UV-B预处理对拟南芥uvr8-2突变体响应干旱胁迫的影响

以拟南芥uvr8-2突变体植株为材料,研究UV-B预处理对植株响应干旱胁迫的影响以及植物激素在此过程中的作用.实验结果表明:从形态观察到生理指标,UV-B预处理显著提高了拟南芥uvr8-2突变体的干旱适应性,与野生型Ler的结果一致;UV-B预处理显著提高了拟南芥uvr8-2突变体抗氧化酶SOD、POD、CAT活性,抗氧化酶基因POD和CAT的表达量,以及植物激素ABA、JA、SA的质量分数,降低了细胞膜受损程度.由此推测:UV-B预处理诱导uvr8-2植株的干旱适应性中存在一条不依赖于UVR8的信号转导途径,即通过增加植物逆境响应激素ABA、JA和SA的质量分数,调控抗氧化酶基因CAT和POD表达和增强抗氧化酶活性,从而缓解干旱胁迫下拟南芥的叶片萎焉、相对含水量下降等现象.     

Identification of a novel tillering dwarf mutant and fine mapping of the TDDL（T） gene in rice （Oryza sativa L.）

Rice plant architecture is an important agronomic trait that affects the grain yield. To understand the molecular mechanism that controls plant architecture, a tillering dwarf mutant with darker-green leaves derived from an indica cultivar IR64 treated with EMS is characterized. The mutant, designated as tddl（t）, is nonallelic to the known tiilering dwarf mutants. It is controlled by one recessive nuclear gene, TDDL（T）, and grouped into the dn-type dwarfism according to Takeda＇s definition. The dwarfism of the mutant is independent of gibberellic acid based on the analyses of two GA-mediated processes. The independence of brassinosteroid （BR） and naphthal-3-acetic acid （NAA） of the tddl（t） mutant, together with the decreased size of parenchyma cells in the vascular bundle, indicates that the TDDL（7） gene might participate in another hormone pathway. TDDL（T） is fine mapped within an 85.51 kb region on the long arm of rice chromosome 4, where 20 ORFs are predicted by RiceGAAS （http：//ricegaas.dna.affrc. go.jp/rgadb/）. Further cloning of TDDL（T） will benefit both marker assisted selection （MAS） of plant architecture and dissection of the molecular mechanism underlying tillering dwarf in rice.     

十字花科黑腐病菌一个致病相关基因的鉴定

十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,简称Xcc)8004菌株的一个转座子插入突变体186807,其Tn5gusA5插入位点位于一个推测的双组分调控系统的感受蛋白基因XC2229中.该突变体对寄主植物满身红萝卜的致病力显著降低.为了进一步证实XC2229基因与该菌致病力之间的相关性,本工作构建了该基因的缺失突变体DM2229.DM2229与186B07在寄主上的致病力基本一致,均显著低于野生型Xcc 8004.生化及表型检测结果表明,DM2229的胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)产量降低,细胞运动能力减弱.用带有完整XC2229基因的pLALR6互补DM2229,互补菌株CDM2229在EPS合成、细胞运动能力以及致病力方面与野生型Xcc 8004基本一致.这些实验结果表明,XC2229是一个与EPS合成、细菌运动相关的基因.推测该基因通过调控EPS的生成和运动能力而影响Xcc的致病力.     

Discovery of a male-biased mutant family and identification of a male-specific SCAR marker in gynogenetic gibel carp Carassius auratus gibelio

Gibel carp (Carassius auratus gibelio) is a uniquely gynogenetic species with a minor ratio of males in natural habitats, but its male origin and sex determination mechanisms have been unknown. In this study, a male-biased mutant family was discovered from the gynogenetic gibel carp, and a male-specific SCAR marker was identified from the mutant family. Normal spermatogenesis was observed in the male testes by immunofluorescence histochemistry. Nearly identical AFLP profiles were observed between males and females, but a male-specific 86 bp AFLP fragment was screened by sex-pool bulked segregant analysis and individual screening. Based on the male-specific AFLP fragment, a total of 579 bp sequences were cloned by genome walking. Subsequently, a male-specific SCAR marker was designed, and the male-specific DNA fragment was confirmed to be steadily transmitted to the next generation and consistently detected only in males.     

