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多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性(SNP)的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成(5′-端引入错配或加入锁核苷酸(locked nucleic acid,LNA)),使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件(添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序)后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR(Tm difference asymmetric PCR,TDA-PCR)可有效提高单链DNA分子产率,降低引物设计难度,也扩大了模板序列的适用范围.此外,还针对禽流感病毒H5N1的血凝素(haemagglutinin)HA基因保守序列进行不对称扩增,用获得的单链DNA为模板进行焦磷酸测序检测,所得结果与参考序列一致且无明显干扰信号.因此,采用Tm值差异型不对称PCR可使焦磷酸测序等分子诊断流程更为简便,成本更低,效率更高,具有很好的通用性和实用性. 相似文献
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通过对血浆标本的核酸和血清学检测结果进行比较分析,探讨核酸检测(NAT)与酶联免疫吸附试验(ELISA)联合应用在血液筛查中的意义.研究从血浆样本中同时提取HBV、HIV和HCV核酸,采用荧光实时聚合酶链反应(PCR)进行检测,同步进行ELISA检测HBV、HIV和HCV抗原或抗体.在5 184份血浆标本中检测出HBV“窗口期”标本12份,检出率为0.23%;检测出HCV“窗口期”标本3份,检出率为0.058%;未检测出HIV“窗口期”标本.从而得出结论,核酸检测可以有效检测出血浆中的HBV、HIV和HCV的“窗口期”标本. 相似文献
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孟凡立 《中国新技术新产品精选》2009,(16):24-24
网络安全是一个涉及诸多学科的综合性的课题,涉及技术、管理、使用等许多方面,一种技术只能解决一方面的安全问题。随着网络及其应用的广泛发展,恶意代码的通过网络传播的途径越来越多,处理难度也越来越大。这就要求我们对网络攻击的行为有更进一步的研究,有针对性的建立防范安全策略,构建一个全面的、可靠的、高效的网络安全屏障来防御各种网络攻击。 相似文献
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艾对元 《兰州大学学报(自然科学版)》2009,45(Z1)
病毒基因组中的重复序列比率很低,因为其核酸序列大都是编码区域.如果出现一段同向对称或者是反向对称序列在病毒基因组中,它往往代表一个调控元件,或者是一个信号因子.我们总结了病毒中的一些对称序列,并阐明它的特点,分布及功能. 相似文献
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诺贝尔奖似乎都是颁给那些提出神秘科学理论的大科学家,其实从创立之初,诺贝尔奖的颁奖原则就是奖励为人类做出突出贡献的人。居里夫人的放射线让我们有了X光检查,爱因斯坦把我们引入了光电时代,艾滋病病毒的发现让我们可以有的放矢。今年的诺贝尔奖也不例外,从决定人体衰老和癌症发生的机制,到光纤通信和数码相机,再到维持机体正常运行的蛋白质的合成。原来,可以获得诺贝尔奖的大道理就在我们平平常常的日子里。 相似文献
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网络故障的现象总是多种多样,令人扑朔迷离。但究其原因,大抵不外乎以下几个层面的故障:一是物理层中物理设备相互连接失败或者硬件及线路本身的问题;二是数据链路层的网络设备的接口配置问题;三是网络层网络协议配置或操作错误;四是传输层的设备性能或通信拥塞问题;五是上三层或网络应用程序错误。而如今,随着黑客集 相似文献
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