稳定表达Cytoglobin的肝细胞株LO-2的建立及生长增殖的变化

目的:建立过表达细胞珠蛋白Cytoglobin(CYGB)的人肝细胞LO-2稳定株,初步探究CYGB对LO-2细胞生长增殖的影响.方法:采用PCR法扩增CYGB编码基因,并通过GATEWAY克隆技术构建慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB;酶切、测序鉴定后,与包装质粒三质粒共转人肾上皮细胞(HEK293T),收集、浓缩含病毒上清,获得病毒颗粒;感染LO-2细胞并采用流式细胞分选技术筛选稳定细胞株,Western blot检测表达情况;使用CCK-8试剂盒检测过表达CYGB对LO-2细胞增殖的影响,通过流式细胞技术检测过表达CYGB对LO-2细胞凋亡的影响.结果:慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB双酶切鉴定以及基因序列比对鉴定均正确.三质粒共转HEK293T细胞后,荧光显微镜下观察大部分细胞出现绿色荧光;收集病毒颗粒并感染LO-2细胞后,经流式细胞分选技术筛选获得稳定表达CYGB的细胞,Western blot鉴定显示,LO-2稳定株组的CYGB表达条带明显,阴性对照组未出现条带.CCK-8法绘制的细胞生长曲线显示,稳定表达细胞组的细胞生长速率低于阴性对...     

现有病毒疫苗用于防治新冠肺炎的可行性分析

新冠肺炎的爆发严重危害人类健康和公共卫生安全,已引起全球范围内的高度关注。预防病毒性疾病最有效的措施是接种疫苗,但是目前还没有专门针对新型冠状病毒的疫苗。考虑到疫情的严重性,对同为RNA病毒的流感病毒、其他冠状病毒相关疫苗的研究进行了综述,并通过对这些病毒氨基酸水平的序列比对发现,新冠病毒的棘突糖蛋白与H1N1、H3N2、B型Victoria系和B型Yamagata系流感病毒的血凝素糖蛋白之间具有一定的相似性。由于血凝素糖蛋白是目前商用流感疫苗的主要作用靶点,因此推测,现有季节性商用流感疫苗在新冠肺炎的防控方面可能也具有一定的应用潜能。除此之外,由于新冠病毒与SARS冠状病毒的棘突糖蛋白和核蛋白之间均具有高度的相似性,而SARS冠状病毒疫苗又主要从上述两种蛋白研制而来,因此建议在短期内,可以将目前正在研制的SARS冠状病毒疫苗作为新冠病毒特效疫苗的替代物来使用。     

利用多重PCR探究男性尖锐湿疣与HPV感染之间的相关性

本文的主要目的是建立一种针对人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus, HPV)检测的多重PCR方法,并利用这种方法探究男性尖锐湿疣与HPV感染之间的相关性.首先建立一种检测HPV的多重PCR方法,然后运用该方法对156例男性尖锐湿疣标本的HPV3种低危(HPV6,11,42)和6种高危(HPV16,18,33,52,56,58)亚型进行检测,并与反向膜杂交检测结果进行比较.结果156例标本中阳性标本数69例,占总标本数的44.23%,其中单一感染标本数48例,占69.57%,混合感染标本数     

生命是从哪里来的(四)

上期讲到,若想揭开生命起源之谜,就应该把眼光集中在地球历史的早期,去寻找那些最早的、最原始的生命是怎样产生的。生命是以非生命转化而来的吗著名英国生物学家达尔文的划时代巨著《物种起源》,使人们清晰地看到生命从简单到复杂、从低级向高级的发展历程。人们可以断言:现在的高等生     

今天,你刮胡子了吗

你有没有过这样的经历:站在镜子前,手里拿着老爸的剃须刀装模作样?哈哈,被我说中了!可是要等你的下巴上长出胡子,还得再过若干年呢。但——老爸刮胡子时一脸享受的画面在你脑海中不断回旋。终于,你抹掉镜子上的雾气,煞有介事地把一些剃须泡沫涂在脸上,开始刮……嗯,剃须刀在脸上滑     

通风报信的猪

一位农场主花了很多钱,买了一匹马。一个月后,这匹马突然病倒了。农场主请了一名兽医。兽医仔细检查一番,说：“您的马感染了一种危险的病毒,我给您开三天的药。三天后。我再来。如果还不好的话,只能把它处理掉。”     

刘爵 用分子生物学拦截动物病毒

在过去的十几年中,刘爵最主要的工作就是跟家禽、家畜疾病打交道,具体来说,就是运用先进的分子生物学方法找出对抗动物病毒的途径。在猪Ⅱ型圆环病毒感染、鸡传染性法氏囊病和禽脑脊髓炎等动物疾病研究方面取得突出成绩,多项原创性成果在国际权威病毒学刊物《Journal of Virology》、《Virology》刊发。     

利用蛋白质组学技术筛选与BIV基质蛋白MA相互作用蛋白

牛免疫缺陷病毒BIV的基质蛋白MA是由gag基因编码病毒结构蛋白之一,参与病毒运输包装等多种过程.通过蛋白质组学方法,寻找与MA有相互作用的宿主蛋白.通过原核表达MA-CBP融合蛋白,将其结合在几丁质上,并与细胞裂解物混合,纯化特异结合的细胞蛋白.利用双向电泳以及MALDI-TOF质谱分析,筛选到8个与MA具有相互作用的候选蛋白,功能涉及运输、氧化还原、热激反应等.进而克隆所鉴定蛋白之一的PRDX4,利用体外结合实验进一步证实其与BIV MA蛋白存在相互作用.初步建立利用蛋白质组学技术研究病毒与宿主相互作用实验方法,所得结果为了解慢病毒结构蛋白在病毒生活周期中功能提供了线索,有助于探索过氧化物酶家族蛋白在病毒感染过程中的作用及其分子机制.     

个人电脑如何防治计算机病毒

通过分析计算机病毒的定义、特点、分类等,识别计算机是否中毒,总结个人电脑如何防治计算机病毒。     

浅议校园网中ARP攻击及其防护措施

本文根据校园网的组网特点,从ARP原理出发,分析ARP攻击原理并根据ARP病毒攻击原理,分析容易产生的安全问题,并给出了有效的解决方案。