脑心肌炎病毒pCMV-HA-VP2表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的:构建脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2,并在HEK293细胞中表达.方法:提取EMCV的总RNA,RT-PCR扩增VP2基因,酶切后构建带HA标签的真核表达质粒pCMV-HA-VP2,运用脂质体介导法将其转染至HEK293细胞中,分别进行过表达检测、Westernblotting分析及IFA检测来验证VP2基因的转录及表达情况.结果:重组表达载体pCMV-HA-VP2构建成功,转染至HEK293细胞中,VP2蛋白和HA标签融合表达成功.结论:EMCV衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2在HEK293细胞中的成功表达,为EMCV衣壳蛋白的功能研究提供理想的实验材料,同时也为EMCV感染机制及其受体研究奠定基础.     

基因重组型枯草芽孢杆菌芽孢表面展示技术与应用

枯草芽孢杆菌是一种好氧型革兰氏阳性益生菌,在营养匮乏的环境下,可形成具有强抗逆性的芽孢。其芽孢独特的结构和生理功能使得芽孢表面展示技术相较于其他表面展示技术具有多种优势,构建的重组芽孢不但易纯化、回收率高,而且安全性好。近年来,枯草芽孢杆菌芽孢表面展示技术得到迅猛发展,已成功利用CotB、CotC、CotG、CotZ、CotA、OxdD、CotE、CotZ、CgeA等多种锚定蛋白将外源蛋白或多肽展示在芽孢表面,并应用于工业化酶、口服疫苗和药物、大分子量多聚体蛋白的生产以及环境污染的生物治理等领域。本文首先介绍了芽孢展示系统整合策略,并重点阐述了基因重组型枯草芽孢杆菌芽孢展示技术中涉及的锚定蛋白以及该技术在各领域的应用与展望。     

我国率先构建野生大豆泛基因组

正中国农业科学院作物科学研究所与诺禾致源等合作,在国际上率先构建和分析了一年生野生大豆的泛基因组,为作物种质资源研究和利用提供了新的方法和启示。项目牵头人、中国农科院作科所研究员邱丽娟介绍,大豆是重要的油料和高蛋白粮饲兼用作物。栽培大豆由其祖先种一年生野生大豆经过人工选择进化而来,其中所蕴藏的优异基因的开发和利用对拓宽现代大豆品种的遗传基础,改良品质,提高对病     

河南鲁山五大温泉古细菌多样性分析

河南省平顶山市鲁山县有上汤、中汤、下汤、温汤和碱汤等五大温泉,采用Illumina Hisiq2500PE250技术对鲁山五大温泉(上汤、中汤、下汤、温汤和碱汤)古细菌的16S r DNA基因V4-5变异区序列进行测序,应用Uparse、Mothur、SILVA、MUSCLE和Qiime等软件整理和统计样品序列数目和操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)数量,分析物种的丰度和多样性.上汤、中汤、温汤、下汤和碱汤分别获得87 993、67 326、44400、48 611、48 495条有效reads,聚类为520、280、678、451、437个OUTs.古细菌分类分析表明,河南鲁山五大温泉的古细菌可以归入11个门,其中奇古菌门(Thaumarchaeota)占95.25%,是优势菌群;在属分类阶元上,上汤、中汤和温汤的优势菌属为Candidatus-Nitrosocaldus; unidentified-Thaumarchaeota是下汤和碱汤的优势菌属.对河南鲁山五大温泉开展古细菌多样性的研究发现,温泉水中含有较高的参与氨氧化过程的奇古菌门,为后续深入研究和利用河南鲁山五大温泉水中的古细菌资源提供了基础资料.     

水稻基因ST1的克隆及原核表达

指出了基因ST1是决定水稻柱头和花柱形成的关键基因,属于水稻中的XHS基因家族.将ST1的全长cDNA序列构建到原核表达载体pET-28a中,并转化了表达菌株大肠杆菌BL21.经Western bolt验证表明:所表达80 kD蛋白即为目的蛋白,为后续的蛋白功能等研究提供了实验基础.     

