游戏作品法律定位变化及展望

【目的】为促进司法实践的发展,为游戏作品提供法律保障,有必要对游戏作品法律定位进行研究。【方法】运用案例分析与比较研究的方法,对我国司法实践进行分析。【结果】在司法实践中,游戏作品法律定位因纠纷所针对游戏内容与表达形式的不同而有所不同,且在不同时期存在着不同的问题。【结论】著作权法应该区别对待游戏的内容与表达形式,内容主要包括技术实现与画面实现两个方面,表达形式包括游戏画面与游戏音乐两部分,应将游戏的具体规则的表达归入内容中,纳入保护范围。基于司法实践中的不足和对于游戏作品保护的欠缺,倡导应该将游戏作品统一归类,在著作权法上予以规定,进行保护。     

线粒体相关内质网膜对线粒体功能的影响

线粒体是一种具有半自主性的细胞器。生物体内的生物合成、呼吸、分泌及机械运动等全部细胞活动所需要的化学能都是由线粒体提供的。线粒体相关内质网膜(MAMs)是与线粒体紧密联系的脂筏样结构域,位于线粒体与内质网(ER)之间。MAMs不仅仅在结构上连接ER和线粒体,还富含多种连接和功能蛋白,因此MAMs必然会对ER和线粒体功能产生影响。文章综述了MAMs的结构、分子组成及其对线粒体功能的影响,主要集中在线粒体融合、线粒体分裂、线粒体自噬、线粒体能量代谢及线粒体活性氧生成等方面,以期为通过MAMs调控线粒体功能来改善相关疾病提供参考。     

一类时滞HBV感染模型的最优治疗策略

基于病毒感染过程中存在胞内时滞,本文建立了乙型肝炎病毒HBV DNA核衣壳和细胞-细胞感染的时滞HBV感染模型,并研究两种药物治疗的最优控制问题。基于庞特里亚金极值原理,得到所建模型最优控制的存在唯一性及其特征表达。最后结合数值模拟验证了最优控制策略在降低感染肝细胞浓度和病毒载量方面的有效性。结果表明,时滞对最优控制策略有一定的影响,但不会影响最优控制的长期治疗效果,且干扰素类药物（如聚乙二醇干扰素,Polyethylene Glycol Interferon,简称PEG IFN）的控制效果要优于核苷类药物（如拉米夫定,Lamivudine,简称LMV）。     

线粒体lncRNA IDL影响非小细胞肺癌氧化磷酸化

为了探究线粒体长链非编码RNA(mitochondrial long non-coding RNA,mtlncRNA)IDL在人非小细胞肺癌细胞(human non-small cell lung cancer, NSCLC)代谢和生长中的作用及机制,本研究首先在A549细胞中通过线粒体压力测试发现敲低IDL会导致细胞的氧化磷酸化功能受损,接着通过细胞增殖实验、划痕实验和克隆形成实验,证明了敲低IDL时人非小细胞肺癌细胞A549和H1299的生长速度变慢、迁移能力和克隆形成能力减弱.随后通过RNA沉降实验(RNA pull-down)和RNA免疫沉淀实验(RIP)找到了在体内外均可以与IDL特异性结合的蛋白——ATP合成酶α亚基,即ATP5A1蛋白,并通过免疫共沉淀实验(Co-IP)证明了IDL下调会导致ATP5A1蛋白的O-GlcNAc修饰水平增加,在A549细胞中敲低ATP5A1也得到了与敲低IDL时一致的细胞表型.以上结果说明敲低IDL会导致非小细胞肺癌细胞氧化磷酸化功能受损、细胞生长受抑制.     

小鼠细小病毒VP2蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和免疫原性分析

目的 利用杆状病毒表达系统合成重组小鼠细小病毒(MVM)VP2蛋白,并对其免疫原性分析。方法 将优化后的MVM VP2序列克隆至表达载体pFastBac1,命名为pFastBac1-MVM VP2,再将其转化至DH10Bac感受态大肠杆菌中形成重组杆粒,提取重组杆粒经PCR鉴定正确后转染昆虫细胞Sf9,镜下观察到细胞明显病变后收获重组杆状病毒rBac-MVM VP2。Sf9细胞接重组病毒48和72 h后,用间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)法验证重组蛋白的免疫原性。结果 构建的rBac-MVM VP2重组杆状病毒感染Sf9细胞后,可成功表达MVM VP2重组蛋白,经Western blot和IFA检测分析,重组蛋白具有较好的免疫原性且在病毒感染72 h时表达量较高。经蛋白纯化后可得到纯度较高的VP2重组蛋白。结论 本研究利用昆虫细胞-杆状病毒系统成功表达MVM VP2蛋白并具有良好的免疫原性,为VP2相关功能的研究和临床诊断方法的建立奠定基础。     

piRNA-102526参与缺氧/复氧诱导心肌细胞焦亡作用及机制研究

为探究piRNA-102526与心肌细胞焦亡的关系,体外构建小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧模型,设置3 h、6 h、9 h、12 h、24 h缺氧时间梯度及6 h复氧条件,检测小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡水平。利用qRT-PCR检测piRNA-102526表达水平,Western Blotting检测焦亡相关蛋白(GSDMD、Caspase-1、IL-1β、ASC)表达,PI染色和LDH活性检测细胞死亡。研究结果显示,小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧6 h/复氧6 h,细胞焦亡相关蛋白表达水平最高。抑制piRNA-102526表达,小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡加剧,过表达piRNA-102526,小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡减少。这表明,piRNA-102526能通过Caspase-1参与经典焦亡通路,调节小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡过程。     

