Two virus-encoded RNA silencing suppressors, P14 of Beet necrotic yellow vein virus and S6 of Rice black streak dwarf virus

Functional analysis for gene silencing suppressor of P14 gene of Beet necrotic yellow vein virus and S6 gene of Rice black streak dwarf virus was carried out by agro- infiltration with recombinant vectors of Potato virus X. The phenotype observation of green fluorescent protein (GFP)expression and Northern blot showed that the gene silencing of gfp transgenic Nicotiana benthamiana induced by homologous sequence was strongly suppressed by the immixture infiltration of either the P14 or the $6. In the suppressed plants, the gfp mRNA accumulation was higher than that in the non-suppressed controls and the symptoms caused by PVX infection became more severe, especially the gfp DNA methylation of plant genome was significantly inhabited when co-infiltrated with RBSDV S6 gene. These results suggested that these two virus genes were potentially to encode for proteins as RNA silencing suppressors.     

对虾白斑综合征病毒(WSSV)基因组细菌双杂交系统的构建

细菌双杂交系统是新近建立的一种研究蛋白质间相互作用的方法.应用细菌双杂交系统,分别以pBT、pTRG诱饵质粒构建编码WSSV基因组DNA随机片段的融合表达质粒pBT-wssv、pTRG-wssv.重组质粒共转化双杂交报告菌株XLl-Blue MRF′,通过LB-TCK平板筛选对虾白斑综合征病毒中有相互作用的蛋白质.本研究中我们构建了WSSV基因组细菌双杂交系统,用于筛选WSSV中有相互作用的蛋白,为该病毒功能基因组的研究打下良好的基础.     

阿德福韦抗乙肝病毒感染治疗动力学模型

基于阿德福韦(Adefovir dipivoxil)与安慰剂治疗180余位HBeAg阴性的慢性乙型肝炎(CHB)患者国际联合研究的临床数据,以及Nowak等人提出的不带效应细胞的乙肝病毒(HBV)感染模型,提出了一个由两个系统组成的数学模型, 模型对CHB患者的阿德福韦治疗效果提供了一种可能的解释, 特别是可以解释为什么患者血浆中病毒数目在停止免疫治疗后会迅速反弹. 该模型对长期的疗效做出预测:血清HBV DNA接近中位数的患者需要延长治疗时间到5.6 a,以清除CHB患者体内的HBV. 本研究提示:将血清DNA小于500 copies·mL-1作为评价疗效的标准过于粗糙.     

研制安全病毒疫苗

主要研究内容 早期生产小儿脊髓灰质炎病毒疫苗所用猴肾原代细胞曾发生SV40病毒传播,近年患者使用人脑垂体制备的人生长激素曾传播疯牛病,人类输血及使用血源产品曾传播艾滋病病毒.诸如此类的报道近年在媒体并不鲜见,人们不禁对使用原代细胞的安全性问题产生了担忧.自人类二倍体细胞(HDC)成功用作病毒活疫苗细胞培养基质以来,异种动物传代细胞系(CCL)用作生物制品及生物工程产品细胞培养基质的重要性进一步显示出来,它必将加快传代细胞系用作病毒活疫苗培养基质的步伐.     

朊蛋白构象变化机制的初步探讨

PrP^c的二级结构发生变化导致部分α－螺旋转变为β－折叠而产生PrP^sc，是导致神经退行性疾病的主要原因。蛋白质多肽链被氧化损伤为自由基，其二级结构发生变化，我们通过量子化学方法b3lyp/6-3lg^**计算出抽氢反应的焓变，以此确定氧化损伤的位点和构象的变化。计算发现，Cα-H键的断裂焓（BDE）较小，易抽氢，且形成的Cα－H自由基导致二面角Φ和Ψ发生明显的变化。这对于解释朊病毒的致病机理和错误折叠很有意义。     

病毒微生物农药生产新工艺

本文综述了病毒微生物农药生产的新工艺,即应用昆虫培养细胞产生病毒微生物农药。同时还介绍了昆虫细胞培养基、培养方法和核多角体病毒生产的工艺过程。也指出应用昆虫培养细胞生产病毒存在的问题。     

微机病毒与防范技术

本文阐述了计算机病毒的原理,综述了传统的计算机病毒防护方法,同时介绍了一些新的防护理论及方法.     

具有AAV载体包装功能的重组HSV的产生

腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）载体有望成为理想的基因治疗载体,常规的共转染法难以大规模制备重组ＡＡＶ（ｒＡＡＶ）,本研究生产了一种具有ｒＡＡＶ包装功能的重组单纯疱疹病毒（ｒＨＳＶ）,为ｒＡＡＶ的大规模制备提供了新的思路。采用一套含有１型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－１）全基因组的粘粒系统（Ｄａｖｉｓｏｎ ＡＪ ｅｔ ａｌ,１９９３）,该系统含有５个粘粒,依次称为ｃｏｓ４８,ｃｏｓ２８,ｃｏｓ６,ｃｏｓ１４和ｃｓ