三叶青两个肌动蛋白基因片段的克隆及其分析

根据GenBank中登录的植物肌动蛋白保守序列设计1对引物,对三叶青的块根进行RT‐PCR ,在1次扩增中得到2个不同的肌动蛋白基因片段,分别命名为 ThAct1和 ThAct2．测序结果显示：ThAct1基因片段长度为867 bp ,编码252个氨基酸;ThAct2基因片段长度为1079 bp ,编码152个氨基酸．经Blast分析,ThAct1和ThAct2基因均属于NBD＿sugar‐kinase＿HSP70＿actin superfamily家族,与其它物种Actin基因序列和编码的蛋白质均具有同源性．RT‐PCR结果初步表明：在茎、普通根和块根中 ThAct1和 ThAct2基因的表达未见差异;但在叶中,ThAct1的表达稍强,而 ThAct2的表达稍弱．另外,在茎、普通根和块根中,ThAct1表达比ThAct2强;但在叶中 ThAct1表达比ThAct2弱．结果为分析肌动蛋白基因在三叶青块根发育中的功能奠定了基础;获得的肌动蛋白也可以作为内参基因,在三叶青功能基因组的研究中用于其它基因的定量表达分析．     

F3重组毒素的克隆表达及纯化

以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选,获得含有F3的PQE80L重组载体的克隆.提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区,PE40.然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体.转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40.结果显示,大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量大概占菌体总体蛋白量的20%.通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为大规模表达、纯化F3-PE40的进一步功能奠定了基础.     

福建电子信息产业提升全球竞争力分析与对策——基于波特的“钻石理论模型”

运用波特的“钻石理论模型”对福建电子信息产业现状进行分析,发现其在企业战略、结构与竞争状态等方面还非常薄弱,亟需进行产业链和供应链的整合,以提高全球竞争力。提出福建电子信息产业可利用海西加快建设的良好契机,通过“走出去”和“请进来”的方式,吸纳台湾电子信息产业的创新技术和管理经验,以推动电子信息产业链和供应链的整合,实现产业战略转型升级的建议。     

“科技路路通”整合科技情报信息资源的共享及服务模式

2009年,由安徽省科技厅牵头,开展＂科技路路通＂建设工作,建立＂科技路路通＂省总中心及合肥、芜湖、蚌埠市分中心和一批服务站,促进创新要素和服务网络的融合互通,形成上下贯通的创新资源的整合与共享服务平台。     

牦牛GSTK1基因序列特征分析及其组织表达谱构建

旨在探讨谷胱甘肽硫转移酶K1(Glutathione S-Transferase Kappa1,GSTK1)基因序列特征.以牦牛为试验对象,通过RT-PCR技术扩增GSTK1基因序列并分析生物信息学,采用RT-qPCR技术构建其在牦牛不同组织中的表达谱.ORF分析显示,牦牛GSTK1基因编码区为618 bp,编码氨基酸为205个.系统发育树分析显示,牦牛与野牦牛(99.68%)、黄牛(99.68%)和野牛(99.40%)之间的同源性最高,与北极熊(87.63%)、野猪(87.25%)和马(87.01%)之间的同源性最低.蛋白预测分析显示,GSTK1蛋白为不稳定的亲水蛋白,存在12个磷酸化位点.高级结构预测分析显示,GSTK1蛋白的主要成分为α-螺旋(50.73%)、无规卷曲(40.00%)和延伸链(9.27%).组织表达分析发现GSTK1在所检测牦牛卵巢、小肠、脾、肝、肾、肌肉、肺和心组织中均有表达,其中表达量最高的组织是肝,表达量最低的组织是脾和心,且与其他组织差异显著(P<0.05).本研究获得了牦牛GSTK1基因的序列特征及组织表达谱,为进一步挖掘牦牛GSTK1基因的功能提...     

