HPLC法测定小儿金翘颗粒中连翘苷的含量

目的:建立小儿金翘颗粒中连翘苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以0.1%磷酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长277 nm。结果:连翘苷进样量在0.5~5.0μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9;加样回收率为99.3%,RSD为0.25%(n=6)。结论:该方法准确可靠,重复性好,可用于小儿金翘颗粒的质量控制。     

参芪颗粒中黄芪甲苷含量的测定

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定黄芪甲苷含量的方法。方法:采用蒸发光散射检测器(ELSD)以黄芪甲苷为对照品对参芪颗粒中黄芪甲苷进行HPLC分析,色谱柱Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(32:68),流速0.8mL/min,柱温30℃,ELSD漂移管温度105℃,载气流速2.5 L/min。结果:黄芪甲苷在30.48μg/mL～304.8μg/mL范围内线性关系良好,回收率为97.64%(,RSD=1.11%)。结论:HPLC-ELSD法具有良好的精密度和重现性,可用于参芪颗粒中黄芪甲苷含量测定的质量控制。     

HPLC法测定火炭母中异槲皮苷的含量

目的：建立火炭母中异槲皮苷的HPLC分析方法。方法：采用DiamonsilC18（5μm×250mm×4.6mm）色谱柱,以乙腈-四氢呋喃-0.2%磷酸水溶液（15：4：81）为流动相洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为255nm,柱温为35℃。结果：异槲皮苷在0.1984～2.976mg的范围内线性关系良好,相关系数r为0.9992;异槲皮苷的平均加样回收率分别为100.8%（RSD=1.65%）结论：本方法操作简单,重现性好,结果稳定,可有效地控制火炭母的质量。     

甘蔗叶几丁质酶测定条件的优化

以新台糖ROC22号甘蔗为材料,采用还原糖比色法测定几丁质酶的酶活,并对酶的反应条件进行优化.结果表明:最佳显色条件为显色剂3,5-二硝基水杨酸用量为1.89mg/ml,显色时间为10min;甘蔗叶几丁质酶的最适反应时间为1h,最适温度为60℃,最适pH值为7.0.     

蛹虫草纤溶酶液体发酵条件的优化

在发现蛹虫草具有纤溶酶活性的基础上,对蛹虫草产纤溶酶的液体发酵条件进行了优化,以期获得最佳的产酶条件。研究结果表明,蛹虫草纤溶酶的最优培养基组成是：以20 g/L可溶性淀粉为碳源,10 g/L酵母粉为氮源,Mg2＋浓度为7 mmol/L;最适发酵初始pH值为6;最适发酵时间为4 d。     

西施舌过氧化氢酶活性的研究

对西施舌过氧化氢酶活性进行了研究.研究结果表明:西施舌过氧化氢酶的最适温度为30℃,最适pH值为6.0;在20～50℃,酶较稳定,在50℃以上,酶活性几乎完全丧失;在pH值为5.0～8.0的缓冲液中酶较稳定;在金属离子的浓度为5mmol·L-1时,Fe2+、Cu2+对酶活性有一定的激活作用,而Ca2+、Mg2+等对酶活性有一定的抑制作用;5mmol·L-1的抗坏血酸对酶活性有一定的促进,5mmol·L-1的尿素和EDTA则显示出一定的抑制作用,甲醇和乙醇也显示一定的抑制作用.     

NAA处理下南林895杨无菌苗茎中糖含量 及其相关酶活性的变化

不同浓度NAA处理下,对南林895杨无菌苗茎中糖含量及其相关酶活性的变化进行了测定和分析。结 果表明：(1)100 mg/L的NAA增加了南林895杨无菌苗茎中蔗糖、果糖的含量,提高了酸性转化酶(AI)、中性 转化酶(NI)的活性,降低了蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶(SS)的活性,而高浓度NAA的作用效果正相 反;(2)NAA处理下,茎中蔗糖、果糖含量均与AI活性显著正相关,蔗糖含量与SPS、SS活性极显著负相关, 而果糖与之相关性不显著。可见,适宜浓度的NAA对南林895杨无菌苗茎的糖代谢过程具有一定的促进作用 。     

兔皮Ⅰ型胶原的提取、改性与性能研究

采用酸溶、酶溶相结合的方法,从兔皮中提取了胶原蛋白.通过SDS-PAGE对其进行定性分析,利用FT-IR及TG/DTG表征其理化性能.结果表明,所提胶原为I型胶原,保持了完整的三股螺旋结构;热处理过程中,在100℃之前,200～450℃之间和450℃以后有3次明显失重.经戊二醛交联改性后,该胶原的含水量为(78.7±1.3)%,酶降解率从(88.65±0.11)%降为(6.03±0.38)%(p0.01).采用细胞生长抑制法测定了改性胶原对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF-WT)的细胞毒性.结果表明,改性胶原对MEF-WT细胞无明显毒性,毒性评价为0级或1级.该胶原可用于组织工程.     

酶解双醛淀粉固定化脲酶的酶学性质

采用酶解双醛淀粉固定化脲酶,并对相应的固定化脲酶的性质进行了研究.扫描电镜分析表明,酶解双醛淀粉固定化脲酶后,载体之间形成较大的团状.研究发现:酶解双醛淀粉固定化脲酶量达到24.3%;酶解双醛淀粉固定化脲酶的最适pH值为6.0,最适作用温度为70℃;固定化脲酶具有很好的储存稳定性和较高的米氏常数,且重复使用10次后的活力仅下降约25%.说明酶解双醛淀粉能有效固定化脲酶,是一种高效的固定化酶载体.     

何首乌中一种Ⅲ型PKS基因的克隆及生物信息学分析

Ⅲ型聚酮合酶即查耳酮合酶超家族,能催化生成一系列结构各异、具有不同生理活性、含有查耳酮合酶基本骨架的植物次生代谢产物。根据不同植物Ⅲ型PKSs基因的保守序列,设计简并引物,采用RT - PCR和RACE技术,首次从传统中药材何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)中克隆到一种Ⅲ型PKS基因,其cDNA全长1228bp, 编码379个氨基酸,命名为FmPKS (GenBank登录号: GQ411431)。该基因含有三个内含子, 与迄今报道的绝大部分Ⅲ型PKS含有一个内含子不同,而与最近报道的虎杖中克隆的PcPKS2基因相同。通过生物信息学方法对其编码蛋白的序列进行同源性分析,构建了系统进化树,并对其等电点、疏水性及二级结构、跨膜区域等理化性质进行了初步预测,为进一步研究其功能奠定了基础。