牦牛肝片吸虫四种抗原交叉免疫印迹分析

用牦牛肝片吸虫四种抗原分别制备四种抗血清，其ＥＳＩＳＡ效价 １：８００，１：１６００，１：３２００和１：８００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳区带组分分别为２５，２４，１８和９条带；免疫印迹结果，各种抗清与相庆抗原作用的主要抗原成份分别为５，１０，７和３；四种抗原中存在的共同抗原为１７．２ｋＤ；特征抗原ＨＡ为２９．９ｋＤ，ＳＡ为２７．２ｋＤ的２４．３ｋＤ；正常兔血清与各个抗原间均未出现免疫反应。     

两种不同示踪剂用于蛋白质与抗原分子微阵列信号检测的对比研究

以氧化型琼脂糖凝胶膜为基片，制作蛋白质与抗原分子微阵列，建立了检测固相人IgG,游离IgG和自身抗体分子的免疫学测定模式，分别以辣根过氧化物酶－二氨基联苯胺一双氧水（HRPDAB－H2O2）和胶体金－硝酸银－对苯二酚2种示踪系统作为蛋白质与抗原分子微阵列信号显示剂，并对其作用的原理与特点进行讨论，检测结果发现基于胶体金的免疫金银染色法（IGSS）比固相酶免疫测定法（EIA）敏感，2种示踪系统对固相人IgG的最低检出量分别为0．05ng和0．5ng；而对血清游离IgG的最低检出量IGSS法比EIA法至少高出10倍，两法用于自身抗体的测定亦表现出较好的重复性，在14例HCV感染者中，自身抗体的总体检出率分别为38．6％和31．4％，结果具有显著的同步性，故同时辅以2种示踪剂并用于阵列芯片的联合测试，有助于提高自身抗体的总体检出水平。     

物种特异性PCR在中药材白花蛇舌草鉴定中的应用

提供中药材白花蛇舌草物种特异性鉴定引物以及建立简便、高效的特异性鉴定方法和研制鉴定试剂盒．为此收集目前市场上出现的所有白花蛇舌草正伪品样品共9种,并测定所有样品的核糖体基因ITS区核苷酸序列,在此基础上设计一对物种特异性引物B174和B53,特异性地鉴定白花蛇舌草．表明用这对引物扩增白花蛇舌草,获得207bp的特异性产物,而其它伪混品样品没有阳性产物．可以认为用白花蛇舌草特异性鉴定引物B174和B53的所配制的鉴定试剂盒具有很好的应用前景．     

大肠杆菌氨基转移酶的非天然氨基酸底物特异性研究

氨基转移酶催化L-氨基酸和α-酮酸之间的氨基转移.TLC(薄层层析)和甲臜颜色反应检测大肠杆菌4种氨基转移酶(TyrAT、IlvAT、AspAT和AvtAT)催化6种非天然氨基酸的转氨活性,发现AvtAT和AspAT无非天然氨基酸转氨活性.TyrAT能催化DL-高苯丙氨酸、L-正亮氨酸和L-正缬氨酸的转氨反应,而Ilv...     

ROC曲线评价酶免法检测消化病患者幽门螺杆菌

摘要 目的 探讨消化疾病患者粪便幽门螺杆菌特异性抗原（Hp Stool antigen ,HpSA）在诊断Hp感染中的临床意义。方法 随机收集353例北京军区总医院消化内科住院和门诊患者,其中男性206例,女性147例,年龄范围14 - 89岁,平均年龄49.0? 15.73岁。入组者均空腹6小时以上,留取新鲜粪便标本,应用酶免疫法（EIA）检测HpSA,同时以13C-尿素呼气试验（13C-UBT）作为金标准。应用SPSS15.0软件对数据进行统计学分析,并绘制受试者操作特征分析曲线（Receiver Operating Characteristic curve, ROC curve）,评价HpSA试验的诊断价值。 结果 X 2 检验表明EIA法检测Hp感染与13C-UBT比较差异无显著性（p >0.05）; EIA法检测HpSA敏感度94.35%,特异度98.30%,阳性预测值98.24%,阴性预测值94.54%,阳性似然比55.5,阴性似然比0.06,符合率96.32%,Youden指数0.93,Kappa值0.93;EIA法检测HpSA的ROC曲线下面积为0.944,与完全无诊断价值的机会线下面积0.50相比差异显著（p<0.001）。结论 HpSA是一种非侵入性诊断Hp感染的方法,准确性和可靠性均较高,值得推广应用。     