中国科技期刊卓越行动计划领军期刊的引证指标特征及发展建议

分析入选“中国科技期刊卓越行动计划”（以下简称“卓越行动计划”)领军期刊现状及其发展趋势。利用WebofScience数据库和期刊官网检索,总结“领军期刊”与国际顶刊（《自然》《科学》《细胞》）的各项指标数据,分析领军期刊最近3年来的发展情况,并依此提出相应的发展策略。结果显示22种领军期刊主要引证指标表现显著提升。2020年,20种期刊影响因子位于学科Q1,2种位于Q2;16种期刊学科排名跻身前10%,10种排名跻身前5%;9种期刊影响因子达到10分以上。领军期刊总被引频次由2019年的99 767次大幅增长至153 610次,增幅54%;期刊引文指标与被引半衰期都有不同程度的提升,各项指标都显示出领军期刊呈现快速上升态势,在多个学科已占据领先位置,但与自然科学的三大期刊《自然》《科学》和《细胞》等国际顶级期刊仍有较大差距。据此,提出促进我国科技期刊建设成为世界一流科技期刊的相关建议：坚持内容高质量战略;紧盯学科热点与重大事件,引领科学研究的发展;坚持集群化发展战略,着力提升我国科技期刊国际传播力,促进我国科技期刊品牌的建立与推广。坚信在“卓越计划”的支持下,领军期刊会不断调整办刊思...     

NFATc3敲除对肝癌细胞转录组的影响及其潜在靶基因的初步筛选

目的 探究NFATc3基因敲除对肝癌细胞转录组的影响,并对NFATc3调控的靶基因进行初步筛选,以期为明确NFATc3靶基因及寻找新的抗肝癌治疗靶点提供依据。方法 利用敲除NFATc3的SMMC7721细胞,在有或无仙台病毒(Sendai virus, SeV)感染时进行转录组测序(RNA sequencing, RNA-Seq)检测,并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。对两组测序数据差异基因交集中的免疫相关基因进行PPI蛋白网络互作分析,并利用qRT-PCR实验验证敲减或过表达NFATc3对肝癌细胞内S100A8和S100A9表达水平的影响。利用数据库数据,分析肝癌中S100A8和S100A9 mRNA表达水平及预后。结果 经RNA-seq分析发现,肝癌细胞中NFATc3敲除后差异表达基因主要富集在发育、代谢、细胞外基质和血管生成等通路。PPI蛋白网络分析发现S100A8和S100A9可能是NFATc3的重要靶基因。qRT-PCR实验结果显示敲除或敲减NFATc3均可上调S100A8和S100A9的表达,而表达外源NFATc3则可下调S100A8/S100A9的表达。数据库分...     

雷帕霉素对高糖高脂诱导的MIN6细胞铁死亡的研究

目的 探讨自噬诱导剂能否通过激活自噬减少高糖高脂诱导的小鼠胰岛β细胞铁死亡。方法 选取小鼠胰岛瘤MIN6细胞,通过25 mmol·L^-1高糖联合200μmol·L^-1棕榈酸钠(high Glucose and high Sodium Palmitate, GP)干预,建立胰岛β细胞损伤模型,在此基础上给予雷帕霉素(rapamycin, RAPA)及铁死亡诱导剂(erastin, Era)干预24 h后,用CCK8检测细胞活力;用试剂盒检测细胞亚铁离子、谷胱甘肽(glutathione, GSH)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)及活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACS...     

鸡乳酸脱氢酶A基因突变对DF-1细胞能量代谢和法氏囊病毒增殖的影响

通过启动子优化构建了适用于DF-1细胞的CRISPR载体;随后通过同时共转靶向GgLDHA的2条sgRNAs,获得了13株GgLDHA基因突变型细胞株,其蛋白表达水平和酶活出现不同程度的下降。通过对突变克隆细胞株生长、葡萄糖和乳酸代谢、能量代谢以及IBDV增殖研究发现,乳酸对葡萄糖得率从2.1显著下降为1.6,腺苷三磷酸（ATP）合成速率明显提高,相比对照细胞最高提高了57%,突变细胞株的能量代谢效率获得了有效改善。突变型细胞株的IBDV滴度较野生型均有明显增加,相比对照最大提高了5倍。通过定向突变GgLDHA基因,明显降低了DF-1细胞的乳酸积累,有效改善了细胞的能量代谢,并显著促进了IBDV病毒的增殖,为提高IBDV病毒疫苗的生产能力提供了一种新思路。