DanHong Injection inhibits the development of primary abdominal aortic aneurysms in apoE knockout mice

Clinical observations indicate that DanHong Injection （DHI） can increase blood flow and reduce various syndromes in patients with cardiovascular disease. How- ever, it still needs to define the function of DHI and the involved mechanisms in details, such as the protective effect on the development of primary abdominal aortic aneurysms （AAAs）. In this study, we determined whether DHI is able to inhibit AAA in apoE knockout （apoE-/-） mice. Thirty apoE-/- male mice on high-fat diet （0.5 % cholesterol, 21% fat） were randomly divided into two groups and received i.p. injection of saline （100 μL/day） and DHI （100 μL/day）, respectively, for 16 weeks. At the end of experiment, we determined the development of atherosclerosis in en face aorta and aneurysms,pathological morphology of arterial wall, and serum lipid levels. We also determined the expression of monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1）, MMP-2, and MMP-9 mRNA in aortic wall using real-time RT-PCR. Our results indicated that high-fat diet induced the development of AAAs in apoE-/- mice, but the induction was totally blocked by DHI （P 〈 0.01）. The result of staining of abdominal aortic cross sections showed that DHI main- tained the collagen content in arterial wall, thereby pre- venting the animals from the development of AAA. Although DHI had little effect on serum total- and LDL- cholesterol levels, it reduced the expression of MCP-1, MMP-2, and MMP-9 mRNA in aortic wall （P 〈 0.01）. Taken together, our study suggests that DHI can inhibit the high-fat diet-induced AAA formation. The inhibitory effects may be related to the maintenance of the collagen content and inhibition of expression of AAA-related genes. Our study may suggest a new application of DHI in clinics.     

科技

最新的研究根据古代、现代狗类以及狼类样本的基因分析指出，狗类驯养源自欧洲，而且至!步具有18000年历史。     

拟南芥类结瘤素基因At1g01070的生物信息学分析

类结瘤素基因在非结瘤植物生长发育中承担着重要的功能,但仅少数基因的功能被鉴定.本研究对拟南芥类结瘤素MtN21(Medicago truncatula NODULIN 21)家族成员At1g01070进行了生物信息学分析及亚细胞定位验证.结果表明,At1g01070有两种可变剪切体,编码两种蛋白At1g01070.1和At1g01070.2,前者比后者在N端多47个氨基酸,它们的分子量分别为40KD和35KD,等电点分别为9.2和8.9;均含有2个MtN21蛋白的特征结构域EamA(药物/代谢物转运结构域),At1g01070.1比At1g01070.2多一个PLN00411结构域,且其靠近N端的EamA结构域较后者长;三级结构均由7个α-螺旋和一些不规则卷曲组成,分别含有10个和8个疏水跨膜区,均含13个磷酸化修饰位点,亚细胞定位预测主要定位在质膜;进化上,与琴叶拟南芥(Arabidopsis lyrata)亲缘关系最近;亚细胞定位结果显示At1g01070.1定位在质膜,与预测结果一致.推测At1g01070在植物体内可能参与物质运输.     

胞质雄性不育新基因T1243在大白菜中的遗传转化

以大白菜带柄子叶为外植体,通过农杆菌介导法,优化大白菜的遗传转化体系,得出结论:津育75的最佳筛选培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+7.0mg/L AgNO3+7.5mg/L Kan+200mg/L Amp,外植体在黑暗条件下预培养2d,然后用OD600值为0.1菌液侵染2min,共培养2d时转化率最高,为35.48%.对抗性植株进行分子检测,结果表明T1243基因已整合到大白菜中,并可以正常表达。     

罗斯&诺瓦斯“生命公民”解读

伴随生物技术、生物医药、基因组学等领域的发展,尼古拉斯·罗斯(Nikolas Rose)和卡洛斯·诺瓦斯(Carlos Novas)在福柯"生命政治"、拉比诺"生命社会"之后提出"生命公民"概念,从生物角度重新思考公民价值,对政治哲学和生物医学之间的关系做出创新性探讨。罗斯诺瓦斯认为生命公民是"积极的、主动的",并且是可"构建"的,其既具有个体属性,又具有集体属性,生命价值的产生过程改变了人类生命的定义。