白光下拟南芥隐花素双突变体及其野生型的蛋白质组学比较分析

隐花素是植物的蓝光受体,在植物中调节多种光形态建成,包括抑制下胚轴的伸长、子叶的伸展和调节植物的开花时间等,但隐花素依赖蓝光调节光形态建成的分子机制仍然不清楚．采用双向凝胶电泳对生长在白光下的拟南芥隐花素双突变体及野生型的幼苗全蛋白进行分离,通过考马斯亮蓝染色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱．选取了55个差异蛋白质点采用MALDI—TOF—TOF—MS进行肽质谱指纹图分析,最终有33个蛋白质点得到了可靠鉴定．其中在crylcry2中相对于野生型下调的有9个蛋白,其他蛋白均表现为上调．这些在白光处理下差异表达的蛋白质主要是参与碳水化合物代谢、能量代谢、细胞组织结构、抵抗压力和解毒、蛋白质的折叠和细胞壁的形成等功能,而且亚细胞定位主要是在叶绿体和线粒体．对其中5个蛋白质点的基因进行了半定量RT—PCR分析,发现这几个蛋白质点的表达与基因的表达基本一致．这些分析结果表明光控制拟南芥的发育是通过共调节许多相关基因的表达而实现的．     

B9（Ser→Asp）检胰岛素突变体0.20nm分辨率晶体结构研究

报道了运用Ｘ射线分析技术,在０．２０ｎｍ分辨率测定了Ｂ９的正交晶型的晶体结构,精化后的模型显示,Ｂ９二聚全的分子骨架与天然胰岛素基本相同素但局部构象与差别,特别在Ｂ９Ａｓｐ突变位点附近的侧逻构象有较大变化,残基Ｂ９,Ｂ１３,Ｄ９,Ｄ１３的４个羧基互相排斥,使二聚体内分子间界面上的窨和电荷互性都遭到严重破坏,从而造成生理条件下胰岛素二聚体的不稳定,及其在生理条件上的强烈单体化趋向,这些变化构成了Ｂ９     

茄假单胞菌寄主花生特异性毒性基因的定位

通过对从茄假单胞菌中克隆的pGX1252进行亚克隆分析,发现含pGX1252右边4.5kbKpnI/EcoRI片段的亚克隆pGX1404仍象pGX1252一样能使对花生不致病菌株T2014在花生上致病.用转座子Tn5-loc对pGX1404进行了饱和插入诱变,一共分离得到6个在pGX1404上不同位置的独立插入突变,其中离pGX1404右末端约1.4kb、2.2kg的两个Tn5-loc插入使pGX1404丧失了扩大T2014寄主范围的能力,证实hsv基因位于pGX1404的右边.     

低磷胁迫对耐低磷玉米自交系幼苗光合特性的影响

采用沙培的方法,研究了低磷对来自细胞工程的耐低磷玉米自交系SD=C、SD-D和齐319叶片光合作用特征的影响. 结果表明：低磷胁迫下,玉米幼苗叶片的无机磷含量、光合速率下降. 耐低磷自交系SD-C、SD-D的无机磷含量、净光合速率下降幅度小于齐319. SD-C和齐319叶片光合速率的降低是受非气孔因素的限制,而SD-D则是受气孔因素的限制. 低磷处理使玉米叶片PSⅡ的光能转换和利用效率降低,耐低磷玉米自交系SD-C、SD-D的光能转换效率和利用效率高于齐319,受低磷胁迫的影响小于齐319. 玉米幼苗叶片内无机磷含量的差异可能是自交系SD-C、SD-D和齐319之间光合作用和叶绿素荧光产生差异的原因.     

紫花苜蓿耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究不同激素对紫花苜蓿2号愈伤组织的诱导效果,筛选出最佳诱导愈伤组织培养基;以茎尖、茎段及叶片作为外植体,确定了叶片作为紫花苜蓿组织培养的最佳外植体;在1/4、1/3及2/3 3种不同海水培养基上分别诱导出紫花苜蓿耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株.     

3种致遗传病PITX2突变体功能的比较研究

角膜环状皮样瘤(RDC)、虹膜发育不全(IH)和Axenfeld-Rieger综合征(ARS)都是常染色体显性遗传病, 都可以由于一个转录因子PITX2的突变引起. 在3种疾病中, RDC的症状最轻, IH其次, ARS最重.将分别引起RDC, IH和ARS的错义突变R62H, R84W和T68P定点地引入PITX2野生型cDNA序列中进行分子功能的比较研究. 结果证明, 3种突变体蛋白都可以在真核细胞中稳定表达, 并且都定位在细胞核中. EMSA和转录激活研究显示, 3种突变体功能保留情况不同, R62H在三者中保留了最多的活性, R84W也保留了小部分功能, 而T68P则完全丧失了DNA结合和转录激活能力. 这一结果证实了前人提出的假设, 即PITX2突变体残留活性的多少决定了疾病表型的严重程度.