台湾海区斜带石斑鱼群体遗传学的等位酶研究

应用聚丙烯酰胺凝胶和淀粉凝胶技术对台湾海区斜带石斑鱼的遗传结构和遗传多样性水平进行了等位酶分析。对18种酶系统共27个等位酶基因座位的检测表明。ADH—l、ODH-2、FDH-1和Est-3等5个基因座位具多态性，其群体的多态位点百分率P为18．5％。有效等位基因平均数Ne为1．185，平均杂合度的观测值Ho为0．0469，预期值He为0．0662，反映了该群体的遗传多样性水平在鱼类中处于中等程度，而其Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)为-0．246，表明该群体仍存在着明显的杂合子缺失现象，相对于捕捞压力，海岸线的工程改造是对其资源的更主要威胁。     

斜带石斑鱼雌鱼卵巢发育与血清性类固醇激素的生殖周期变化

斜带石斑鱼Epinephelus caioides卵母细胞发育可分为6个时相，以卵母细胞在卵巢中组成的差异可以把卵巢发育划分为相应6个时期。测定了成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量的生殖周期变化，在生殖季节成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量最高。生殖季节成熟雌鱼的平均性腺成熟系数GSI显著高于其它月份，并且血清性类固醇激素水平的季节变化与性腺成熟系数的变化基本一致，都是在生殖季节达到最高峰。     

斜带石斑鱼染色体核型分析

采用PHA、秋水仙碱腹腔注射，肾细胞直接制片法分析了斜带石斑鱼染色体核型。结果表明，斜带石斑鱼核型为：2n=48=2sm 46t,臂数：NF=50．     

点带石斑鱼仔、稚、幼鱼的形态观察

根据点带石斑鱼胚后发育过程中卵黄囊的消失、鳍的形成、鳞片的出现等形态特征变化 ,参照国内外对硬骨鱼类胚后发育时期划分的一般方法 ,将点带石斑鱼的胚后发育划分为仔鱼期 (含卵黄囊期仔鱼和后期仔鱼 )、稚鱼期、幼鱼期 ,并对各个发育时期的形态特征进行了较为详细的描述 ,记录了各个发育时期的体长、体重的增长情况     

斜带石斑鱼血液性状及生化指标的研究

研究了斜带石斑鱼血液性状及血液生化指标,并对其幼鱼与成鱼、雌鱼与雄鱼的血液性状及生化指标进行了比较分析．结果表明,与其它的硬骨鱼类相比,斜带石斑鱼的血液性状指标处于较低的水平;斜带石斑鱼幼鱼的血细胞比容及血细胞数量低于成鱼,幼鱼与成鱼在血液生化指标方面存在着显著差异;而雌雄差异不明显．结果可作为斜带石斑鱼的正常生理常数参考值。     

点带石斑鱼人工配合饵料中蛋白质适宜含量的研究

设置4组配合饵料蛋白含量分别为48.23%、51.43%、54.09%和56.22%的试验组研究点带石斑鱼人工配合饵料中蛋白质的适宜含量.经过40 d的试验,得出饵料蛋白含量为51.43%的试验组的日均增重量为0.93±0.06 g.d-1、特定生长率为3.72%±0.12%d-1、饵料系数为0.54±0.01,蛋白质效率为363.0%±3.8%,均为最佳.经回归分析,点带石斑鱼人工配合饵料中蛋白质适宜含量为52.1%.     

斜带石斑鱼神经坏死病毒基因组RNA1和RNA2序列测定及分析

根据GenBank数据库公布的鱼类神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)同源序列设计了7对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出目的片断,将PCR产物测序和分析.斜带石斑鱼Epinephelus coioides神经坏死病毒(orange-spotted NNV,OGNNV)基因组由两个片断(RNA1和RNA2)组成,RNA1由3 103个核苷酸组成,含有一个开放阅读框,编码982个氨基酸;RNA2由1 433个核苷酸组成,含有一个开放阅读框,编码338个氨基酸.OGNNV基因组与新加坡GGNNV(greasy grouper NNV)的基因组有高度的相似性.分析病毒的RNA2序列发现:OGNNV与DGNNV(dragon grouper NNV)、RGNNV(redspotted NNV)和GGNNV的亲缘关系很近,并且具有相同的中和位点;分析病毒的RNA1序列,发现在OGNNV的RNA1序列中同样可以找到依赖RNA的RNA聚合酶的6个模序(motif).根据同源性比较和系统进化分析,OGNNV属于RGNNV血清型的成员.     

斜带石斑鱼TLR5S基因结构及功能分析

Toll样受体5(Toll-like receptor 5,TLR5)属于先天免疫系统中的一种模式识别受体(PRR),可分为可溶型和跨膜型2种.它可以识别病原体相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMP),从而启动信号转导.本研究从NCBI数据库中得到斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)可溶型TLR5(ECTLR5S)cDNA全长序列(Genbank登录号:GQ396667).其cDNA序列全长2 439bp,包括69bp的5′UTR,435bp的3′UTR和1 935bp的开放阅读框,共编码644个氨基酸,预测编码蛋白质分子质量为72.28ku,等电点为6.37.将ECTLR5S基因氨基酸序列与其他脊椎动物的TLR5S基因氨基酸序列进行比对,结果显示出很高的相似性,其中与牙鲆相似度可达69%.Real time PCR检测结果显示ECTLR5S基因在斜带石斑鱼不同器官中均有表达,其中在肝脏中的表达量最高,其次是脾脏、血淋巴、肾脏等.Realtime PCR检测ECTLR5S基因在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染3,6,12,24,48h后的肝脏中表达情况,结果显示ECTLR5S基因在3,6,12,24h时表达量显著上调(p<0.05),而在48h下降至初始水平.这些结果说明ECTLR5S基因可能参与到斜带石斑鱼抗弧菌感染的免疫反应中,并且肝脏是其发挥作用的重要器官.     

利用改良Nest—tetra—primerspecificPCR技术对两种石斑鱼的鉴别

云纹石斑鱼（Epinephelusmoara）和褐石斑鱼（E．bruneus）为石斑鱼属内近缘种,外形相似常被混淆．本研究改良建立了Nest—tetraprimerspecificPCR方法,获得了云纹石斑鱼和褐石斑鱼线粒体DNAND2基因内的3个特异性条带,分别为内参序列NCl（394bp）、特异性条带ND2-M（268bp）和ND2-B（122bp）,以及核基因组中核糖体DNAITS1区的5个特异性条带,分别为内参序列NC2（588bp）、NC3（563bp）,特异性条带rDNA—M（426bp）、ITS1-M（488bp）和ITS1-B（304bp）．研究结果不仅为两种石斑鱼的鉴别提供了稳定、可靠、快捷的特异性分子标记,而且也为鱼类近缘种的DNA鉴别提供了新的途径．     

厦门养殖石斑鱼两种贝尼登单殖吸虫记述

报道厦门海域网箱养殖的石斑鱼广泛流行感染的2种贝尼登单殖吸虫病原,它们是：康吉新贝尼登虫Neobenedeniella congeri(Yamaguti,1958)Yamaguti,1963和片卷涡异贝尼登虫Allobenedenia convoluta(Yamaguti,1937)Yamaguti,1963,均寄生于青石斑鱼（Epinephelus awoara)。这两种贝尼登虫均隶属于单殖吸虫目分室科（Capsalidae) 的贝尼登亚科（Benedeniinae)。对这2种贝尼登虫病原进行了形态记述和感染报道,并对这两种贝尼登虫病原在厦门海水养殖石斑鱼中的流行感染情况进行了简单介绍。