产纤溶酶菌种的鉴定及纤溶酶的分离纯化

为了获得纯纤溶酶并探讨其酶学性质,从广泛收集的豆豉中筛选到一株具有高产纤溶酶能力的菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌.将该菌突变株DC-12N8的发酵液经离心除菌、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤,获得电泳纯的豆豉纤溶酶,每升发酵液可得到4.5mg活性酶蛋白,每克酶蛋白活力达1.18mol/s,纯度为发酵原液的53.6倍,回收率为11.7%.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明,该酶是单链蛋白质,其分子质量约为28ku.     

罗格列酮钠片溶出度的测定方法

采用紫外分光光度法测定罗格列酮钠片的溶出度。检测波长234nm。转速50r·min-1,溶出介质为0.01mol/L盐酸500mL;罗格列酮钠在(4～20)μg·mL-1-范围内线性良好,r=0.9999(n=7),方法平均回收率99.95%(n=9),日内和日间RSD分别为0.49%及0.75%。20min定时取样测定,主药溶出95%以上。方法简便、准确,可有效的控制其质量。     

重组人骨形成蛋白-4的大规模制备

含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽（recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP-4m）质粒的工程菌株,导人15LNBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体,PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱．以0.35mol NaCl洗脱．获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34s／L发酵液;收得率为36.4％。结果表明：使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。     

蛇毒中生物活性酶的研究进展

蛇毒是一类包含蛋白质、多肽和金属离子等成份的混合物.蛇毒中的多种生物活性酶决定了其功能的多样性,例如凝血、溶栓、止痛和抗肿瘤作用等.然而,由于蛇粗毒免疫原性强和副作用多等缺点,其临床应用受到了一定的限制.随着新技术和分离纯化方法的发展,越来越多蛇毒产品的新功能被开发出来.针对蛇毒成分的分离纯化技术和分析鉴定方法,对研究...     

高演化碳酸盐岩烃源岩生烃演化特征与评价方法

中国在下古生界海相碳酸盐岩层系的油气勘探取得了重大突破,在此背景下,下古生界广泛发育的高演化、低TOC丰度的碳酸盐岩能否成为有效烃源备受关注。碳酸盐岩烃源岩中的成烃生物主要以浮游藻类为主,有机质除了干酪根之外,还存在丰富的可溶有机质和酸溶有机质,这些特殊性质决定了碳酸盐岩中有机质具有较高的生烃转化率。另一方面,在高过成熟阶段,碳酸盐岩烃源岩中存在显著的有机碳向无机碳转化过程,其机理主要与TSR作用和有机酸盐生烃有关,并表现出碳酸盐岩碳同位素组成的负漂。这些因素是导致高演化碳酸盐岩烃源岩表观TOC低的重要因素。因此,不能以TOC低否定高演化碳酸盐岩烃源岩经历的生烃过程和生成烃量。高过成熟碳酸盐岩烃源岩评价应综合考虑成烃生物类型与数量、有机碳同位素组成和无机碳同位素负漂等因素。     

千金藤素片和千金藤素滴丸溶出度的比较

目的比较千金藤素片和千金藤素滴丸在溶出方面的表现。方法采用桨法进行试验,以人工液为溶出介质,测量温度（37±0.5）℃,转速100r／min,于不同时间点取样,测定千金藤素含量,计算溶出参数m、T50、Td。结果千金藤素滴丸的溶出参数m、T50、Td均明显小于千金藤素片。结论千金藤素滴丸的溶出度快于千金藤素片。     

海泥美容功效体系制备条件的研究

采集浙江舟山秀山的滩涂海泥,通过水浸提、过滤、离心沉降处理制备水溶体系,采用BCS-Trolox法测定体系的总抗氧化性能,采用酪氨酸酶法评价体系的美白功效;研究了制备水溶体系时温度、pH、时间和转速对体系的抗氧化性能和美白功效的影响。结果表明：海泥水溶体系制备的工艺条件为温度40～65℃、时间20 min,转速9 000 r/min的酸性条件,体系的抗氧化性能和美白功效显著。     

高效液相色谱法测定氟康唑胶囊的溶出度

利用高效液相色谱法建立了测定氟康唑胶囊溶出度的方法.采用vp-ODS(150 mm×4.6 mmi.d)色谱柱,流动相为pH7.0的磷酸盐缓冲液-甲醇(体积比55∶45),流速1.0 mL/min,检测波长为261 nm,进样体积10μL,柱温为室温.氟康唑在0.02~1.00 g/L内,峰面积和质量浓度呈良好线性关系(r=0.9999),最低检出限为10 ng,方法精密度RSD为0.28%(n=6),平均回收率为99.08%(n=9).该方法准确,简单,灵敏,可用于该制剂溶出度的测定.     

一种导向性溶栓剂的基因构建及其在大肠杆菌中的表达

以针对人活化血小板表面糖蛋白GMP140的单克隆抗体SZ51的单链抗体作为导向分子,以单链尿激酶32kd变体(scu-PA-32k)作为效应分子,构建了一种新型的导向性溶栓剂。通过聚合酶链式反应(PCR),分别从SZ51的Fab片段基因中扩增出V_K和V_H区;从尿激酶原基因中扩增出scu-PA-32k基因。通过合适的linker及酶切位点,将V_K, V_H及scu-PA-32k基因相连接并装入表达载体pET-5a中的Nde I位点,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达了重组蛋白。Western-Blotting检测到在8mol/L尿素存在下,该重组蛋白与抗尿激酶的多克隆抗体之间仍有弱的结合反应。表达产物经变复性处理和部分分离纯化后,在纤维蛋白平板上表现有较好的纤溶活性,且这种活性是通过激活纤维蛋白溶酶原为纤溶酶而实现的。重组蛋白纤溶活性的比活达到17500IU/mg,较好地保留了尿激酶的纤溶活性,重组蛋白的产率约每100g湿菌为1.5mg。     

改进的溶致变色法测定分子的一阶超极化率

依据Ｌｉｐｐｅｒｔ和Ｂｉｌｏｔ－Ｋａｗｓｋｉ的溶致变色理论,结合最子化学中的双能级模型,建立了一套确定有机分子一阶超级化率β的半经验方法,对传统的溶致变色法作了若干改进,不用测定分子的基态偶极矩而直接测定其电荷转移激发态与其态的偶极矩差值（μｅ－μｇ）,并建议确定Ｏｎｓａｇｅｒ笼半径的公式ａ＝ｒｕ＋０．５ｒｖ中ｒｖ应取为实际使用的几种溶剂的平均半径,而不应取固定值０．３４ｎｍ,应用双能级模型时应根据实际取得重要的激发态,并非总是取第一激发态,还能得到化合物的较系统的光物理参数,对２－（对乙酰氨基）苯基－４,５－二（对硝基）苯基咪唑分子的研究表明,β的测量值与作和ＦＦ／ＰＭ３量子化学方法计算的结果相一致,说明本文方法的可靠必来倍频材料的设计、筛选和优化提供了便捷的途径。