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21.
22.
SARS冠状病毒N蛋白的表达及二级结构预测分析 总被引:2,自引:1,他引:2
通过RT-PCR获得SARS冠状病毒N蛋白基因,分别克隆到原核表达载体pET21a,pET32a和pGEX-4T-1中,将3种重组质粒pET2la-N,pET32a-N和pGEX-4T-1-N分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,细菌中分别表达出约46kD的重组N蛋白、约60kD的6xHis-N融合蛋白和约70kD的GST-N融合蛋白,表达量分别达总蛋白的45%、40%和30%.进一步的分析表明:6xHis-N融合蛋白在大肠杆菌中为可溶性表达,该可溶性组分占细菌裂解液的70%左右,且能被6xHis抗体所识别.用蛋白分析软件对N蛋白进行了序列分析和二级结构预测.SARS冠状病毒N蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,有助于进一步结晶后进行X射线晶体衍射分析其结构与功能. 相似文献
23.
24.
信息素在八肋游仆虫接合生殖过程中起着重要的诱导配对作用,为了进一步研究其诱导机制,根据已知的基因序列,应用PCR技术,扩增信息素G3基因,并将该基因插入表达载体pGEX-6P1中,构建了重组表达质粒pGEX-6P1-G3.重组菌在37℃下,经1.0mmol/L IPTG诱导,12%SDS-PAGE分析,在37kDa处出现明显的特异目的带。 相似文献
25.
从牛泡沫病毒BFV3026感染的胎牛肺细胞中提取Hirt DNA,PCR扩增BFV3026 gag基因。序列分析确证后,将其克隆于原核表达载体pET32A,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,使Gag蛋白得以高效表达。SDS-PAGE及Western blot证实:表达蛋白占菌体总蛋白的40%,本工作的完成为Gag蛋白功能的研究奠定基础。 相似文献
26.
为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化.观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6.其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5 g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108 μmol/min*mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%.最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论. 相似文献
27.
纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究 总被引:5,自引:1,他引:5
以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。 相似文献
28.
本文报道了2,5—二(2′—苯氧乙酸乙酯)—1,3,4—噻二唑的合成,使用相转移催化剂TBAB以及无机混合碱KOH—K2CO3,可使产率达64.5%。 相似文献
29.
线性常微分方程组多点边值问题的插值矩阵法 总被引:3,自引:0,他引:3
牛忠荣 《合肥工业大学学报(自然科学版)》1996,(1)
本文构造了插值矩阵法求解线性混合阶常微分方程组多点边值问题的基本理论,并制作了该法的ODE求解器IVMODE,演示了数值实验。 相似文献
30.
周晓中 《淮北煤炭师范学院学报(自然科学版)》1996,(2)
本文证明了almost 空间(Star 空间,W1 空间,weaklyw1 空间)是连续映射下的不变量,并在一定条件下讨论了它们的逆不变量. 相似文献