Mutator转座子介导的玉米插入突变体库的构建及遗传评价

以Q105, WW51, 115F, V26-2, 919J为Mutator转座子供体材料, 与本地优良玉米自交系受体材料Hz85, W328以及S-Mo17^Rf3Rf3杂交, 获得26718单株的插入诱变F₁群体(M1). 田间鉴定M1单株的生物学特征及农艺学性状的表型突变, 室内考察突变单株自交果穗M2籽粒性状的突变类型, 并以斑点籽粒出现的频率评价Mu因子的转座频率. 结果表明, 在所构建的Mu介导的玉米插入突变体库中, 以W328为母本(BzBz)的M1群体平均田间表型突变频率为0.07; 以W328 × Mu的M2果穗斑点籽粒的出现频率评价的Mu转座频率为0.121802; 在22500个S-Mo17^Rf3Rf3 × Mu单株中, 发现了5个S型玉米细胞质雄性不育突变单株, 突变频率为2.2×10^-4. 利用优化的MuTAIL-PCR技术分析了99条转座子插入位点的侧翼序列, 归并整理后获得59条(每条约400核苷酸序列)非重复靶位点序列. 对59条序列非重复的Mu因子插入产生的9 bp靶位点正向重复序列进行同源性比较分析, 结果表明, Mu的插入有序列热点. 经生物信息学分析后注释了27条与玉米、水稻等植物核苷酸数据库中匹配值较高的功能序列. 利用比较基因组学方法将36条单一基因序列定位在玉米遗传图谱上, 有多条Mu插入靶位点序列定位在单个标记位点上. 分析发现, 8条Mu插入靶位点序列的预测功能与其相应的定位标记的功能具有一致性. Mu插入突变体库的构建与遗传评价为利用Mu转座子进一步发掘玉米基因、深入开展玉米功能基因组学研究搭建起重要的技术与材料平台.     

盐胁迫对小麦耐盐突变体苗期超氧化物歧化酶活性的影响

对小麦盐突变体H8706－34，H8706－44，RH－48，RH8706－49室内水培的苗期（2叶小心），进行了0．7％的NaCl盐胁迫试验，结果表明，非盐胁迫时耐盐性强的突变体的超氧化物歧化酶（SOD）的活性极显著高于耐盐性差的突变体；在盐胁迫时，不同的突变体的SOD活性发生不同的变化，耐盐性强的突变体的SOD活性变化幅度较大，变化周期较长，表现出较好的适应性和对超氧自由基的反应能力；而耐盐性差的突变体的SOD活性的变化幅度小，且变化周期短，表现出较差的适应性和对超氧自由基的较的反应能力。     

小麦抗盐突变体质膜K+通道K+, Na+通透性的改变

突变体Ｋ＾＋通道在１００ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ和ＮａＣｌ溶液中对Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋离子的通透性均显著低子野生裂。突变体Ｋ＾＋通道在ＫＣｌ和ＮａＣｌ溶液中开放频率均显著低于野生型,突变体Ｋ＾＋通道Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋通透性的降低是与其开放频率下降分不开的,突变体和野生型Ｋ＾＋通道的单通道电导性基本一致,两者的差异主要表现在开放频率上。两者Ｋ＾＋通道对Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋通透比所表现出的选择性却无明显差异,分别为     

水稻淡黄叶突变体标810S不同叶位光合特性研究

以温敏核不育系810S为对照,对810S的淡黄叶突变体标810S叶绿素含量、净光合速率、暗呼吸速率和生物产量进行了比较研究.结果表明:淡黄叶突变体标810S各叶位叶绿素含量均比对照810S低,其光合色素含量的变化幅度为对照的60.9%~50.4%,但标810S各叶位净光合速率比对照高,增加幅度为4~5μmol.m-2.s-1.各发育时期的暗呼吸速率标810S比对照高0.23~0.35μmol.m-2.s-1,株高和生物学产量与810S接近.     

水稻小穗维管束发育与联结初探

对不同发育时期的籼型、粳型或其不育系与保持系代表品种的小穗解剖观察表明：小穗维管束由小穗梗中央大维管束和３￣５条边围维管束经分支、连接、不断产生新的维管束进入相应的组织。一般颖片中１￣２条，第１稃片１￣３条，第２稃片１￣４条，第２朵退化小花残余结构中０￣３条，顶生可孕小花的外稃５条，内稃３条，浆片各２条，雄蕊各１条，雌蕊３条，小穗维管束经数次分枝交叉、合并、其结构可分为：花托维管束节，雄蕊维管束节     

利用蛋白质组学技术研究拟南芥隐色素突变体cry 1的差异表达蛋白

隐色素是一类蓝光受体蛋白,在动植物中调节各种光反应.在拟南芥中隐色素是核蛋白,通过蓝光调节控制下胚轴的伸长,子叶的延展,光周期诱导开花以及生物钟.拟南芥隐色1(CRY1)是一种蓝光受体,主要调节下胚轴的伸长,但CRY1下游的光化学反应仍然不清楚.拟南芥隐色素突变体cry1-304和野生型col-4在蓝光条件下,经过7 d的生长,cry1-304的下胚轴的长度比野生型col-4的下胚轴长.为了弄清楚拟南芥蓝光受体隐色素在调节植物生长发育中的机制,采用双向电泳这种蛋白质组学的方法来分离对比cry1-304和野生型col-4在蛋白水平的表达变化.选取了15个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,其中10个蛋白质点得到鉴定和分析,它们包括一些普通酶、氧化还原酶、转录因子、结合蛋白、热休克蛋白等.     

甘蓝型油菜异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)cDNA的克隆与分析

以无花瓣与正常甘蓝型油菜幼嫩花蕾(长度小于0.2 mm)建立的差异表达文库中发现的异胡豆苷合成酶基因（STR）的一个cDNA片段为基础,利用RACE方法获得了甘蓝型油菜的STR基因cDNA全序列BnSTR.序列分析表明BnSTR全长1408 bp,开放阅读框从第20个碱基到第1291个碱基,推导的蛋白序列与Arabidopsis thaliana, Lycopersicon esculentum, Oryza sativa, Rauvolfia manni, Catharanthus roseus和Oph     

使用基因打靶和BAC技术制备t-PA突变体动物乳腺生物反应器的研究

由于外源基因插入染色体组位点的邻近序列对其表达有显著影响即位点效应，不同整合部位引起的位点效应，常造成各个转基因动物系之间外源基因表达巨大差异，甚至可使外源基因沉默，转基因效率低和整合位点效应是造成大型动物乳腺生物反应器制备成本高的主要原因。为了解决这些问题，从技术上解决效率低和位点效应问题，军事医学科学院生物工程研究所在国家863计划“使用基因打靶和BAC技术制备t-PA突变体动物乳腺生物反应器的研究”（2005AA206620）课题研究中，     

拟南芥活性氧响应基因GDI功能初步分析

从拟南芥(Arabidopsis thaliana)T-DNA插入突变体库中筛选分离到活性氧敏感突变体gdi并克隆出相应基因GDI,生物信息学分析发现该基因具有多个ABA及氧化胁迫相关顺式作用元件,定量PCR及GUS染色结果表明该基因主要在花器官中表达,激光共聚焦实验显示GDI蛋白在细胞质中广泛分布.