黄河三角洲地区野大豆根瘤菌生物学特性及其遗传多样性研究

野大豆具有耐盐碱、抗寒、抗病等特点,对于研究大豆遗传基因的变迁、改善大豆品质和产量具有重要作用。为了探明黄河三角洲地区野大豆根瘤菌的生物学特性及其遗传多样性,从黄河三角洲地区的14个乡镇26个采样点采集了227株野大豆,从其根瘤中分离纯化根瘤菌,进行一系列的生理生化实验、抗逆性实验、结瘤能力测定、结瘤广谱性测定、16S rDNA序列测定和RAPD分析,共分离纯化出100 株根瘤菌,其中菌株3D-21,3D-24,3K-8,3K-23VS等对酸、碱、盐、抗生素、高温、低温均有较强耐受性,且结瘤能力也较强;菌株7K-8结瘤能力较强,K-5抗逆性较强。16S rDNA序列测定表明所获菌株分属于3个属7个种,相近菌株的RAPD分析呈现明显的多态性。结果表明黄河三角洲地区野大豆根瘤菌存在着丰富的多样性,部分菌株结瘤能力和/或抗逆能力强,该研究为挖掘、利用优良菌株资源奠定了基础。     

相思根瘤菌的生理生化特性初步分析

对22株相思根瘤菌菌株进行生理生化特征的初步研究．这些菌株基本符合Jordan和Allen的根瘤菌分类特征,但其中10株菌株能利用柠檬酸．同时这些菌株利用糖的能力不同．几乎所有的菌株均能利用D-果糖、木糖、山梨醇和糊精,但对其他糖类如麦芽糖、D-半乳糖、棉子糖、鼠李糖和阿拉伯糖则是有的菌株可以利用．有的不能．本研究为进一步的深入研究和应用奠定了基础．     

绿豆根瘤菌形态研究

本文对12个品种绿豆根瘤进行采集、培养，并通过染色对根瘤情况及根瘤菌形态学进行研究，结果表明：①12个品种中V3476、博绿2号外形为卵圆形，其余均为椭圆形；②根瘤着生部位除绿洲1号、95515只着生在侧根外其余品种的主根、侧根均着生根瘤；③不同品种的绿豆根瘤在同一生长时期的根瘤在大小和结瘤率上明显不同，根瘤生长最大的品种是长荚绿豆，根瘤直径为2．76～6．84mm，根瘤最小的为维绿1号，直径为1．2～3．32mm，结瘤率最高的为河北明绿、长莫绿豆、中绿1号、秦豆6、达90％，维绿1号结瘤率最低，仅为20％；④在甘露醇-酵母汁培养基上生长的孤立菌落只有长荚绿豆、秦豆6的菌落形态型为R，其余均为S；⑤培养72小时，菌落大小各有相同，生长最快的为长荚绿豆，直径达9．1mm，生长最慢的为南绿1号，直径为6．6mm；⑥绿豆根瘤菌为短杆状、长椭圆形．     

苜蓿瘤菌中存在类角蛋白——研究中间纤维起源的新线索

根据生物化学性质及不同组织分布,以前将中间纤维(Intermediate filament)划分为5类:角蛋白(Keratin)、波形纤维蛋白(Vimentin)、结蛋白(Desmin)、胶质纤维酸性蛋白(Glial fila-ment)和神经纤维蛋白(Neurofilament).近年又发现一些新类型蛋白,它们分布在各种不同类型的动物细胞中.研究表明,在植物细胞中也至少存在角蛋白中间纤维体系.现在将核纤层蛋白(Lamin)也列入中间纤维蛋白家族.各类中间纤维都具有10nm纤维的形态学特征.角蛋白中间纤维的多肽性质非常复杂,含30多种多肽,分子量在40～70ku之间.根据角蛋白的等电点、分子量及抗原决定簇性质,将角蛋白分成两亚类:I型角蛋白即酸性角蛋白,分子量在40～57ku之间;Ⅱ型角蛋白为中性偏碱性,分子量在53～70ku.角蛋白中间纤维必定是这两类角蛋白即酸性和碱性角蛋白互补装配而成.     

