SDS-PAGE法分析蜂蜜中蛋白质组分的条件优化

本文从分离胶浓度、凝胶厚度和点样量方面对SDS-PAGE电泳法进行优化,探究最适合蜂蜜蛋白质分析的SDS-PAGE电泳条件,证明SDS-PAGE电泳法分析蛋白组学的可靠性,为蜂蜜新鲜度和真实性的鉴别提供参考依据。     

利用PCR-DGGE技术分析微生态制剂在传代过程中的菌群变化

利用变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE）技术,结合传统平板培养法对实验室研制的1种由乳酸菌和芽孢杆菌组成的微生态菌剂WS-401及其在连续转接培养过程中细菌种群组成的动态变化进行分析。WS-401原液的活菌数为2×107 cfu/mL,且细胞个体形态多样。将分离自原液的3株细菌进行DGGE分析,出现2种指纹谱带,对照标准的DGGE指纹图谱库和序列分析,分别被鉴定为蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）。将该菌剂分别在LB和MRS两种培养基中30℃或37℃连续转接5次,DGGE分析每次转接后培养物的菌群组成,结果发现,随着转接次数的增加,微生物菌群的种类减少,在LB培养基中转接5次后优势菌群只有蜡状芽胞杆菌,而在MRS培养基中转接后优势菌群为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和类干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）。由此说明,微生物的营养基质和培养条件对微生态制剂在传代过程中的菌群组成和动态变化有重要影响。     

人肝癌细胞系BEL-7404和正常肝细胞系L-02表达的蛋白质组双向凝胶电泳分析

蛋白质组分析技术已在生物科学各领域被广泛应用,也是功能基因组研究的重要组成部分．通过对人ＢＥＬ－７４０４肝癌细胞系和Ｌ－０２正常肝细胞系表达的蛋白质组ＩＰＧ－ＤＡＬＴ双向凝胶电泳和图象分析,发现７个蛋白点只在肝癌细胞中检测到表达,１４个点只在肝细胞中检测到表达,７８个蛋白点在两种细胞中表达量上有显著变化（Ｐ＜０．０１）．两种细胞蛋白质组表达反映在差异表达谱上．双向电泳重复性分析表明 ＩＥＦ方向平均位置偏差为０．７３ ｍｍ, ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方向为０．４４ｍｍ,量的变异为１７．６％一１９．２％．双向电泳的重复性已适合于蛋白质组差异表达的研究,蛋白质组差异表达谱可成为疾病诊断、药物作用分析和生命过程等研究的有用工具．     

温度梯度作用下非饱和黄土水分运移规律

土体内部含水率受蒸发作用影响,呈现动态变化,土体水分丢失过多会引起干缩裂隙,强度随之降低.为探究温度梯度作用下兰州地区非饱和黄土水分运移规律,采用HYDRUS-1D软件建立数学模型,在温度梯度作用下进行数值计算及分析.结果表明:在不同温度梯度作用下,24 h内土体内部温度变化表现为快速升温、缓慢升温和相对稳定,24 h...     

三种两栖动物的乳酸脱氢酶同工酶的比较

本文作者采用平板聚丙稀酰胺凝胶电泳技术,分析研究了黑眶蟾蜍(Bufo melanostictusSchneider)沼蛙(Rana guentheri Boulenger)花狭口蛙(Kaloula pulchra Gray)三种两栖动物的心脏、肾脏、脑、骨骼肌、眼晶体、脾脏、肝脏等七种组织的特异性,表明这种差异是稳定的.黑眶蟾蜍和沼蛙的LDH(1,1,27)同工酶谱由1—5条酶带组成,花狭口蛙的LDH(1,1,1,27)同工酶基本上只由一条酶带组成.     

温度梯度下压实黏土的水热迁移规律和渗透特性

开展了室内压实黏土体模型柱试验,研究了温度梯度作用对压实黏土水热迁移和渗透性的响应规律.结果表明:热量在黏土柱下部比黏土柱上部传输快,温度的升高随离热源距离的增加而明显延迟;底部热源促使压实黏土柱产生温度梯度,进而促使水汽在黏土柱内由底向上迁移,造成水分损失较快;随热源的持续作用,黏土柱内温度梯度逐渐下降,水汽迁移速率减小,含水率下降缓慢并趋于稳定.热源持续作用使土柱上表面开裂程度明显大于下底面,用示踪剂来粗略测量裂缝深度是可行的.温度梯度作用不同程度地增大了黏土体的渗透系数,且黏土柱的两端渗透系数增加较快,中间部分增大倍数次之.     

