利用修饰的T7 RNA聚合酶基因建立一种植物耦联表达系统

通过基因修饰，在T7RNA聚合酶基因的5′端添加了SV40大T抗原的核定位信号编码序列，利用CaMV35S启动子和修饰的T7RNA聚合酶基因构建了植物表达载体pBBT7。同时，利用T7启动子和β－葡糖醛酸酶基因（gusA）构建了另一个植物表达载体pBTG。通过农杆菌介导法将上述两个植物表达载体共转化烟草，共转化植株表现出较强的β－葡糖醛酸酶基因（β－glucuronidase，GUS）活性，上述结果表明T7RNA聚合酶－T7启动子耦联表达系统在植物中是有效的，说明已成功构建了一种植物耦联表达系统。     

司他夫定的合成

报道了以四乙酰核糖和胸腺嘧啶为起始原料，经中间体5－甲基尿苷的抗艾滋病药物司他夫定的合成工艺。四乙酰核糖与三甲硅保护的胸腺嘧啶缩合、醇解得到中间体5－甲基尿苷（4），5－甲基尿苷甲磺酰化、环化、溴代后得到2'－溴－3'－甲磺酸酯（7），再经还原消除，去保护得到最终产物司他夫定（9）。总收率46．4％。     

毛茛属两种植物的过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对毛茛属的毛茛(Ranunculus ja ponicusscus Thunb．)和扬子毛茛(Ranun-culus siebodii Miq．)在不同生境中的叶、茎、果实进行了过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶的分析，2个种的各组织器官均存在相似的酶谱，其中过氧化物酶的分离效果较酯酶的分离效果好，茎、果的酶带较叶的酶带多且分离效果好。结果表明，不同种之间、同一种类在不同生境中及同一种类不同组织器官中的同工酶谱有差异。     

细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶BM3F87V上调内皮一氧化氮合酶基因的表达

血管内皮细胞富含细胞色素P450表氧化酶,它代谢花生四烯酸产生内皮源性超极化因子,(EDHF,即EETs),它与血管内皮细胞产生的一氧化氮(NO)之间的关系尚不清楚.经转基因技术在原代培养的牛主动脉内皮细胞中产生内源性EDHF,并研究了EDHF对NO合成的关键酶---内皮NO合酶(eNOS)基因表达的调节作用.将表氧化酶基因CYP BM 3 F87V克隆于真核表达载体pCB 6 ,转染了经3～4代培养的牛主动脉内皮细胞,产生高浓度的内源性14,15-EET.采用Western blot和Northern blot分别从蛋白质水平和RNA水平判断内源性14,15-EET对eNOS基因表达和转录的影响,同时根据[ 3 H] L-精氨酸转变为[ 3 H] L-瓜氨酸的水平来判断其对eNOS活性的影响.结果显示:与转染pCB 6 的对照细胞相比,转染的pCB 6 -BM 3 F87V在内皮细胞中过度表达后能显著上调eNOS的蛋白质表达和eNOS的mRNA水平,明显增加了eNOS的活性.因此,转染表氧化酶BM 3 F87V对eNOS基因有显著上调作用.这提示细胞色素P450表氧化酶能够通过促进内皮细胞内EDHF的产生来调节NO生成,进而改善内皮细胞功能,这可能为治疗心血管疾病提供了一种新思路.     

磁场处理土壤对油菜保护酶活性的影响

应用室外盆载试验的方法，将土壤磁效应与生物磁效应相结合，研究了磁处理土壤对油菜苗期、生长中期和成熟期超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶活性（CAT）及丙二醛（MDA）含量的影响。研究结果表明，磁处理土壤提高油菜SOD、CAT的活性，而MDA的含量降低。     

采绒革盖菌锰过氧化物酶的诱导及部分特性研究

研究了不同碳源、氮源对采绒革盖菌锰过氧化物酶分泌的影响及锰过氧化物酶的部分特性 ;结果表明 ,淀粉为碳源 ,玉米粉为氮源有利于锰过氧化物酶的分泌 ;在 30℃、110r/min恒温振荡培养条件下 ,第 9天达产酶高峰 ,峰值酶活 345 2u/ml;酶作用的最适pH为 4 0 ,最适温度 30℃ ,Mg2 、Mn2 等离子对锰过氧化物酶有激活作用 ,Ag 、Cl- 等离子对酶活有明显的抑制作用 .     

非天然D-型氨基酸生物转化中酶的纯化及其基因序列

D-海因酶 (D- Hydantoinase,HDTase )和 N -氨甲酰基 - D-氨基酸酰胺水解酶 (D- Carbam oylase,DCase )是医药和食品工业上用于生物转化 D-型氨基酸的酶。为了用人工酶替代现用的天然酶转化工艺 ,我们用热变性、硫酸铵分级及 Q - Sepharose、Phenyl- Sepharose、Superose12等多步柱层析 ,从现用菌株 No.2 2 6 2中纯化了 HDTase和 DCase,二酶均达到 SDS- PAGE纯 ,经 N -端序列分析 ,HDTase和 DCase的 N -末端氨基酸序列分别为 :MDKL IKNGTI和 MTRQKIL AF。首先 ,根据酶的 N -末端氨基酸顺序推论并合成了正向多核苷酸简并引物 ,然后按蛋白质数据库资料 ,在比较不同菌株氨基酸残基同源性基础上 ,化学合成了数对反向多核苷酸引物 ,以菌株 No. 2 2 6 2基因组 DNA为模板 ,经 PCR扩增获得了 HDTase的部分基因序列 (～ 70 0 bp )和 DCase的全部基因序列 (912 bp ) ,为使人工酶用于非天然 D-型氨基酸的生物转化奠定了基础。     

外源多胺对香蕉叶片的低温效应模拟实验

在人工气候箱中模拟寒潮对香蕉幼苗造成的冷害 ,研究外源多胺 (精胺、亚精胺、腐胺 )对低温期间香蕉叶片过氧化物酶和相对电导率的影响 .试验表明 ,叶面喷施 0 .6mmol·L-1精胺 ,0 .8mmol·L-1的亚精胺可明显提高过氧化物酶活性 ,而相对电导率则下降 ;但不同浓度的外源腐胺对两者影响不明显 .     

果实成熟与多聚半乳糖醛酸酶基因的研究进展

对与果实成熟相关基因多聚半乳糖醛酸酶 (PG)基因的筛选、鉴定、表达及基因工程的研究进展作一个简要评述     

缙去山特有植物缙云黄芩的等位酶变异研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳检测了重庆缙云山特有植物缙去黄芩（Scutellaria tsinyunensis C.Y.Wu et S.chow)7个居群70个个体的过氧化物酶（POD）、细胞色素氧化酶（CYT）、超氧化物歧化酶（SOD）、淀粉酶（AMY）和酯酶（ES）5种等位酶谱带的变异式样。并将所得酶谱带进行编码，然后分别用Jaccard和Sokal-Michener结合系数结合不加权组平均法（UPGMA）进行聚类。7个居群等位酶谱带分布表明，只有15.56%的等位酶谱带在所有个体中是恒定的，其余84.44%的等位酶谱带在个体间显示出或多或少的变异。在居群水平上，也只有22．22％的等位酶谱带是恒定的，77．78％的等位酶谱带存在有分化。聚类分析结果表明缙云黄芩同一居群的个体间在等位酶谱带上表现出很大的相似性，即居群内个体间表现出较大的遗传同质性；而来源于不同居群的个体酶谱则表现出明显的趋异性，显示出缙云黄芩不同居群之间发生了较明显的遗传分化。