纳米碳酸钾脱除Fmoc保护基的新方法

Fmoc是一种常用的氨基保护基,传统的脱除方法是通过加入二级胺与之作用来实现。针对方法中存在的成本较高、使用的过量二级胺不易回收以及污染环境等缺点,建立了利用新型无机碱纳米碳酸钾非均相脱除Fmoc保护基的新方法。采用湿法研磨方法,将普通碳酸钾制成粒径为64 nm的纳米碳酸钾,以Fmoc保护的L-苯丙氨酸的脱保护反应为Model反应,确定了最佳反应条件：反应溶剂为无水乙醇,Fmoc-L-Phe-OBn与纳米碳酸钾物质的量比为1︰2,反应温度为25 ℃,高产率得到了相应的游离氨基化合物,进一步研究了新方法的适用范围,对7个Fmoc保护的氨基酸和二肽的底物进行了测试。结果表明,产率均在98%以上,且纳米碳酸钾能够回收再利用,在5次之内的活性几乎没有变化。新方法具有操作简单、成本低、污染小、碳酸钾可回收利用的优点,对多肽的合成及脱保护研究有重要的参考价值。     

碱性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化活性肽的工艺优化

为了提高螺旋藻肽的抗氧化能力与收率,采用单因素实验和响应面法对碱性蛋白酶水解螺旋藻粉制备抗氧化活性肽的工艺条件进行优化。实验结果表明,与木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶相比,碱性蛋白酶对螺旋藻粉的水解能力最强,其最适水解条件为55.46℃、pH值为 6.71、固(g)液(mL)比为1∶10.83。在此条件下,酶解240min,螺旋藻肽的收率为58.50%,与优化前相比,提高了15.61%。所制备的螺旋藻肽具有较强的抗氧化能力,在质量浓度为0.86g/L时,其DPPH·清除能力为77.60%,与优化前相比,提高了7.62%。     

7种杀菌剂与拮抗菌SJ1606发酵代谢物配合对苹果树腐烂病菌的抑制活性

[目的]明确7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606对苹果树腐烂病菌防治效果、筛选出高效混配剂,为传统化学杀菌剂的减量增效使用提供参考方向。[方法]采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606发酵代谢物以及新型混剂对苹果树腐烂病菌的抑制效果。[结果]苹果树腐烂病菌对咪鲜胺、戊唑醇、丙环唑、多菌灵、苯醚甲环唑表现为高度敏感,以上5种化学杀菌剂对病原菌的EC₅₀分别为0.12、0.33、0.57、0.64、1.14μg/mL;对吡唑醚菌酯表现为中度敏感EC₅₀为6.92μg/mL;对福美双表现为不敏感,EC₅₀为149.99μg/mL。SJ1606发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC50分别为40.36、14.75μL/mL。采用体积混配方法,脂肽粗提物对部分化学药剂表现出较强的增效作用,其中与多菌灵混配以7∶3增效最为明显,毒性比达1.72;与吡唑醚菌酯以6∶4的毒性比最高为1.58,与咪鲜胺混配以6∶4的混配毒性比最高为1.50;与丙环唑混配以5∶5毒性比最高为1.48。[结论]成功筛选出脂肽粗提物对化学杀菌剂混配增效比例...     

紫苏籽抗氧化肽的制备工艺研究

采用碱提酸沉法从紫苏籽粕中提取蛋白质,进行蛋白酶筛选,发现紫苏籽蛋白经碱性蛋白酶酶解后有最好的抗氧化活性和水解度(DH).在单因素试验的基础上,采取响应面分析方法,并建立数学模型,确定最佳酶解工艺.试验结果表明:各因素影响紫苏籽粗蛋白酶解液DPPH自由基清除率的主次顺序是:加酶量酶解时间pH值,最佳条件是:加酶量3 000 U·g~(-1),酶解时间5.00 h,pH值9.80,温度50℃,此时DPPH自由基清除率为73.64%,说明紫苏籽蛋白质酶解多肽拥有很高的抗氧化活性.     

Alcalase酶解蛋清粉制备抗凝血肽的工艺优化

采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清粉制备食源性抗凝血肽。结果表明:底物浓度过大会抑制水解度的增长,底物质量分数为1%时蛋白质完全水解后的产物抗凝血活性最佳;高温和低温均对水解度有影响,低温酶解产物的抗凝血活性较好;pH值对水解度的影响与Alcalase的最适pH值有关;pH值为7时,抗凝血活性最好;酶/底物浓度增大,但底物不变的情况下,对水解度的提高不明显,酶/底物浓度过大,导致抗凝血活性降低。考虑交互作用经试验优化设计确定的酶解最佳工艺参数为:底物质量分数为1%,酶解温度为50 ℃,酶/底物质量分数为5%,酶解pH为8。在该条件下水解2 h,凝血抑制率达到68.92%。     

