重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究

对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化，并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明；温度30C，培养基pH6．0，当酵母密度达到200A600mm以上时，加入无水甲醇，控制甲醇的流加体积，使其终体积分数为1．0％～3．O％，继续诱导培养72h左右，酵母菌密度可达到150g／L，重组肠激酶总活性可达58kIU／L发酵液。     

Inhibitory effect of the adenovirus type 5 E1A protein expressed in the yeast system of the human tumor cell growth

Adenovirus 5 type E1A as a tumor suppressor gene can inhibit tumor growth and enhance the censitivity of chemotherapy and radiotherapy.E1A have the ability to integrate into the host genome,resulting in long-time expres-sion that induces Rb gene inactivation and animal cells im-mortalization.This prompted us to select the E1A protein for treatment of cancer in order to overcome the limitations of E1A gene therapy.Thus,we firstly comstructed E1A eu-caryotic expression vector (pPIC9/E1A),transformated the pichia pastoris yeast cells(GS115) and screened the high-expressing recombinant strains.The positive yeast strains were cultured in the shake flask,and induced for 3d.The crude E1A protein was purified using two steps of col-umu chromatography on HiTrap Q and HiTrap SP.The pu-rified E1A protein was identified by SDS-PAGE and Western blot.E1A protein was mostly located at cellular unclear when Cheriot delivered E1A protein into cells.The analysis in vitro indicated that the E1A protein arrested LN686 cell cycle at G2/M phase,and significantly inhibited the growth of LN686 tumor cells.The current studies firstly provided an experimental basis to further develop E1A protein for tumor treatment.     

日本棘叶绦虫生活史早期发育阶段的观察

选择寄生于刺鲳中的日本棘叶绦虫(Echinophallus ja ponicus)(假叶目；棘叶科)作为研究对象，对其生活史早期发育阶段进行了观察。通过对成虫子宫中虫卵及体外培养虫卵的观察发现．其虫卵为完全卵裂、胚胎发育的主要过程在子宫外完成，为体外发育．     

以啤酒洗槽废水为主料产朊圆酵母液体发酵的研究

以啤酒洗槽废水为主料通过单因素优选和正交试验法对产朊圆酵母进行液体发酵培养基的筛选与发酵条件的确定，经方差分析结果最佳培养基为2^oBe糖度的啤酒洗槽废水，豆饼粉0.5%,葡萄糖2％，MgSOr.7H2O0.05%,KH2PO40.1%。最佳发酵条件为时间18h，温度28℃，转数150r/min，装量100mL/250mL三角瓶，pH5.0。干菌体系累量为20.12g/L。     

双孢蘑菇酵母菌病害药剂试验

假丝酵母菌(Candida sp．)、酵母菌(Saccharomyces sp．)是稻田栽培双孢蘑菇(Agaricus bisporus)中的一类新病原菌。描述了病原菌的形态特征、致病症状，作了实验室药敏试验。试验表明：克霉灵、灭菌威、甲醛等药剂可有效杀灭病原菌。     

番茄早疫病拮抗菌酵母的筛选

从几种果实表面附生微生物群中分离到120株酵母菌.通过平板筛选法(invitro),筛选出11株酵母菌对番茄早疫病(Alternariasolani)有拮抗作用.等体积混菌试验表明,11株酵母菌中有7株酵母菌,浓度为106、107和108CFU·ml-1时,能完全抑制105、104、103spores·ml-13种浓度的交链孢霉生长.通过果实接种试验法(invi vo)发现,酵母菌菌株L-1-6能够高度抑制3个品种番茄早疫病的发生,平均抑制率达到77.8%.     

水稻纹枯病菌人工接种方法的研究

对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AGI-IA)7种人工接种方法进行试验，首次评价了各自优缺点．结果认为：“稻秆离体接种法”是比较理想的人工方法，其特点是快速、简便、发病速度适中、病情调查方便，病原菌容易控制．其次是盆栽苗接种法、叶片离体接种法，菌丝悬浮液较差。     

重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达

目的：在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽，方法：用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒，电打孔法导入毕赤酵母GS115后，在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子，然后根据甲醇利用快速型（Mut^ ）和甲醇利用缓慢型(Mut^s）菌株的不同生长特点，筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子，用PCR法进一步鉴定阳性克隆，分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d，取培养产物冻干浓缩，进行SDS-PAGE和Western blotting，筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株，分析蛋白的含量及纯度。结果：重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达，其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%，结论：重组人巨细胞病毒（HCMV）嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。     

登陆广东热带气旋统计及个例的对比分析

热带气旋造成的危害与其登陆时强度、登陆点及登陆后维持的时间长短有直接关系。根据1949—1988年《台风年鉴》和1989—2001年《热带气旋年鉴》的资料，对登陆广东沿岸的热带气旋作了登陆点及登陆后维持时间等的分类统计。另外，在统计分析的基础上，选取了一对登陆月份、登陆时强度、登陆地点相近，但登陆后维持时间不同的台风——9309号和9908号热带气旋进行对比分析。结果表明，季风槽、副高的活动、西南季风的活跃程度、准静止锋云系的发展，以及高空辐散场的建立对热带气旋登陆后的水汽输送和维持时间长短有重要影响。     

饵料及日采收率对蒙古裸腹溞培养效果的影响

~~饵料及日采收率对蒙古裸腹溞培养效果的影响@史海东$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @辛俭$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @王海岳$岱山县岱西镇人民政府!浙江岱山316200 @毛国民$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @姚海富$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100~~~~~~浙江省科技厅科研计划项目(021102111)…