Ki67、HSP70在涎腺多形性腺瘤的表达及临床病理学意义

目的研究细胞核增殖抗原(Ki67)和热休克蛋白70(HSP 70)在涎腺多形性腺瘤中的表达,探讨其与该肿瘤的临床病理意义。方法采用SP免疫组化染色方法检测33例多形性腺瘤中Ki67和HSP 70的表达,采用SPSS统计软件进行分析。结果 Ki67和HSP 70在多形性腺瘤中的表达率均明显高于正常涎腺组织(P0.05)。结论与正常涎腺组织相比,Ki67和HSP 70在涎腺多形性腺瘤中,均有明显较高水平表达,提示其与多形性腺瘤的发生、发展有一定关联。     

重点实验室、实验基地简报之二

浙江省生物治疗重点实验室(浙江大学医学院附属邵逸夫医院)和浙江东方基因生物制品有限公司合作研究开发了一种能够检测外周血中游离肿瘤细胞的高灵敏度试剂盒,这种试剂盒能够分析统计血液样本中的游离肿瘤细胞,从而为医生更好地治疗癌症提供新方法。经研究结     

拟南芥AtJ70的组织特异性表达及亚细胞定位

以野生型和PAtJ70∶GUS转基因拟南芥为材料,以定量PCR和GUS染色方法研究了拟南芥J-蛋白AtJ70的组织特异性表达.结果显示AtJ70基因在根、茎、叶、花和果实中都有表达,花和叶中表达最高,长角果和根中次之,茎中最低.此外,以AtJ70-mGFP4转基因拟南芥为材料,使用激光共聚焦显微镜研究了AtJ70的亚细胞定位.结果显示,AtJ70主要定位于细胞核中.     

植物高度同源重复基因的PCR检测

以油菜中三个同源性高达90%以上的AP3基因为研究对象,采用三种不同的DNA聚合酶进行常规PCR扩增和纳米PCR扩增.结果显示：纳米PCR比普通Taq DNA聚合酶和低保真Plus DNA聚合酶具有更高的扩增特异性,即在相同的退火温度下,只有纳米粒子PCR扩增出特异性的目的产物而无非特异性产物; 虽然高保真Pfu DNA聚合酶PCR显示出了同纳米PCR一样的扩增特异性,但纳米PCR不仅能表现出较高的扩增特异性,而且还显示出了更好的扩增效率.并且,纳米PCR即使是在30 ℃的低退火温度下依旧能扩增出特异性     

检测鹅细小病毒的恒温隔绝式荧光PCR方法的建立及初步应用

鹅细小病毒(GPV)是一种主要侵害雏鹅和雏番鸭的病原,给养禽业带来了巨大的经济损失.利用GPV的VP3基因保守区域设计了一对引物和探针,经反应体系的优化,建立检测鹅细小病毒的恒温隔绝式荧光PCR方法(ii PCR方法),并与TaqMan荧光定量PCR方法比较.结果显示,该方法能特异性检出GPV,对其他常见无关病原不检出,特异性好;检测下限是38.1拷贝·μL^-1,灵敏度高;批内、批间变异系数均小于5%,重复性好;该方法对31份临床疑似样本的检出率为93.54%,高于TaqMan荧光定量PCR方法的检出率(83.87%).本研究为鹅细小病毒的现场快速检测提供了新的技术手段.