SAM自由基酶研究进展:新反应与新机制

S-腺苷-L-蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine, SAM)自由基酶是当今酶学领域的研究热点.该类酶通过结合的辅因子SAM和[4Fe-4S]簇催化生物体中一系列重要的自由基反应,自2001年被正式命名以来,成员不断壮大,目前已成为最大的酶家族之一.近年来, SAM自由基酶领域有大量新反应和新催化机制被报道.本文对近5年部分代表性成果进行酶催化机制的介绍,内容涉及核糖体肽翻译后修饰、核苷类化合物以及多种小分子生物合成.通过底物分类,让读者更容易理解SAM自由基酶催化反应的广泛性与多样性.同时对该领域新发现的新颖的有机金属催化自由基反应机制进行了介绍,并对SAM自由基酶领域的未来发展方向进行展望.     

桃仁与红花配伍对药材成分溶出的影响

对桃仁与红花配伍对药材成分溶出的影响进行研究.采用单因素试验和正交试验,以羟基红花黄色素A提取转移率与干膏率的综合评分为指标,优选红花最佳提取工艺,以苦杏仁苷提取转移率与干膏率的综合评分为指标,优选桃仁最佳提取工艺.在最佳提取工艺下,将桃仁与红花配伍,采用高效液相色谱法测定红花中羟基红花黄色素A提取转移率,并进行统计分析.实验结果显示,红花最佳提取工艺为提取2次,每次提取1.5 h,液料比为50∶1,桃仁最佳提取工艺为提取3次,每次提取3.5 h,液料比为8∶1.实验结果表明,桃仁对红花中羟基红花黄色素A提取转移率无显著性影响.     

基于化学荧光法的双黄连口服液神经氨酸酶抑制活性测定

建立流感病毒神经氨酸酶体外活性荧光检测法测定双黄连口服液的NA抑制生物活性.采用化学荧光法测定双黄连口服液对神经氨酸酶的抑制率.结果表明,反应后溶液荧光强度与产物4-MU浓度在0.1~1.2μg/m L内成良好的线性相关系(Y=39482X-254.05(r=0.9994)),该测定方法的精密度与重复性良好,反应后溶液在4℃条件下4 h内稳定,双黄连口服液对流感病毒神经氨酸酶的抑制率高达64.20%.该方法可用于测定双黄连口服液对神经氨酸酶抑制活性测定.     

接种疫苗防流感

<正>又到秋冬之交,我国很多地方开始进入流感高发期。流感是由不同类型的流感病毒引起的,历史上的流感大流行曾经造成数千万人的死亡。接种流感疫苗是控制与预防流感大规模流行的有效办法。     

胸苷酸合成酶不同基因型在胰腺癌细胞表达与化疗敏感性的关系

本实验探讨胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TYMS)不同基因型在胰腺癌细胞中的表达水平与胰腺癌细胞化疗敏感性的关系.利用PCR及凝胶电泳分析不同胰腺癌细胞TYMS基因型,CCK-8试剂盒检测细胞的化疗敏感性,使用Real-time PCR及Western Blot分别检测TYMS mRNA与蛋白表达水平.结果发现5种人胰腺癌细胞TYMS基因5'-UTR串联重复序列形成3种基因型,分别是2R/2R,2R/3R与3R/3R.3R/3R基因型细胞TYMS mRNA表达水平较2R/2R及2R/3R明显增高,3R/3R细胞TYMS蛋白表达也明显高于2R/2R和2R/3R细胞.5-FU化疗敏感性检测显示3R/3R基因型细胞抑制率明显低于2R/2R,2R/3R,差别有统计学意义(P0.05).研究表明不同胰腺癌细胞株中TYMS各基因型的基因表达(mRNA及蛋白)量的高低直接影响其对5-FU的化疗敏感性.     

槐花米提取物对尿素酶的抑制活性

采用靛酚法研究了槐花米的乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷提取物对尿素酶的抑制作用，证实3种提取物均对尿素酶有明显抑制作用，IC₅₀分别是2.63，1.90，0.53 g/L.通过动力学研究阐明了提取物对尿素酶的抑制行为是可逆的混合型抑制，动力学常数K_i分别为0.32，0.22，0.084 g/L.首次阐明了槐花米中含有尿素酶抑制成分，为槐花米具有健胃、养胃的功效提供了一种理论解释.     

血橙中花色苷及黄酮类物质的结构鉴定

本文利用化学定性反应、HPLC-MS、GC以及FTIR等方法对血橙中花色苷及黄酮类化合物进行了鉴定。结果表明,血橙中主要含有8种花色苷和4种黄酮类物质,矢车菊素-3-葡萄糖苷和矢车菊素-3（6＂-丙二酰）葡萄糖苷是血橙中主要花色苷,芸香柚皮苷和橙皮苷是血橙中主要的黄酮类物质。     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在儿科疾病中的临床应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）是在临床应用最广泛的诊断肾脏病变的酶之一,NAG主要来自近曲小管的溶酶体,尿中含量相对稳定,其排泄异常提示肾脏损害,因此是肾小管损伤的敏感标志物,在很多儿科疾病中可以判断是否有肾脏损害和（或）严重程度。     

毛尖紫萼藓1-半胱氨酸过氧化物酶基因GpPER1的克隆、表达载体构建及序列分析

从本实验室已成功构建的毛尖紫萼藓干旱cDNA文库中获得一条与抗旱相关的基因,即1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys peroxiredoxins)基因,简称GpPER1,GenBank登录号为GU989314,该基因全长1040bp,开放阅读框(ORF)为666 bp,编码221个氨基酸。根据GpPER1基因的开放阅读框设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增得到GpPER1基因片段,并成功构建了表达载体pRI 101-GpPER1,为进一步在分子水平上研究毛尖紫萼藓的耐旱机制,发现并利用植物的抗逆基因奠定了基础。     

HPLC法测定健儿消食口服液中橙皮苷和黄芩苷的含量

建立一种同时测定健儿消食口服液中的橙皮苷和黄芩苷的高效液相色谱法（HPLC）．样品用甲醇超声提取，采用ZorbaxSB-C18色谱柱上分离，以1％乙酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，检测波长280nin，柱温为25℃时直接测定．橙皮苷在15．5～155．0μg·ml-1内线性关系良好；黄芩苷在58．0～290．0μg·...