PRRSV主要蛋白结构分析及其抗原表位的研究

【目的】对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要蛋白,即GP5,GP4,GP3,GP2的二级结构进行分析.【方法】在线利用DNA Star软件分析GP2~GP5蛋白的抗原表位,以指导未来的疫苗设计.【结果】:1GP2~GP5的理论等电点PI值分别为10.12,8.42,8.05,8.41,GP2的PI值明显高于GP3~GP5的PI值(p0.05),而在GP3~GP5之间没有明显差异(p0.05);2GP4蛋白和GP5蛋白高抗原指数的基序数量多,形成抗原表位的可能性最大,是设计疫苗的重要靶点.【结论】高致病PRRSV JXA1株的GP4蛋白和GP5蛋白高抗原指数的基序数量多,形成抗原表位的可能性最大,是设计疫苗的重要靶点.     

重组β-葡萄糖醛酸苷酶转化甘草酸的定向性改造

为提高重组β-葡萄糖醛酸苷酶的底物特异性,通过易错PCR方法对其进行突变并构建突变体文库,利用薄层层析和高效液相色谱对突变文库进行筛选,获得了突变株PGUS（M51）E,其底物特异性提高了41％。突变酶的酶学特性研究发现,该突变酶的最适pH值和温度较PGUS-E无显著变化,酶活力下降了16．86％,T。值提高了5℃;序列分析结果表明：PGUS（M51）-E共发生5处突变,其中3处发生在糖基结合域。因此,利用定向进化策略能有效提高伊葡萄糖醛酸苷酶的底物识别特异性。     

10例肿瘤导致ABO血型系统抗原减弱病例分析

探讨肿瘤因素导致 ABO 血型系统抗原减弱所引起的定型困难,解放军总医院2002年以来.在血型鉴定时发现10例肿瘤患者血标本,正向定型出现弱凝集或不凝集;反向定型正常,正反定型不一致.其自身对照为阴性,且排除假凝集所致.通过吸收放散、唾液型物质中和试验、H 抗原强度等实验检测弱抗原,并对患者进行随访,在患者病情缓解后重新进行血型鉴定.结果表明10例受检者红细胞上确有弱抗原存在,其中3例血清学实验呈现较明显亚型特征,但肿瘤经过治疗缓解后,亚型特征逐渐减弱甚至消失,定型恢复正常.说明某些肿瘤可以导致 ABO 血型系统抗原减弱,出现正反定型不一致,血清学呈现亚型特征,应综合病情、输血史、家系调查及特殊血清学检查来确定血型,并与亚型相鉴别.     

基于免疫危险理论的手机恶意软件检测模型

为了提高智能手机恶意软件检测的自适应性和有效性,该文提出了基于免疫危险理论的手机恶意软件检测模型,该模型由4个部分组成:数据采集、危险信号生成、共刺激信号生成和预警部分,针对不同的恶意软件,采用微分方法表达危险信号,由自适应抗原提呈细胞产生相应的共刺激信号,最后对恶意软件产生预警.通过实验验证了该文模型的自适应性和有效性.     

环丙沙星人工完全抗原的制备与鉴定

分别采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法制备环丙沙星的牛血清白蛋白与卵清白蛋白载体的人工完全抗原CPFX-BSA和CPFX-OVA.人工完全抗原经SDS-PAGE凝胶电泳初步鉴定后,考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量分别为1.24和0.58 mg.mL-1,将偶联抗原稀释至一定浓度,紫外分光光度法测其波形,根据偶联前后波形及吸收峰的变化鉴定偶联物分子量大于载体蛋白,证实CPFX与BSA和OVA偶联成功,根据游离半抗原、载体蛋白和完全抗原偶联物各自的紫外吸光度、摩尔吸光系数,初步定量计算出偶联结合比分别为7.2∶1和6.4∶1.质谱法测定CPFX-BSA和CPFX-OVA分子量分别为6.895×104和4.586×104,推算偶联比分别为5.6∶1和4.2∶1,进一步证实了偶联比和人工抗原制备成功.制备的人工完全抗原CPFX-BSA和CPFX-OVA可分别作为免疫抗原和包被抗原,为环丙沙星单克隆抗体的制备以及环丙沙星快速检测试剂盒的研制奠定基础.     

CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1在肺癌化疗前后表达水平的分析

应用电化学发光法测定110例肺癌患者化疗前、90例肺癌患者化疗后和65例肺良性疾病患者血清中CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1的表达水平,计算阳性率,并进行统计学分析.结果表明:肺癌患者化疗前血清中CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1表达水平显著高于肺部良性病变组(P0.01);CEA在肺腺癌、SCC-Ag在肺鳞癌、NSE在SCLC中水平最高,与其他组比较差异有统计学意义((P0.01或P0.05));NSCLC组CYFRA21-1表达显著高于SCLC组,两组比较差异有统计学意义(P0.05).肺癌组90例患者化疗后CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1的表达较前下降,差异均有统计学意义(P0.05));复查CT发现化疗无效病例SD+PD组4种肿瘤标志物表达水平较化疗前升高,与化疗前比较P0.05.     

拟南芥ACOS5基因启动子的克隆和表达载体构建

花药组织特异性启动子在花药发育的分子遗传学中有重要的研究价值.采用PCR方法克隆了1kb长度的ACOS5基因启动子,并将其连入含有GFP基因的拟南芥表达载体p1300中.电激转化农杆菌GV3101后,通过农杆菌介导转化拟南芥,获得转基因植株.显微观察显示,转基因植物花药只在绒毡层中有荧光表达.这说明ACOS5基因启动子可以在拟南芥花药中驱动外源GFP基因的特异性表达.     

阻断剂对磁致伸缩生物传感器性能的影响

病菌的非特异性结合是影响生物传感器性能主要因素之一,而阻断剂是降低病菌非特异性结合的主要途径之一。本文以李斯特菌为目标病菌,对磁致伸缩生物传感器进行不同的生物加载处理,包括：无生物加载,抗体加载,阻断剂酪蛋白加载,阻断剂牛血清白蛋白加载。通过上述传感器对李斯特菌的检测实验,研究阻断剂的阻断效率以及其对磁致伸缩生物传感器性能的影响。实验结果表明,上述两种阻断剂均可以显著降低李斯特菌与磁致伸缩生物传感器表面的非特异性结合,提高磁致伸缩生物传感器的稳定性能。     

神经元特异性烯醇化酶的快速检测方法研究

拟以双抗体夹心法制备快速检测试条,检测脑中风疑似患者体液中的NSE水平,从而达到快速诊断目的。本研究通过DEAE-Sephadex A-50柱层析法完成了牛脑NSE的提取纯化,并建立了具有抗ANSE活性的Anti-NSE MoAb AA10和AB3单克隆抗体细胞株,完成了单克隆抗体的筛选、制备、工作单抗配对等方面的工作。     

MOS对鲤免疫和生化指标的影响

本试验以健康的建鲤为实验动物,研究在其日粮中添加不同水平的酵母甘露寡糖对其的影响,试验结果表明:添加不同水平的MOS增加了胸腺和脾脏淋巴细胞的含量;同时随MOS添加量的增高血清中溶菌圈的平均直径呈上升趋势,、组直径与对照组(P<0.01)、组直径与对照组(P<0.05),其它各组与对照组之间差异不显著(P>0.05);添加不同水平的MOS对腹腔吞噬细胞吞噬活性的影响:随日粮中添加MOS的水平的升高,吞噬细胞的吞噬率和吞噬指数有上升的趋势,经方差分析,试验组与对照组之间差异显著(P<0.01),吞噬指数试验组与对照组之间差异显著(P<0.01);血清中SOD分别比对照组高6、9、10、23、27IU,、组与对照组之间差异极显著(P<0.01);血液中钾、钙、镁、氯离子的含量随MOS添加量升高有所上升,但是效果不显著(P>0.05);血液中的钙随MOS的添加增加明显(P<0.01);血液中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量随MOS添加而升高:其中试验组、、、的总蛋白比对照组高3.19(P<0.01)、4.07(P<0.01)、2.16(P<0.05)、1.21(P<0.05),试验组、、、的白蛋白比对照组高1.18(P<0.01)、1.69(P<0.01)、1.42(P<0.01)、1.11(P<0.01),其余各组与对照组相比无显著差异,试验组、的球蛋白比对照组高2.01(P<0.01)、1.38(P<0.01),其余各组与对照组相比无显著差异;。