花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明：该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

Na+-K+-ATP酶的π-演算语义及验证

给出了Na⁺-K⁺-ATP酶跨越细胞膜同时主动向胞内运转钾离子和向胞外运转钠离子这一生化过程的π-演算模型及该模型的Spin验证. 证明了用过程代数的方法表示以“相互通讯”和“可移动”为主要特征的生物系统并模拟其行为的可行性.      

盐胁迫下拟南芥去乙酰化酶基因的转录组分析

为了探究盐胁迫下拟南芥HD2去乙酰化酶调控的下游基因,本研究以拟南芥野生型WT和四突(hd2q,HD2四个基因的突变体)为材料,采用RNA-seq技术和生物信息学方法,对生长10d的幼苗在高盐(150mmol/LNaCl)处理前和后进行比较转录组分析,并结合实时荧光定量PCR验证转录组数据的可靠性.结果显示:在高盐处理...     

酶体外定向进化(Ⅱ)文库筛选的方法及其应用

定向进化是改造蛋白质分子的一种有效的新策略,但其构建的文库非常大,待筛选的克隆常常多达10^5～10^10．同时在目的酶筛选中,至关重要的是找到高灵敏度、高选择性和高通量的筛选方法．居于此,文中综合评述在突变株分离、酶检测和信号探测等方面,目前的一些常用技术及其最新进展．     

聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶的工艺研究

采用交联法制备了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体,并将其用于固定化L-天门冬酰胺酶。研究了聚乙二醇浓度、交联剂戊二醛浓度、活化剂甲醛浓度、酶溶液浓度等因素对PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶活力的影响。结果表明：在适当的条件下,PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶的活力可达20～40U／g,并且PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶具有良好的生化性质。     

白腐真菌锰过氧化物酶的动力学研究

进行了白腐真菌锰过氧化物酶处理苯胺溶液的动力学研究,导出了酶降解动力学模型。通过测定不同苯胺质量浓度溶液吸光度值,确定苯胺溶液标准曲线,建立苯胺质量浓度与吸光度值的关系方程式。统计分析表明:米氏方程当作模拟模型,应用Lineweaver-Burk法进行数学回归分析,对锰过氧化物酶进行反应动力学研究是可行的。通过数学处理,确定了锰过氧化物酶重要的动力学特征参数:Vm=0.3527mg/L·min,Km=2.7696mg/L。为白腐菌的工业应用提供了重要依据。     

锰纳米酶比色法检测电化学制备过氧化氢

为了拓展纳米酶的应用,采用离子交换和高温热解法将均匀分散的锰原子掺杂到中空碳骨架中制备中空结构的锰纳米酶;提出一种基于锰纳米酶的比色法,用于检测电化学双电子氧还原原位产生的过氧化氢的浓度。结果表明,锰纳米酶具有优异的类过氧化物酶活性,可催化过氧化氢将无色3, 3’, 5, 5’-四甲基联苯胺(TMB)氧化为蓝色氧化态TMB;当过氧化氢浓度为0～6 mmol/L时,体系的吸光度与过氧化氢浓度具有良好的多段线性关系,锰纳米酶比色法具有极低的检出限(0.45μmol/L)和优异的抗干扰性能。     

云芝多糖在NO诱导的巨噬细胞凋亡中的分子基础

在应用云芝多糖的基础上,用NO诱导居噬细胞凋亡,发现云芝多糖可加强NO诱导的细胞凋亡;通过RT－PCR观察诱导生性一氧化氮合酶基因的表达情况,结果表明云芝多糖能诱导一氧化氮合酶基因表达,并可增强γ干扰纱和脂多糖的诱导作用,提示云芝多糖在动脉粥样硬化中的防治作用是通过诱导诱生性一氧化氮合酶表达而实现的。     

魔芋葡甘低聚糖醛酸丙酯硫酸酯钠盐生物活性研究

为了研究低聚KGM醛酸丙酯硫酸酯钠盐的抗凝和抗栓作用,应用玻片法研究了对小鼠凝血时间的影响;应用大鼠体外颈动脉－颈静脉血流动旁路法形成血小板血栓模型研究了其对血栓形成的影响;并进行了对兔凝血活酶时间（PT）和纤维白原（Fg）的影响的研究。结果表明剂量在0.9-3.6g/kg时,能明显延长小鼠的纤维蛋朱含量效果显著,其LD50为8.8lg/kg。说明该物质具有明显的高凝血和抗血栓作用,毒性极微,是一种有前途的防治心血管疾病的新型低分子类肝素物质。     

多孔菌（Polyporus）多酚氧化酶的性质研究

研究了多孔菌（PoLyporus）多酚氧化酶的产酶曲线及酶作用最适条件;结果表明在该培养条件下,多孔菌第12天达产酶高峰,峰值酶活为529μ/ml,酶作用的最适PH值为6.0,最酶解温度为30℃,Mg^2 对漆酶有激活作用,而Ag^ 、Cl^-则能明显无抑止漆酶活性。