全文获取类型
收费全文 | 1078篇 |
免费 | 33篇 |
国内免费 | 97篇 |
专业分类
系统科学 | 1篇 |
丛书文集 | 24篇 |
教育与普及 | 234篇 |
理论与方法论 | 15篇 |
现状及发展 | 11篇 |
综合类 | 923篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 23篇 |
2022年 | 14篇 |
2021年 | 29篇 |
2020年 | 23篇 |
2019年 | 27篇 |
2018年 | 10篇 |
2017年 | 9篇 |
2016年 | 9篇 |
2015年 | 25篇 |
2014年 | 69篇 |
2013年 | 50篇 |
2012年 | 51篇 |
2011年 | 56篇 |
2010年 | 63篇 |
2009年 | 51篇 |
2008年 | 63篇 |
2007年 | 59篇 |
2006年 | 45篇 |
2005年 | 50篇 |
2004年 | 51篇 |
2003年 | 50篇 |
2002年 | 45篇 |
2001年 | 43篇 |
2000年 | 34篇 |
1999年 | 35篇 |
1998年 | 40篇 |
1997年 | 35篇 |
1996年 | 19篇 |
1995年 | 33篇 |
1994年 | 34篇 |
1993年 | 10篇 |
1992年 | 18篇 |
1991年 | 9篇 |
1990年 | 12篇 |
1989年 | 9篇 |
1988年 | 2篇 |
排序方式: 共有1208条查询结果,搜索用时 62 毫秒
81.
败血症休克多伴有不同程度的心功能障碍,严重影响休克的转归和预后,其发生机理至今尚未阐明.有研究表明,休克时心功能障碍与心肌细胞钙稳态失衡有关.心肌肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)是调节胞浆游离钙浓度的重要细胞器,它通过快速摄取和释放Ca~(2+)对心肌舒缩活动产生重要影响.本工作选用大鼠腹膜炎败血症休克模型,应用蔗糖密度梯度离心法制备大鼠心肌SR膜,观察休克不同阶段心功能以及SR钙摄取和钙释放功能的变化,探讨心肌SR钙转运功能变化在心功能障碍中的发病学意义. 相似文献
82.
N端和C端结构对TNF与受体亲和力的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是具有多种生物学活性的细胞因子,它对肿瘤组织和细胞的特异杀伤作用使人们对其用于临床抗肿瘤治疗寄予很大希望.但是临床试验表明,重组天然人TNF(hTNF)的毒副作用很大,限制了它的使用剂量,从而也影响了它的抗肿瘤效果.因此,进一步提高TNF的抗肿瘤活性,降低其毒副作用,是将TNF广泛用于临床治疗的前提.为此,我们应用基因工程手段对TNF分子的结构进行了改造,构建了3种新型 相似文献
83.
84.
外源性生长激素对改善腹腔感染时生长激素不敏感状态中的作用 总被引:1,自引:1,他引:0
探索了外源性生长激素对改善腹腔感染时生长激素不敏感中的作用。应用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备腹腔感染大鼠模型,同时给予外源性生长激素;应用放射免疫法测定血清生长激素(GH)水平;应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定肝组织胰岛素样生长因子I(IGF-I)、生长激素受体(GHR)和细胞因子信号传导抑制体3(SOCS-3)mRNA的表达;应用ELISA测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平。结果表明腹腔感染组大鼠血清生长激素水平与对照组无明显差异,但肝组织IGF-ImRNA表达明显下降;给予外源性生长激素后可明显降低血清TNF-α和IL-6水平,同时可更快地促使GHR和IGF-ImRNA表达的上调及下调SOCS-3mRNA的表达。腹腔感染时机体存在对生长激素的不敏感状态,给予外源性生长激素后可明显地改善感染状态下机体对生长激素的敏感性。 相似文献
85.
用杂交瘤技术建立抗KDRFc的杂交瘤细胞系,以KDRFc抗原免疫雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA间接法检测和有限稀释法克隆培养,再经稳定性检测、效价检测,筛选出分泌抗KDRFc单克隆抗体的杂交瘤细胞.得到了10株能持续分泌抗KDRFc的单克隆抗体的细胞株,其中3株分泌的单抗具有较高的生物活性、特异性和稳定性. 相似文献
86.
