丹参提取物对氧化衰老模型小鼠的免疫保护作用

采用小鼠氧化衰老模型探讨丹参提取物的免疫保护作用及抗氧化作用 .用小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验检测免疫细胞的功能状态 ;用免疫组化法和HE染色观察胸腺的氧化情况及形态学变化 ;用流式细胞仪检测细胞表面CD2 8分子及其他分子的变化 ,来探讨免疫分子的变化情况 .结果表明丹参提取物能明显恢复由氧化应激造成的免疫功能低下状态 .淋巴细胞增殖功能得到了明显改善 .胸腺内核酸氧化产物 8-OHdG染色阳性细胞明显减少 ,胸腺皮质恢复良好 .免疫细胞表面CD2 8分子明显增加 ,CD4阳性细胞也明显增多     

弯斑蛸多糖纯化及对小鼠脾细胞增殖的影响

将弯斑蛸粗多糖COG经精制得POG,再通过离子交换和凝胶柱层析纯化,经化学法和红外光谱确定主要组成和结构特征,用MTT比色法测定脾细胞的增殖.结果表明:柱层析得到的POGⅠ、POGⅡ和POGⅠ-1总糖含量在26.3%~42.2%之间,总糖胺聚糖含量均高于30%,葡萄糖醛酸含量接近20%,红外光谱提示均具有典型的糖胺聚糖特征;各多糖对小鼠脾细胞增殖均有明显的促进作用,纯度最高的POGⅠ-1促进作用最强.该弯斑蛸多糖为氨基己糖和葡萄糖醛酸组成的多糖,具有增强免疫作用.     

铜绿假单胞菌外膜亚蛋白质组图谱的建立

铜绿假单胞菌是人类重要的病原菌,容易造成免疫缺陷患者如烧伤、艾滋病、癌症或囊性纤维化感染,对该菌外膜蛋白的研究有助于了解该菌的致病机制,为进一步疫苗研制奠定基础.采用月桂酰基氨酸钠的方法提取了铜绿假单胞菌的外膜蛋白,首次建立了外膜亚蛋白质组学表达图谱,鉴定了23个外膜蛋白,占所鉴定蛋白的82.1%.然后对其中的一个外膜蛋白基因PA3988进行了克隆及原核表达与纯化,经免疫小鼠获得抗血清后对外膜蛋白进行双向Western blotting分析,验证了质谱的结果.这些研究结果对铜绿假单胞菌外膜蛋白的深入研究具有积极作用.     

小鼠精子捕获外源DNA的研究

随着遗传工程研究的发展,现今已有多种方法实现外源基因向受体细胞的转移。较常用的方法有显微注射法和反转录病毒载体等方法。但晚近Lavitrano等报道用精子作为外源DNA的载体可以生产转基因动物。这一报道引起了国内外学者的广泛关注。一些作者试图重复这一实验,但至今还没有成功的报道。虽然如此,至今并不能排除精子作为外源DNA的载体的可能性。对这一问题的研究,至少具有以下三方面的意义。第     

小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达

以小鼠乳清酸蛋白基因 (mWAP)调控区与人促红细胞生成素基因 (hEPO)构建融合基因 ,经动物个体暂态表达方法确证hEPO可在乳腺特异表达后 ,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵 ,再将受精卵移植到假孕小鼠 ,获得 86只G0 代小鼠 ,经PCR Southernblot及Southernblot证实 ,有 5 8只整合阳性小鼠 ,整合率为 6 7% ,ELISAkit,dotELISA等方法检测小鼠39只 ,有 1 6只表达阳性 ,乳汁中人hEPO的表达量高于 1 5 μg/mL .     