不同活性短肽对酪朊酸钠乳化特性的影响及其配比优化

比较了水解乳清蛋白、大豆肽、海洋胶原蛋白肽、玉米肽和花生肽等不同活性短肽对酪朊酸钠的乳化活性和乳化稳定性影响,并优化了其蛋白体系乳化效果较好的复配比例.结果表明,水解乳清蛋白与酪朊酸钠的复配比例大于2∶8,大豆肽和海洋胶原蛋白肽分别与酪朊酸钠的复配比例大于1∶9时,以酪朊酸钠为主体的蛋白体系的乳化活性和乳化稳定性均显著降低(p＜0.05);玉米肽和花生肽与酪朊酸钠的复配比例为1∶9时,体系的乳化活性和乳化稳定性均显著降低(p＜0.05).进一步选用水解乳清蛋白、大豆肽和海洋胶原蛋白肽复合后与酪朊酸钠复配,采用混料设计试验,确定复配体系乳化效果较好的3种活性短肽的较佳配比为水解乳清蛋白50％、大豆肽40％、海洋胶原蛋白肽10％,3种复合活性短肽与酪朊酸钠的优化复配比例为3∶7.研究结果可为高蛋白饮料中活性短肽的选择提供理论依据.     

胡萝卜籽抗氧化肽的分离纯化及活性研究

采用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱对胡萝卜籽中的抗氧化肽进行分离纯化.以DPPH自由基(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率为指标,测定多肽的抗氧化活性.采用电喷雾电离质谱法测定该多肽的相对分子质量.研究结果表明:经过分离纯化,得到一个具有较强抗氧化活性的多肽,在质量浓度为1 mg·m L-1时,其DPPH自由基清除活力达到(92.02±0.47)%,相对分子质量为339.3 u,由3个氨基酸残基组成.     

壳聚糖微球亲和层析提取抑酶肽的研究

建立了一种高效、实用的抑酶肽制备技术。采用牛肺为原料,利用改性壳聚糖载体,共价偶联胰蛋白酶,亲和层析牛肺提取液,2步制得高比活抑酶肽。抑酶肽抑制比活力为71428 BAEE/mg,酶活性回收率为73.5%。该方法质量稳定,成本较低,吸附剂机械强度高,抗污染能力较强,可反复使用,适宜应用。     

复方木香保健酒对脾虚大鼠的影响

为探究复方木香保健酒对脾虚大鼠(Rattus norvegicus)的影响，选取SPF级SD大鼠，采用皮下注射利血平结合不规则喂养构建大鼠脾虚模型，并在造模成功后设置6个处理组，每组含10只大鼠，雌雄各半，其中：正常组(N组)保持正常喂养方式，模型组(T0组)保持脾虚状态，且均不予以药物治疗；莫沙必利组(TM组)予以每1 kg体质量0.01 g的枸橼酸莫沙必利，低、中、高剂量组(T1、T2和T3组)的给药量分别为每1 kg体质量给予10.0、5.0和2.5 mL的复方木香药液(其中药物含量相当于3.00 g·mL -1的生药材)。连续给药14 d后，采集大鼠血样并进行有关血液指标的测定。结果显示：1) T0组大鼠精神萎靡、扎堆、拱背、皮毛枯槁、嗜睡等症状依然明显；T1、T2、T3和TM组大鼠的脾虚症状均有所减轻，与T0组相比体质量增长率和食物利用率有所提高。2) 经过药物治疗，脾虚大鼠血液中的血小板计数得到提升，白细胞计数和总蛋白质量浓度与正常大鼠无明显差异；但血红蛋白质量浓度与红细胞计数未恢复。3) N组与T0组相比血清D-木糖质量浓度有统计学意义上的升高(p<0.05)，T3组与N组的该指标差异无统计学意义，但与T0组的该指标差异有统计学意义(p<0.05)。N组与T0组相比血清免疫球蛋白G质量浓度有统计学意义上的升高(p<0.05)，但4个药物治疗组与N组的该指标差异无统计学意义。N、T3组与T0组相比血清胃动素均有统计学意义上的升高(p<0.01)，N、T3组雄性个体间的该指标差异无统计学意义但雌性个体间的该指标差异具有统计学意义(p<0.05)；N组与其他5组相比血清胃泌素质量浓度均有统计学意义上的升高(p<0.05)，TM、T3组与T0组相比该指标也有统计学意义上的升高(p<0.05)。N组与T0组的血清血管活性肠肽质量浓度差异具有统计学意义(p<0.01)；在雄性个体间，TM、T3组与T0组相比血清血管活性肠肽质量浓度均有统计学意义上的升高(p<0.05)，但与N组相比该指标没有统计学意义上的差异；在雌性个体间，T3组与T0、N组相比血清血管活性肠肽质量浓度分别有统计学意义上的升高 (p<0.01)和降低(p<0.05)。N、T0组雌性大鼠的淀粉酶浓度差异具有统计学意义(p<0.05)，N、T0组雄性大鼠的该指标差异无统计学意义，T2、T3和TM组与N、T0组相比该指标的差异均无统计学意义。由上述结果可知，复方木香保健酒能提升脾虚大鼠的肠胃运动能力，促进脾虚大鼠消化吸收，增强脾虚大鼠免疫力，最终促进脾虚大鼠的康复。