峰值效应,高质量浓度(40和500μg/L)镍则对AK呈现抑制效应,表明AK与安氏伪镖水蚤响应重金属胁迫密切相关.本研究为揭示镍胁迫对桡足类的影响机制提供理论依据. 相似文献
177.
采用聚合酶链式反应(PCR)扩增精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)N端基因片段,经双酶切后连接至含有蛋白质内含子Ssp DnaB基因的质粒载体pTWIN1中,将Ssp dnaB和N-domain的融合基因利用双酶切手段重组到含有组氨酸标签(His-tag)的质粒载体pET-28a中,得到含有组氨酸标签的融合蛋白基因,并在大肠杆菌Rosetta中表达,为获得具有天然氨基酸序列的精氨酸激酶N端结构域打下基础。 相似文献
178.
以Hela细胞为模型,探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(R)-roscovitine对Hela细胞凋亡诱导的可能途径,进一步了解其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.结果显示:(R)-roscovitine明显抑制Hela细胞的增殖,在17.5~140.0μmol.L-1浓度作用12,24,48h后,Hela细胞的增殖抑制率分别为8.48%~33.76%,25.19%~86.41%和47.90%~88.08%;典型凋亡的DNA ladder被诱导,且凋亡率随药物浓度的增加而升高;经半胱天冬酶-3(caspase-3)特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO或半胱天冬酶泛抑制剂Z-VAD-FMK处理后,(R)-roscovitine对Hela细胞凋亡的诱导被抑制约20%,说明半胱天冬酶依赖的途径参与了(R)-roscovitine对Hela细胞凋亡的诱导;(R)-roscovitine诱导凋亡诱导因子(AIF)从线粒体释放细胞核中,且Ac-DEVD-CHO和Z-VAD-FMK没有抑制AIF的释放,这意味着(R)-roscovitine能够诱导Hela细胞凋亡,其机制是通过caspase与非caspase依赖两种途径. 相似文献
179.
胰岛素是通过胰岛素信号的转导通路来发挥其调节血糖并且促进其代谢合成的,其中磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)在胰岛素信号转导中起关键性作用,而胰岛素信号转导通路障碍所引起的胰岛素抵抗在Ⅱ型糖尿病治疗中有着至关重要的作用.从胰岛素抵抗的发病机制、影响PI-3K的因素等几个方面综述了PI-3K在Ⅱ型糖尿病发病机制中的作用. 相似文献
180.
平滑肌肌球蛋白轻链激酶对肌球蛋白的非钙依赖性磷酸化 总被引:1,自引:0,他引:1
发现肌球蛋白轻链激酶(MLCK)不仅以钙依赖性的方式,同时也以非钙依赖性的方式参与对肌球蛋白轻链的磷酸化。该非钙依赖性磷酸化的特征是:需要高浓度,但受温度升高、反应时间延长、离子浓度升高的影响远小于钙依赖性磷酸化。研究结果提示肌球蛋白轻链激酶对肌球蛋白的非钙依赖性磷酸化可能是一种新的机制,并与平滑肌张力的维持有关。 相似文献