绿草履虫Paramecium bursaria大核染色质组份和组蛋白的研究

绿草履虫P.bursaria是在接有产气杆菌Aerobacter aerogems的无菌稻草提取液中进行克隆培养后取得的。在非离子去污剂NP-40(含有二价阳离子Ca~(2 ),Mg~(2 ))的溶液中裂解细胞,经蔗糖梯度离心分离、提纯细胞大核,并制备染色质,测定其中组蛋白、非组蛋白、DNA和RNA的相对含量。用稀酸抽提绿草履虫大核和大核染色质,得到的酸溶性蛋白(即组蛋白),经PAGE、SDS-PAGE、PAGIF和氨基酸分析等方法测定。得到的结果是:绿草履虫大核染色质中DNA:RNA:组蛋白:非组蛋白=1:0.02:1.30:0.59;组蛋白占染色质蛋白质的68.8％;大核和大核染色质的酸溶性蛋白是相同的,都具有相当于高等动物的全组蛋白的五条组蛋白带,只在其相对含量及电泳迁移率上,与高等动物的全组蛋白略有差别;由16种氨基酸组成,20％是酸性氨基酸,不存在色氨酸和半胱氨酸;五条蛋白带的分子量为1.1000～21000道尔顿,也类似于哺乳动物细胞组蛋白;这是一类碱性很弱的蛋白质,等电点为pH8.02～9.4;碱性氨基酸和酸性氨基酸的比为1.03:1,这一点却更接近酵母全组蛋白。     

绿草履虫Parameciumbursaria大核染色质组份和组蛋白的研究

绿草履虫P.bursaria是在接有产气杆菌Aerobacter aerogenes的无菌稻草提取液中进行克隆培养后取得的.在非离子去污剂NP-40(含有二价阳离子Ca~(2+),Mg~(2+))的溶液中裂解细胞,经蔗糖梯度离心分离、提纯细胞大核,并制备染色质,测定其中组蛋白、非组蛋白、DNA和RNA的相对含量.用稀酸抽提绿草履虫大核和大核染色质,得到的酸溶性蛋白(即组蛋白),经PAGE、SDS-PAGE、PAGIF和氨基酸分析等方法测定.得到的结果是:绿草履虫大核染色质中DNA:RNA∶组蛋白∶非组蛋白=1∶0.02∶1.30∶0.59;组蛋白占染色质蛋白质的68.8%;大核和大核染色质的酸溶性蛋白是相同的,都具有相当于高等动物的全组蛋白的五条组蛋白带,只在其相对含量及电泳迁移率上,与高等动物的全组蛋白略有差别;由16种氨基酸组成,20%是酸性氨基酸,不存在色氨酸和半胱氨酸;五条蛋白带的分子量为11000～21000道尔顿,也类似于哺乳动物细胞组蛋白;这是一类碱性很弱的蛋白质,等电点为pH 8.02～9.4;碱性氨基酸和酸性氨基酸的比为1.03∶1,这一点却更接近酵母全组蛋白.     

核容器环带区裂缝热荷载下的应力强度因子

计算了核容器环带区裂缝在热梯度荷载下的应力强度因子（ＳＩＦ）．结果是可靠的。 证实了快速变化温度场下的应力强度因子较稳态时为低的论断，并对可能出现的稳态温 度场进行ＳＩＦ的计算考查，确定了环带区最大假想裂缝在热荷载下的ＳＩＦ上限值， 这对核容器的缺陷评定有重要意义，扩大了评定公式的使用范围。文章指出：焊接研究 委员会第 １７５号公报（ＷＲＣ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ １７５／Ａｕｅｕｓｔ，１９７２）中所给的热梯度应力强度因 子的近似公式是错误的．     

低剂量辐射后小鼠骨髓造血干、祖细胞的蛋白质组学研究

本文利用双向凝胶电泳方法建立低剂量辐射后不同时间点小鼠骨髓造血干、祖细胞与相应假照组细胞蛋白质组二维凝胶电泳图谱,用图像分析软件分析照射组与假照组差异表达蛋白,并利用MALDI-TOF-MS生物质谱对差异蛋白质进行鉴定分析.结果表明低剂量辐射后骨髓造血干、祖细胞中表达上调的蛋白26个,表达下调的蛋白4个,消失的蛋白4个.其中碳酸酐酶II、蛋白二硫键异构酶、层粘连蛋白受体、嘌呤核苷磷酸化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、氯化琥珀胆碱细胞内信号通道蛋白、中心体肌动蛋白-α、磷酸葡萄糖脱氢酶、原纤维蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂等22种蛋白被鉴定出来.研究表明低剂量辐射使骨髓造血干、祖细胞某些蛋白表达上调或下调,并鉴定出与低剂量辐射作用机制相关的蛋白质.从新的视角探讨了低剂量辐射对造血系统的作用机制,同时也为低剂量辐射作用机制的研究提供了一种新的有效的研究手段.