豆科植物-根瘤菌共生固氮的分子机理

与豆科植物－根瘤菌共生固氮有关的基因涉及根瘤菌基因和宿主基因，根瘤菌基因有结瘤基因（nodD,nodAB-CIJ和hsn基因），根瘤菌细胞表面结构基因（exs,lps和ndv基因）和固氮基因（nif和fix基因）；宿主基因主要是结瘤素基因（ENOD和NOD基因）。根瘤菌结瘤基因表达后诱导产生结瘤因子。在根瘤发育过程中，这些基因在根瘤菌与植物之间进行着信息交换，并且具有不同的表达水平。结瘤因子和植物激素对它们进行着调节。     

根瘤菌诱导紫云英根表面传递细胞的观察

对紫云英无菌苗进行接菌处理，以不接菌为对照。于灭菌无氮培养液中培养1周，在接菌处理的紫云英苗中，取根毛密集、形变明显的根段固定，同时在不接菌对照处理的紫云英苗中，截取相应部位根段固定。两组固定的根段分别进行塑料半薄切片光镜观察和超薄切片透射电镜观察。结果发现：经根瘤菌处理的根段，其根表皮细胞的外切向壁上，发育出大量壁内突结构，甚至在根毛细胞四周也发育出大量的壁内突结构，属典型的传递细胞。经透射电镜观察，这些壁内突结构主要为乳头状和盾状结构。而对照苗的根段内未发现壁内突结构，证明紫云英根表皮传递细胞的形成是由紫云英根瘤菌诱导所致。     

不能利用脯氨酸为惟一碳氮源生长的费氏中华根瘤菌突变株的筛选及鉴定

费氏中华根瘤菌可以利用脯氨酸作为唯一碳、氮源生长，本研究利用转座子Tn5gusA5随机插入诱变的方法得到6000多株突变子，并从中筛选到一株脯氨酸代谢缺陷的突变子GXHN100。通过插入位点的定位及序列分析，发现插入位点位于一个未确定功能的ORF内，将该ORF命名为pmrA（Proline metabolic relative ）。通过原位杂交从构建的部分基因文库中获得一个阳性克隆pGXHN100（含有3.3Kb外源片段），序列分析表明它包含了插入基因的完整序列。将3.3Kb的pGXHN100外源片段连接到广宿主载体pLAFR₃上获得重组质粒pGXHN200,通过三亲接合，将pGXHN200导入GXHN100获得互补菌株GXHN200。植株实验发现，突变体GXHN100结有效瘤，固氮酶活与出发菌株无显著差异，但结瘤时间延迟，结瘤效率及竞争结瘤能力下降。     

高效菜豆根瘤菌L15菌株抗血清制备及研究初探

作者对一株高效固氮且具显著增产效益的菜豆根瘤菌L15菌株及11株参考菌株的抗血清制备及血清学反应进行了初步研究，结果表明：菜豆根瘤菌，豌豆极瘤菌和三叶草根瘤菌之间，苜蓿根瘤菌和快生型大豆根瘤菌之间以及慢生型大豆根瘤菌和豇豆根瘤菌之间均存在类属抗原，说明领先血清学方法对根瘤菌进行分类是可行的。     

发现一个倒位重复DNA序列为结瘤基因转录所必需

豌豆根瘤菌R.leguminosarum中有13个基因参与豌豆根部的结瘤.这些基因统称为结瘤(nod)基因.在这些nod基因中有一个称为nodD的调节基因.nodD至少有2个功能:(1)它的产物NodD蛋白抑制nodD自身的转录,称为自身调控(autoregulation);(2)当有植物分泌的类黄酮存在下,NodD又激活全部其它nod基因的转录.我们的研究发现:(1)除NodD外,