2009年诺贝尔奖简评

生理学或医学奖：3位美国科学家伊丽莎白·布兰克波恩、卡罗尔·格雷德以及杰克·绍斯塔克共同获得该奖项。获奖原因是“发现端粒（Telomere）和端粒酶（Telomerase）是如何保护染色体的”，评审委员会形容发现“解决了生物学的重要课题”。     

端粒、端粒酶和肿瘤、细胞衰老

端粒和端粒酶是现代生物学研究的热点,端粒的缺失与细胞的衰老,端粒酶的活性与细胞的老化及癌化均有密切的关系.文章综述了端粒和端粒酶的结构和功能及其与细胞衰老及肿瘤的关系,并在此基础之上展望了端粒酶在抗衰老、抑制肿瘤等方面的应用.     

关于端粒酶研究:结果与问题

端粒酶是一种由RNA和蛋白质构成的复合结构，在活性状态下端粒酶可以其自身的RNA中的内设模板区为模板，以逆转录方式为染色体末端“加尾”。端粒酶活性的恢复是动物克隆成功的关键因素之一。但是，端粒酶活性恢复机制、端粒酶基因表达调控信号及端粒酶活性与衰老体细胞中染色体端粒恢复的关系等问题还有待研究解决。     

核黄素光敏损伤端粒DNA单链及端粒酶RNA亚基机理研究

采用电子自旋共振（ESR）消减法及光切割法对核黄素激发三重态单电子氧化寡聚核苷酸的机理进行了探讨．结果表明：UVA光照下,作为内源性光敏剂的核黄素能够高效切割端粒DNA单链及端粒酶RNA亚基用于合成端粒DNA的模版区,从根本上阻断端粒酶维持癌细胞端粒DNA长度的反转录过程,促使癌细胞凋亡．     

端粒好,一切皆好

●2009年诺贝尔医学奖得主伊丽莎白·布莱克本(Elizabeth Blackburn)在今年林道会议上发表的演讲中,介绍了她获得诺贝尔奖的端粒研究。众所周知,端粒是染色体两端的保护帽,能够起到某种抗癌作用,并与人体衰老现象有所联系,但其完整的生物学上的机理仍是一个谜。     

转录因子COUP-TFII对端粒酶活性的抑制及其相互作用蛋白的分离和鉴定

端粒酶催化亚基hTERT的转录调控是端粒酶活性调节的关键步骤．实验分离和克隆了参与hTERT转录调控的转录因子COUP-TFII，分析了其对HeLa细胞端粒酶活性的生物学效应，并分离和鉴定了与其相互作用的蛋白质．结果表明在以hTERT启动子为诱饵的酵母单杂交体系中，COUP-TFII可以与hTERT启动子结合；得到了纯度高达98％的COUP-TFII融合蛋白，并且其结合于hTERT启动子-201～ 35区段，抑制HeLa细胞端粒酶的活性：从HeLa细胞核蛋白中分离到了2种与COUP-TFII相互作用的蛋白质．研究初步揭示了COUP-TFII在细胞分化和肿瘤转化过程中的参与途径和调控机制，为开启以端粒酶为靶目标的肿瘤治疗奠定了基础．     

基质金属蛋白酶的催化亚基

近几年来，分子生物学的迅速发展新药研究提供了理论基础，本以对基质金属蛋白酶催化业基的研究为例，说明将分子生物学应用地药物研究的一条途径，基质金属蛋白酶是一类参与结缔组织更新的蛋白水解酶与关节炎、肿瘤扩散转移，牙周炎等疾病有关，一些人的基质金属蛋白酶的催化亚基成功地在大肠杆菌中表达出现，用于用酶抑制剂的随机筛选、酶或酶与抑制复合物的三维结构测定，酶与其抑制剂相互作用的结构活性关系研究，为得到新一代     

端粒酶催化亚单位hTRT基因在人肝癌组织中的表达

目的：探讨人端粒酶催化亚单位hTRT基因在肝癌组织中的表迭情况．方法：用兔抗人端粒酶催化亚单位多克隆抗体作为一抗，生物素化羊抗兔IgG作为二抗，对肝癌组织石蜡切片采用免疫组织化学方法测定hTRT基因的表达．结果：30例肝癌组织中25例检出hTRT阳性(25／30)，正常肝组织无l例阳性．结论：免疫组织化学法检测hTRT敏感性高、特异性强、重复性好，较其他方法简便、快速、经济且无放射性核素污染等缺点，临床具有推广价值．     

"突触引物"实时荧光PCR检测端粒酶活性

为建立一种简便的端粒酶测定方法，首先采用高灵敏的核酸染料SYBR Gold染色代替放射自显影，建立了简便可靠的扩增产物显示方法，进而合成了端粒酶扩增产物的模拟产物，考察了突触引物检测的可行性和灵敏度。在此基础上，建立了检测端粒酶活性实时荧光PCR。由于突触引物可以有效的降低非特异性扩增，有效解决了端粒酶活性检测中的非特异产物干扰，为定量检测端粒酶活性打下了基础。