牛酪白基因导入大豆的研究

将带有牛酷蛋白基因ｃａｓｅｉｎＢ的植物表达载体ｐＡＳ－２,在大豆自花授粉后,用注射法导入大豆受精子房中。以质粒ｐＡＳ－２的３５Ｓ－Cａｓｅｉｎ-Ｇｕｓ扯段为模板,随机引物法标记探针,对１０３株受体植株后代的ＤＮＡ进行点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,发现其中１株在点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交中均呈阳性。证明外源基因已整合到大豆基因组中。     

基于Ohta和RGB颜色空间牛胴体背长肌的分割

提出了一种在Ohta和RGB颜色空间下牛肉胴体眼肌切面中背长肌的分割方法．在合适的光照条件下用CCD摄像头采集以黑色平板为背景的60幅眼肌切面RGB图像,根据R分量的灰度直方图,利用最大方差自动取阈值法（Ostu）去除黑色背景后用中值滤波平滑图像;将预处理后的图像转换到Ohta颜色空间对I3分量用Ostu分割肌肉像素,填充空洞后提取RGB图像对G分量用Ostu进一步去除背长肌和赘肉组织之间的连接,再进行空洞填充、面积阈值分割、数学形态学腐蚀和膨胀运算即可获得背长肌图像,分割的背长肌与人工勾划的背长肌的匹配度为92．36％～99．57％,处理时间在400ms以内．结果表明,结合使用两种颜色空间可以准确、快速地把背长肌从眼肌切面中分割出来．     

牛羊细粒棘球蚴病现场快速检测方法的建立及应用

建立了一种基于恒温隔绝PCR(Insulated isothermal PCR,ii PCR)技术现场检测牛羊包虫病的方法.结果显示,该方法只能检出细粒棘球绦虫,对多房棘球绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、前后盘吸虫、日本血吸虫、金黄色葡萄球菌、伪结核杆菌无关病原不检出;检测下限为100个拷贝,重复性好.对55份牦牛源包囊样本和70份羊源包囊样本的检出率分别为61.8和4.3%,与文献报道的检测方法的符合率分别为100%;本研究建立的ii PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,从核酸提取到报告检测结果仅需1小时,操作方便,可现场使用,为牛羊包虫病的现场快速诊断提供有力的工具.     

基于硅胶载体表面分子印迹聚合物对牛血清蛋白识别性能

以硅胶作为载体,丙烯酰胺和2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸为双功能单体,牛血清蛋白质作为模板分子,制备了牛血清蛋白表面分子印迹聚合物,并对其制备方法、性状和性质进行了检测。结果证明制备的分子印迹聚合物大小在400 nm左右,当功能单体的配比为5∶1时为最优配比,分子印迹聚合物对牛血清蛋白质的结合在60 min时达到平衡,并且在浓度为0. 6mg·m L~(-1)的情况下,结合率达到饱和。特异性检测可知分子印迹聚合物对牛血清蛋白的结合率最高并且其印迹因子(IF)高达1. 58,说明了它对目标蛋白具有良好的选择识别能力,且重复性能好,重复检测后吸附量在80%左右。     

牛α-乳清蛋白基因5′端非编码区单碱基多态性

综述了牛α－乳清蛋白的来源、功能及其基因非编码区单碱基多态性，并讨论了牛α－乳清蛋白基因非编码区（＋１５）单碱基多态性同泌乳性能的相关性     

牛病毒性腹泻病毒GSTZ株E1基因原核表达载体的构建及表达

为研究牛病毒性腹泻病毒的囊膜糖蛋白E1的抗原性,参考了Oregon C24V BVDV毒株的基因组序列(AF091605.1),并设计一对特异引物(上游引物5’-CCC GGA TCC ATG GCC TCT CCC TAC TGT-3’,下游引物5’-GGG CTC GAG TTA CCC TTG TGC TCC TGT T-3’),利用RT-PCR从病毒基因组中扩增E1基因609 bp全长片段,测序结果表明,与C24V株核苷酸同源性达100%.扩增产物经BamHI和XhoI双酶切,亚克隆至原核表达载体,双酶切鉴定表明成功构建了重组表达载体pET-32a(+)-E1.重组表达载体转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,经SDSPAGE和Western-blot检测,成功诱导表达出25ku E1蛋白.实验结果为进一步研究BVDVE1蛋白的功能提供了参考.     

牛结核病的现状及诊断研究进展

牛结核病被国际兽医局（OIE）列为B类动物疫病，是一种人兽共患传染病，其传播流行影响着畜牧业的持续发展和人类的健康。由于卡介苗（BCG）的使用，结核病的发病率比过去有所下降，但近年来由于艾滋病等其它原因，该病发病率又呈上升趋势，至今牛结核病所造成的损失大于牛的其它各种疾病所造成损失的总和。要从根本上控制牛结核病的发生与流行，必须加强对本病的研究，以便为控制和消灭牛结核病提供技术支持。     

白鹭和牛背鹭肠蛋白酶理化特性的研究

对白鹭(Egretta garzetta)和牛背鹭(Bubulcus ibis)雏鸟肠蛋白酶进行研究.两种鹭类的肠蛋白酶存在着许多共同的理化特性,包括分子量(39.4 kD)、等电点(5.4~7.5)、耐热性、抗冻融能力、最适温度(65℃)、最适 pH(9.0 和 8.6)等,而且两种鹭类的肠道蛋白酶对重金属离子Ag+和Hg2+、EDTA、或 Ca2+ 和 Mg2+ 的影响也表现出相同的反应.白鹭和牛背鹭的肠蛋白酶比活力存在着不显著的差异(1.63±0.62SE和 2.21±0.80SE)( 'P>0.05).白鹭和牛背鹭肠道蛋白酶为中性蛋白酶.活性中心的研究表明:两种鹭类的肠道蛋白酶的活性中心都含有色氨酸和丝氨酸残基,但是不含精氨酸、半胱氨酸和氨基,因此,主要为丝氨酸蛋白酶.     

牛病毒性腹泻病毒牦牛株E0基因生物信息学分析及原核表达与抗原性检测

为研究牦牛BVDV E0蛋白的生物信息学及抗原性, 本研究对本实验室克隆并测序的牦牛病毒性腹泻病毒E0基因进行了生物信息学分析;同时用含有酶切位点、起始密码子、终止密码子的引物重新扩增E0基因, 并连接PMD18-T载体, 经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后, 将获得的E0片段克隆至PET-28A原核表达载体, 构建重组质粒并转入JM109.酶切、质粒PCR鉴定正确后转入rosetta(DE3)菌进行诱导表达.经SDS-PAGE检测结果显示目的基因获得了较高的表达, 表达的融合蛋白约33ku, 经western-blotting检测表明目的蛋白具良好的有抗原性.     

科技博览

石墨烯在室温和普通光照下可产生电流美国麻省理工学院及哈佛大学的研究人员发现,石墨烯可以对光产生不同寻常的反应,在室温和普通光照射下,就可以发生热载流子效应,产生电流。这一发现不仅为石墨烯再添新奇属性,更有希望使其在太阳能电池、夜视系统、天文望远镜及半导体传感器等应用领域发挥作用。