一种自剪切内含肽重组酿酒酵母表达优化研究

自剪切内含肽纯化系统在大肠杆菌中已经得到很好的应用。为了在真核生物中应用该系统,以酿酒酵母为宿主,p HR质粒为表达载体,构建微型内含肽ΔI-CM intein酿酒酵母表达系统。以猪免疫球蛋白Ig G的Fc domain为亲和标签,绿色荧光蛋白gfp为报告蛋白,在酿酒酵母GPD强启动子作用下,表达出融合的Fc-intein-gfp蛋白。检测发现融合序列在起始密码子ATG前加入一段Kozak序列有利于gfp表达。在此基础上,将微型内含肽ΔI-CM intein序列替换成密码子优化的ΔI-CMintein-O序列,显著促进gfp蛋白的表达量,初步实现了ΔI-CM intein融合蛋白的高效表达。为新型自剪切内含肽酿酒酵母表达系统的建立和重组蛋白高效纯化的实现奠定了基础。     

人参三肽的序列分析

采用Sephadex LH₂₀色谱柱, 以体积分数10%的甲醇为流动相分离人参中具有增强记忆活性的肽类成分, 通过高效液相色谱系统将其纯化, 并用蛋白质测序仪分析其氨基酸序列. 结果表明,  所得序列为Gln-Thr-Ser的新三肽.     

新城疫病毒F 蛋白七肽重复序列（HR）三螺旋HR212蛋白的抗体抑制病毒和细胞融合

膜融合是囊膜病毒侵染过程中的一个关键步骤,新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)中两个高度保守的七肽重复序列—HR1和HR2是病毒膜融合过程中的重要功能结构域,在膜融合不同时期表现出不同的构象,因此可能是产生中和抗体反应的潜在的靶目标．作者曾发现HR2多肽和稳定的三螺旋蛋白HR2-HR1-HR2(HR212)能够抑制新城疫病毒(NDV)与细胞的融合．文中证实HR212蛋白在家兔中能引发很强的免疫反应,所产生的抗体可识别HR1和HR2多肽序列,并能抑制NDV和鸡红细胞的血凝反应,以及抑制病毒和细胞的融合．研究结果说明NDV HR212复合体在作为病毒和细胞融合的抑制物的同时,所产生的抗体也可以阻断病毒的侵染．     

草鱼皮酶解工艺及水解物对嗜热链球菌增殖作用研究

首次研究了水产品蛋白酶解物对乳酸菌的增殖作用。选择草鱼皮为原料,通过蛋白酶Protease P“Amano”6对其进行酶解,其水解物可以作为培养嗜热链球菌增殖的氮源。同时以水解度和水解物对嗜热链球菌的增殖效果为评价指标,并利用正交实验对酶解工艺进行了优化。结果表明,蛋白酶Protease P“Amano”6对草鱼皮最佳的酶解条件为:加酶量3%、料水比1∶3(m/V)、酶解时间7 h、pH 8.0、反应温度45℃。     

硒与人体健康

本文主要论述了硒在人体内的吸收和排泄，它的主要生理功能和缺乏所引起的病症，以及如何补硒。     

用基因嵌合和定点突变法定位甲酰肽受体的结合结构域

Ｎ－甲酰肽ｆＭｅｔ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（ｆＭＬ）是来源于细菌的化学趋向性小肽，已知ｆＭＩＰ是活化中性颗粒白细胞的强激活剂，因此阐明ｆＭＬＰ受体结合ｆＭＬＰ的结构域对控制炎症的发生，中性白细胞在组织中的浸润具有重要意义。     

用于感染脓毒症治疗的鲎抗内毒素因子模拟肽新药的研发

脓毒症是临床上常见的危重病症,可引起脓毒性休克和多器官功能障碍综合征,是导致ICU病人死亡的主要原因之一.革兰氏阴性菌细胞外膜主要成分之一的脂多糖,也称为内毒素,是脓毒症全身性失控性炎症反应的关键启动因素.在迄命已发现的活性物质中,来源于海洋生物鲎的变形细胞中的LALF因其显著的抗菌及中和LPS活性受到广泛的关注;但不论是LALF全基因或功能区重组的表达产物,均具有明显的抗原性或溶血毒性,无法直接运用于临床.课题组经采用生物信息学手段对LALF功能区结构进行了计算机模拟、变构和修饰;在国家科技攻关项目和国家863计划课题等资助下,历经十余年研究.