绿玉树羽扇豆醇合酶基因分离及异源表达

羽扇豆醇是一种重要的五环三萜化合物,具有抗肿瘤、抗感染、抑菌等多种药理活性。从非洲药用植物绿玉树(Euphorbia tirucalli L.)中分离出羽扇豆醇合酶基因EtOSC7,测序结果表明该基因全长2 301 bp,编码766个氨基酸,与蓖麻(Ricinus communis)和木览(Bruguiera gymnorhiza)的羽扇豆醇合酶氨基酸序列的相似度分别为78%和76%。利用羊毛甾醇缺陷型酵母GIL77菌株对EtOSC7蛋白进行了功能验证,结果表明该蛋白能够催化羽扇豆醇的合成。以EtOSC7基因为基础,在大肠杆菌和酿酒酵母两种模式菌株中进行了羽扇豆醇生物合成的尝试,结果表明,在重组大肠杆菌中未检测到羽扇豆醇的生成,而在重组酿酒酵母中测得羽扇豆醇的产量为0.55 mg/L。研究结果可以为构建三萜化合物微生物细胞工厂提供新的基因元件,并为羽扇豆醇的生物合成提供理论支持。     

基于生成对抗网络的古典建筑地域性表达特征提取模型

为了获得影响古典建筑地域性表达的特征因素,提出了古典建筑地域性表达特征提取模型,通过分析古典建筑地域性表达特征的组成,得到了“融合地形地貌”“与地形肌理自然融合”“有机契入场地地形”和“诠释地形结构”4点地域性表达特征,并根据每个表达特征的指标期望值、方差和变异系数,计算分析了此次确定的特征匹配指标的重要性,从而进行了古典建筑地域性表达特征的判定,同时,引入生成对抗网络,确定古典建筑地域性表达特征的评价指标权重,反之匹配具体特征,设计了古典建筑地域性表达特征提取模型进行。实验结果表明,模型可以在保证提取准确率的同时,高效提取古典建筑地域性表达特征。     

应用生物信息学鉴定急性STEMI患者通路及Hub基因

利用基因表达综合数据库数据集的生物信息学分析,确定4h内STEMI患者血液RNA诊断生物标志物。从基因表达综合数据库中提取RNA表达谱数据集,寻找差异表达基因并对差异基因进行富集分析,在蛋白相互作用网络中筛选Hub基因,建立了基于Hub基因的随机森林模型和逻辑回归模型。结果表明,与健康对照组比较,STEMI患者中鉴定出300个明显DEGs。炎症和免疫相关的途径显著富集,鉴定出7个关键基因,即FPR2、ITGAM、BST1、CEACAM8、MMP9、ELANE和FPR1。通过对7个Hub基因构建随机森林模型和逻辑回归模型,准确地将STEMI样本与健康对照样本分开,对STEMI的预测具有较高的准确性。     

整合角色教学法对小儿推拿教学的影响研究

以济源职业技术学院护生为研究对象,探讨了整合角色教学法对小儿推拿教学的影响。其中,对照组给予传统教学法,观察组给予整合角色教学法,对比两组理论考核、小儿推拿操作技能、学习积极主动性。研究结果表明,观察组理论、小儿推拿操作评分均明显高于对照组。观察组学习动力、学习深度、学习目标、学习控制力、学习扎实性及总分评分均明显高于对照组。因此,整合角色教学法能够明显提高护生小儿推拿理论的操作评分,并提高护生学习积极主动性。     

旅游企业员工情绪劳动的前因后果研究

旅游企业要求员工面对顾客要微笑服务,遵循“服务至上”原则,因此旅游企业员工的情绪调节尤为重要。基于旅游企业员工的情绪劳动构建中介模型,调查其前因后果,研究旅游企业员工的积极情绪和情绪表达规则感知如何影响其情绪劳动,并进而影响员工的工作投入。以全国34家旅游企业中的370名员工为研究对象,采用t检验和ANOVA分析验证被调查者人口统计学变量对情绪劳动的影响,对数据进行信效度检验和相关分析,采用结构方程模型验证假设。结果表明,深层扮演在积极情绪和员工工作投入中发挥完全中介作用,表层扮演在积极情绪特质与工作投入之间不发挥中介作用;深层扮演在情绪表达规则和员工工作投入中发挥完全中介作用,表层扮演不发挥中介作用。