洪宗元 《安徽师范大学学报(自然科学版)》2005,(3)
在乙谜麻醉下,分别于明时(8:00 a.m.)及暗时(8:00 p.m.)断头处死野生型及组胺H1R基因敲除型小鼠,迅速取出脑组织并分离出皮层、纹状体、海马、下丘脑、丘脑、中脑及脑干等脑区.这些脑组织被制成匀浆并用HPLC荧光检测法测量其组胺含量.结果显示暗时处死时,H1R基因敲除型小鼠海马、丘脑、中脑及脑干中的组胺含量明显低于野生型小鼠.明时处死时,野生型小鼠各脑区组胺含量均较暗时处死显著降低,但这一变化在H1R基因敲除型小鼠中并未观察到.这些表明作为组胺的功能靶,H1R不仅介导组胺的功能,而且调节大脑中组胺含量与释放的昼夜节律. 相似文献
87.
目的克隆并在大肠杆菌中表达编码炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,简称ATR)的胞外区基因。方法收集CHO-K1细胞,提取其总RNA,经反转录成单链cDNA,以此为模板PCR扩增出编码ATR胞外区基因,将该基因克隆入载体pUC19中,测序正确后,亚克隆入表达载体pMal-c2x中进行表达。结果利用所设计的引物扩增出完整的编码ATR胞外区基因。以大肠杆菌为宿主在IPTG的诱导下获得表达,激光薄层扫描显示表达蛋白占总蛋白的39%。结论获得了编码ATR胞外区基因cDNA及其原核表达产物,为进一步研究炭疽毒素致病机理和炭疽病的防治奠定了基础。 相似文献
88.
应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域. 序列分析表明:无论在基因水平还是蛋白质水平,鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性. 用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现:肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100bp),测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97bp的内含子选择性剪切造成的. 而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的,且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致. 鲤鱼GHR两种转录子的出现,系转录时发生拼接变化所致,推测是一种与发育有关的机制. 采用半定量RT-PCR方法分析组织相对表达水平,结果显示:GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼. 相似文献
89.
90.
Construction and anti-tumor effects of recombinant fowlpox virus expressing Newcastle disease virus hemagglutinin-neuramidinase gene 总被引:4,自引:0,他引:4
LI Xiao JIN Ningyi LIAN Hai GUAN Goufang SUN Lili LI Xue mei ZHENG Hongling 《科学通报(英文版)》2006,51(22):2724-2730
Hemagglutinin-neuramidinase (HN), a Newcastle disease virus-derived protein, not only mediates receptor recognition but also possesses neuraminidase (NA) activity, the ability to cleave a component of those receptors, N-acetylneuraminic acid (NAcneu, sialic acid). It is known that this protein in mammalian species, including human beings, has interesting anti-neoplastic as well as immune stimulating properties. To explore the use of the HN gene in cancer gene therapy, we constructed a recombi-nant fowlpox virus expressing the HN protein (vFV-HN) and compared the anti-tumor activity of the recombinant virus with that of wild-type fowlpox virus (FPV) in vivo and in vitro. Here we found that although B16 cells were somewhat resistant to the basal cytotoxic effect of wild-type fowlpox virus, infection with vFV-HN caused a pronounced cytotoxic effect and, the survival of tumor-bearing mice immunized with vFV-HN was significantly increased compared with the survival of mice immunized with the FPV alone. Furthermore, the immunization of mice with vFV-HN elicited a B16 tumor-specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) response and clonal expansion of both CD4 and CD8 T cell populations in vivo. In addition, T cells from lymph nodes of mice vaccinated with vFV-HN secreted high levels of the Th1 cytokine IL-2 and IFN-γ, indicating that the regression of tumor cells is related to a Th1-type dominant immune response. These results demonstrate that vaccination with vFV-HN may be a potential strategy for cancer gene therapy. 相似文献