血小板生成素Ⅱ体内生物活性研究

目的：探讨血小板生成素受体的两种新配体－－血小板生成素Ⅱ（TPOⅡ）在体内的生物学活性。方法：以Babl/c纯系小鼠为实验对象，通过腹腔连续7d分组注射提纯的TPOⅡ配体Ⅰ、人工合成的TPOⅡ配体Ⅱ及重组的人血小板生成素，并于第7d末测定小鼠外周血小板数量，分析TPOⅡ体内的生物学活性。结果：在实验第7d，TPOⅡ配体Ⅰ实验组小鼠外周血小板数明显高于同期阴性对照组（P＜0.05），与rhTPO阳性对照组相弱则无明显差异（P＞0.05）；第14d，TPOⅡ的两个实验组的血小板数均较同期阴性对照组明显升高（P＜0.01）；与阳性对照组相比亦无明显差异（P＞0.05）。而且随实验时间的延长，TPOⅡ实验组及阳性对照组血小板数均呈升高趋势。结论：提纯的TPOⅡ配体Ⅰ促进小鼠外周血小板的产生，其升高血小板的能力与rhT-PO无明显差别。     

化疗性静脉炎小鼠模型的建立

目的通过静脉注射氟尿嘧啶建立稳定有效的化疗性静脉炎小鼠模型。方法 42只昆明小鼠按照给药浓度随机分为7.5 mg/mL、10.0 mg/mL、12.5 mg/mL,15.0 mg/mL、17.5 mg/mL和22.5 mg/mL共6个实验组和1个对照组。实验组小鼠分别从左侧鼠尾静脉注射0.4 mL不同浓度的氟尿嘧啶溶液,对照组注射0.4mL的生理盐水。给药后第3 d对化疗性静脉炎表现进行分级评价后处死。制作石蜡切片并进行镜下分级。结果随注射氟尿嘧啶剂量的增加,小鼠静脉炎发生率也逐渐增高,350 mg/kg(17.5 mg/mL组)以上剂量组动物出现中毒死亡。300 mg/kg(15.0 mg/mL)剂量组化疗性静脉炎发生率达100%,无动物死亡,出现典型的静脉炎症状,对照组未出现类似变化。结论通过小鼠尾静脉注射300 mg/kg～350 mg/kg剂量范围的氟尿嘧啶可成功建立稳定有效的化疗性静脉炎小鼠模型。     

BALB／c突变无毛小鼠血清IgG含量的测定

对本中心发现并培育成群的一种新的BALB／c突变无毛小鼠血清IgG含量进行测定，同时与其它二种表型进行比较。结果表明，小鼠IgG含量随日龄的增大而增大，雌雄间无显著性差异。1月龄无毛小鼠IgG含量低于其它两种表型，但2－3月龄间无差异，表明该突变未引起成年小鼠正常血清IgG含量的变化。此外，试验中还发现，BALB／c突变小鼠三种表型2月龄时血清IgG含量比文献报导的BALB／c小鼠低，其原因有待进一步探讨。     

在小鼠进行基因打靶的研究进展

基因打靶是在生物活体研究基因功能的有效手段,通过基因打靶可以对小鼠染色体组进行特异性的遗传修饰,包括简单的基因剔除、点突变的引入、染色体组大片段的删除和重排以及外源基因的定位整合等。近年来的研究表明,对基因打靶进行时间和空间上的调控已成为可能。     

小鼠急性缺氧后肺内肥大细胞的变化

应用组织化学方法对对照组小鼠、缺氧组小鼠以及雌激素预处理缺氧组小鼠肺内肥大细胞的数量、活性、分布范型及组化性质进行了研究.结果表明,缺氧组小鼠随缺氧时间的延长,肺小动脉内皮细胞损伤加重,损伤后再给氧,内皮细胞损伤程度更严重;同时伴有肥大细胞和脱颗粒的急剧增多,均极显著高于同期对照组小鼠（P〈0.01）.雌激素预处理缺氧组小鼠随缺氧时间的延长,肺小动脉内皮细胞的损伤程度较缺氧组小鼠轻;肥大细胞和脱颗粒均极显著低于同期缺氧组小鼠（P〈0.01）.由此说明,肥大细胞可能在急性缺氧造成的肺损伤过程中起着重要作用,肥大细胞膜稳定剂（雌激素）对肺损伤可能起保护作用.